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文档简介
1、外切酶体成分7(EXOSC7)ELISA试剂盒说明书本试剂仅供研究使用标本:体液外切酶体成分7(EXOSC7)ELISA试剂盒试验原理:BFGF试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验( ELISA).已知BFGF浓度的标准品、未知浓度的样品 加入微孔酶标板内进行检测。先将BFGF和生物素标记的抗体同时温育。人碱性成纤维细胞生长因子ELISA检测试剂盒洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物, 然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中BFGF的浓度呈比例关系。外切酶体成分7(EXOSC7)ELISA试剂盒自备材料1 蒸馏水。2 加样器:5u
2、l、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。3 振荡器及磁力搅拌器等。安全性1 .避免直接接触终止液和底物 A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。2 实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。3 不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。操作注意事项1 试剂应按标签储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。2实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。3 不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。4 使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。5 使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分
3、混匀试剂盒里的各种成份及样品。6 洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。7.底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触, 有毒。实验完成后应立即读取 OD值 8 加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。9按照中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。样品收集、处理及保存方法1、 血清-操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000 离g 心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。2、 血浆-EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000 离心30分钟去除颗粒。3、细胞上清液-1000
4、 离丿心10分钟去除颗粒和聚合物。4、保存如果样品不立即使用,应将其分成小部分 -70 C保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37C或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。试剂的准备标准品:标准品的系列稀释应在实验时准备,不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。2 洗涤缓冲液(50 )的稀释:蒸馏水50倍稀释。操作步骤1 使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。2 根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个 样品根据自
5、己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。3 加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37C温育1小时。4 甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。5每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37C温育30分钟。6 甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次 如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。7 每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37C温育10分钟。避免光照。8 取岀酶
6、标板,迅速加入 50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。9 在450nm波长处测定各孔的 0D值。局限6号标准品以上的结果为非线性的,根据此标准曲线无法得到精确的结果。试剂盒性能1. 灵敏度:最小的检测浓度小于 1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。2. 特异性:不与其它细胞因子反应。3. 重复性:板内、板间变异系数均小于10%。外切酶体成分7(EXOSC7)ELISA试剂盒结果判断与分析1、仪器值:于波长450nm的酶标仪上读取各孔的 OD值2、以吸光度OD值为纵坐标(丫),相应的BFGF标准品浓度为横坐标(X),做得相应的曲线, 样品的BFGF含量可
7、根据其OD值由标准曲线换算岀相应的浓度。3、检测值范围:0-800pg/ml4、敏感度:1.0 pg/mlADRA1A人肾上腺素能a1A受体规格:48T/96TADRA1A人肾上腺素能a1A受体规格:48T/96TEPI 人肾上腺素 规格: 48T/96TACA人肾上腺皮质抗体规格:48T/96Tn ephri n人肾病蛋白规格:48T/96TNAIP 人神经元凋亡抑制蛋白规格: 48T/96TNT-4 人神经营养因子4规格:48T/96TNT-3人神经营养因子3 规格: 48T/96TNCAM-L1/CD171人神经细胞粘附分子配体 1 规格: 48T/96TNSE人神经特异性烯醇化酶规格:
8、48T/96TNP-Y 人神经肽 Y 规格:48T/96Tp2人神经髓鞘蛋白规格:48T/96TNF人神经丝蛋白规格:48T/96TNF人神经丝蛋白规格:48T/96T人神经生长导向因子 Slit2 ELISA Kit,48T/96T人神经生长导向因子 Slit2 ELISA Kit, 48T/96T规格:48T/96Tfractalki ne/CX3CL1人神经趋化蛋白规格:48T/96TGFAP人神经胶质纤维酸性蛋白规格:48T/96TNT人神经降压素规格:48T/96TNKB人神经激肽B规格:48T/96TCVNPF人神经保护因子规格:48T/96TNA人神经氨酸酶规格:48T/96TENA-78/CXCL5人上皮中性粒细胞活化肽 78
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