培养基适用性检查验证方案.

1、编号：FA/06-31-B培养基适用性验证方案计数培养基甘肃佛仁制药科技有限公司培养基适用性验证方案编FA/基06-适号31-B页、20颁发部门GM分行P综发政管合办部理办公室门公室1.概述 .22.验证目23.验证的范围4.验证人员及职起草人草日核核日批批准准日人期25.验证程序和方6.验证可接受的标准37.验证步骤38.结果分析及评价：9.验证报510.建议11.最准批准.5.512.所使用的记.61. 验证目的:细菌、霉菌及酵母菌计数用的培养基应进行培养基的适用性检查。本次验证的 目的是确认营养琼脂培养基和玫瑰红钠琼脂培养基适合细菌、霉菌及酵母菌数测 定。2. 参照标准：2010版中国药

2、典二部附录XI J微生物限度检查法。3. 验证项目：营养琼脂培养基和玫瑰红钠琼脂培养基的适用性检查。4. 验证小组人员及职责:4.1验证小组人员:所在部门质量部小组人员职务连学仁黄志康质量部QC主任郭萍珍质量部检验员4.2验证人员职责及要求421按验证方案及相关文件实施验证。4.2.2认真观察并做好验证原始记录。4.2.3对实施验证的结果负责。4.3验证中各部门的职责4.3.1验证领导组职责431.1制订验证总计划，负责全公司验证工作的管理。4.3.1.2确定验证项目及验证项目负责人。4.3.1.3负责验证方案的批准工作。4.3.1.5负责验证报告的批准工作。4.3.2验证工作小组职责4.3.

3、1.4负责验证资料及结果的审核工作。4.321负责验证方案的起草工作。4.322参与验证方案的讨论、确认工作。4.3.2.3负责验证方案的实施。4.3.2.4负责验证结果的分析、统计、报告工作。4.3.2.5参与验证结果的评价工作。4.3.3质量部职责4.3.3.1负责公司验证日常管理工作。4.3.3.2负责验证方案的审核工作。4.3.3.3负责验证过程中仪器、仪表、计量器具的校验工作。4.3.3.4负责检验仪器及检验方法的验证。4.3.3.6负责对验证人员的培训、考核工作。4.3.3.7负责验证资料和报告的审核工作。4.3.3.5负责验证中各项检测工作，提供验证的检验记录、检验报告，对验证过

4、程中的各项检验工作负责。4.3.3.8负责验证文件回收、归档管理工作。5. 合格标准：被检培养基上的菌落平均数不小于对照培养基上的菌落平均数的70%且菌落形态大小与对照培养基上的菌落一致。6. 试验材料:6.1. 被验证产品：营养琼脂培养基、玫瑰红钠琼脂培养基62仪器设备:6.2.1. SYQ-DSX-280B型手提式压力蒸汽灭菌器6.2.2. SW-CJ-2A 双人净化工作台6.2.3. XSW-CJ-1A单人净化操作台6.2.4. HZMJ型霉菌培养箱（2328（6.2.5. JC303-4电热恒温培养箱（3035C 6.2.6.不锈钢远红外烘箱6.2.7 101-2A电热鼓风干燥箱6.2

5、.8微波炉6.3.验证用培养基名称生产厂家批号照培养基养基养基营养琼脂培营养肉汤培玫瑰红钠琼脂培养基改良马丁培养基改良马丁琼脂培养基营养琼脂对玫瑰红钠琼脂对照培养基酵母浸出粉胨葡萄糖琼脂培养基64验证用菌株：（第代验证困株培养基培养温度培养时间（小时）大肠埃希菌营养肉汤30 35 C18 24金黄色葡萄球菌营养肉汤30 35 r18 24枯草芽抱杆菌营养肉汤30 35 r18 24白色念珠菌改良马丁培23 28 r24 48养基黑曲霉困改良马丁琼23 28C5 7 （天）脂培养基7. 菌液制备7.1. 接种大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、与枯草芽抱杆菌的新鲜培养物至营养肉汤培养基中，于 30二35

6、C培养18二24小时。取经30二35C培养1824小时的大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、与枯草芽抱杆菌营养肉汤新鲜培养物1ml加入到 9ml0.9%无菌氯化钠溶液中，10倍稀释至10-610-7约为50100cfu /的菌悬液 备用。7.2. 接种白色念珠菌的新鲜培养物至改良马丁培养基中，于2328 C培养2448小时。取经23二28C培养2448小时的白色念珠菌改良马丁液体培养物1ml加入到9ml0.9%无菌氯化钠溶液中，10倍稀释至10-5约为50100cfu / n的菌悬液备用。7.3. 接种黑曲霉菌的新鲜培养物至改良马丁琼脂斜面培养基上，于2328 C培养5二7天，加入35ml 含0.05

7、%(ml/ml )聚山梨脂80 的0.9%6菌氯化钠溶液,将抱子洗脱。然后，用适宜方法吸出抱子悬液至无菌试管内，用含0.05%(ml/ml )聚山梨脂80 的0.9%无菌氯化钠溶液制成每 1ml含抱子数5C100cfu / ml的菌悬液备用。8. 菌液计数：（每种菌液接种2个平皿）大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌与枯草芽抱杆菌分别取1ml接种至营养琼脂培1ml接种至玫瑰红养基中，置3035C培养48小时；白色念珠菌、黑曲霉分别取 钠琼脂培养基，置2328C培养72小时。菌落计数结果（2个平皿计数取平均值）见下表菌落计数结果（cfu/ ml）试验次数10-5稀释10-6稀释10-7稀释123大肠埃希金

8、黄色葡萄球菌枯草芽抱杆菌白色念珠黑曲霉9. 适用性检查:9.1.取大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌的菌液（50100cfu/ml ）各1ml，分别注入无菌平皿中，立即倾注营养琼脂培养基，每株试验菌平行制备平皿，混匀，凝固，置3035r培养48小时，计数；取白色念珠菌、黑曲霉菌的 菌液（50100cfu/ml ）各Iml，分别注入无菌平皿中，立即倾注玫瑰红钠琼脂培 养基，每株试验菌平行制备 2个平皿，混匀，凝固，置 2328r培养72小时，计数。9.2取大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽抱杆菌的菌液（50100cfu/ml ）各1ml，分别注入无菌平皿中，立即倾注营养琼脂对照培养基，每株试验菌平行制备 2个平皿，混匀，凝固，置 3035r培养48小时，计数；取白色念珠菌、黑曲霉菌的菌液（50100cfu/ml ）各1ml，分别注入无菌平皿中，立即倾注玫瑰红钠琼脂对照培养基，每株试验菌平行制备2个平皿，混匀，凝固，置2328r培养72小时，计数。93结果见附表10.结论:附表1:计数培养基适用性检查验证记录试验时间年月曰完成