血管内皮生长因子在宫腔粘连患者子宫内膜中的表达

1、血管内皮生长因子在宫腔粘连患者子宫内膜中的表达         11-05-19 09:35:00     编辑：studa20                   作者：韩燕华 王晶晶 孙世君 苏园园 【摘要】  目的 通过检测宫腔粘连(IUA)患者子宫内膜血管内皮生长因子(V

2、EGF)的表达,探讨VEGF在宫腔粘连发病中的作用。 方法 选择经宫腔镜诊断为宫腔粘连的患者35例为IUA组，因男性不孕在本院行人工受精治疗的女性25例为对照组，采用免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白过氧化物酶连结法(SP)检测两组患者子宫内膜组织中VEGF的表达水平。 结果 粘连组子宫内膜VEGF表达水平为(3.53±0.16)分，对照组为(3.22±0.08)分，粘连组高于对照组;宫腔粘连患者VEGF表达水平重度为(3.87±0.25)分、中度为(2.45±0.10)分、轻度为(2.28±0.10)分，重度宫腔粘连患者VEGF表达水平明显高于轻

3、、中度，差异均有统计学意义(P<0.01)。 结论 子宫内膜VEGF的异常表达，可能参与宫腔粘连的形成。 【关键词】  宫腔粘连; 血管内皮生长因子; 免疫组织化学【Abstract】 Objective To elucidate the possible mechanism of intrauterine adhesion (IUA) by detecting the expression of VEGF in endometrium. Methods A total of 35 patients who were diagnosed as IUA by hysterosco

4、py were included in the study group, and 25 women who receive in vitro fertilization treatment due to male factor were used as the control group. Immunohistochemical method was performed to detect the expression of endometrial VEGF in the two groups. Results The expression of endometrial VEGF increa

5、sed significantly in the study group compared with the control group (P<0.01). In the study group, the expression of endometrial VEGF of those with serious IUA was extremely higher than those with mild and moderate IUA (P<0.01). Conclusion The abnormal expression of VEGF may play a role in the

6、 occurrence of IUA.【Key words】 Intrauterine adhesion; Vascular endothelial growth factor; Immunohistochemical method近年来，由于盆腔炎性疾病发病率的升高及宫腔操作增多，宫腔粘连(intrauterine adhesion，IUA)在临床上越来越常见，其主要临床表现为闭经或月经过少、周期性腹痛、继发不孕与反复流产、早产等。目前IUA的研究多集中于诊断及治疗，对于其发病机制及预防的研究报道甚少。IUA发病的主要原因是子宫内膜损伤，子宫内膜损伤后的重建需要新生血管的支持，而血管内皮生长

7、因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)是最重要的血管生长因子1，本研究通过检测IUA患者子宫内膜血管VEGF的表达,探讨VEGF在宫腔粘连发病中的作用。对象与方法一、对象2007年6月2009年6月在中山市人民医院妇科行宫腔镜检查确诊为IUA患者共35例为IUA组，年龄2235岁，平均年龄(28.3±4.1)岁。选择同期由于男方不孕，到本院生殖中心行人工受精患者25例为对照组，年龄2435岁，平均年龄(27.5±4.0)岁，两组年龄比较，差异无统计学意义(P>0.05)。两组患者均无妇科内分泌疾病，术前3个月内未使用过任

8、何激素类药物或宫内节育器。为了避免不同月经周期体内雌孕激素水平变化对检测结果的影响，两组均选用术后经病理证实子宫内膜处于分泌期的患者。二、方法1.IUA诊断标准2：(1)轻度粘连。累及宫腔<1/4，粘连菲薄或纤细，输卵管开口和宫腔上端病变很轻或清晰可见;(2)中度粘连。累及1/43/4宫腔，仅粘连形成，无宫壁粘连，输卵管开口和宫腔上端部分闭锁;(3)重度粘连。累及宫腔>3/4，宫壁粘着或粘连带肥厚,输卵管开口和宫腔上端闭锁。2.手术方法：(1)术前准备。术前1 d晚上常规阴道后穹隆放置米索前列醇400 g,术前30 min予肌注阿托品0.5 mg。(2)宫腔镜检查术。膨宫压力设为1

9、00 mmHg,灌流液流速为260 ml/min(日本Olympus公司生产的4.5 mm连续灌流宫腔检查镜)。(3)治疗性宫腔镜手术。术时取膀胱截石位,常规消毒铺巾,静脉全麻。检查子宫位置、大小及附件情况,探测宫腔深度和方向,扩张宫颈至8.09.0 mm。设定膨宫压力120 mmHg,流速150 ml/min(德国STORZ公司生产的被动式连续灌流可旋转电切镜，灌流液为5 %甘露醇液。腹腔镜监护为美国Stryker公司生产的电子腹腔镜系列)。针状电极划开宫颈及宫腔粘连并打开宫腔,环状电极切取粘连组织以备送病理检查及留作标本。术毕宫腔形态基本恢复正常，以见两侧宫角与输卵管开口为标准。术后常规置

10、“O”型金属节育环1枚。(4)术后治疗。常规抗生素预防感染治疗35 d，术后第2 d开始每日服用戊酸雌二醇13 mg每天3次，连续3个月,最后1周加用安宫黄体酮 8 mg，每天1次，月经来潮后复查宫腔镜。3.标本采集及检测：IUA组在宫腔镜手术同时取适量子宫内膜，对照组于宫腔镜检查同时刮取适量子宫内膜，所取标本均常规石蜡包埋，5 m厚连续切片，常规病理组织检查。VEGF 检测采用免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白过氧化物酶连结法(streptavidinperosidase，SP)法染色(试剂均购自北京博奥森生物技术有限公司)。4.免疫织组化学检查结果判定：阳性细胞根据染色强度分为4级。无棕黄色颗粒为阴性(),有较浅的棕色颗粒为弱阳性(+),有中等强度的棕黄色颗粒为阳性(+),有较多的深棕黄色颗粒为强阳性(+)。显微镜下观察切片(OLYMPUS Bx51显微镜×400),每张切片随机选择5个视野,每个视野计数100个细胞,分别读取其中不同染色强度的细胞数,组织学积分Hscore方法进行半定量分析。Hscore=Pi(i+1)。其中Pi代表同一染色强度的阳