定性分析、半定量分析的室内质控

1、定性分析、半定量分析的室内质控    定量分析的室内质控最常用的方法是Levey-Jin-ning控制图法，而定性分析、半定量分析的室内质控简单采用Leveynbsp;Jinning控制图法往往得不到满意的结果，这是因为定性分析、半定量分析其精密度难以用CV值表示，因而难以绘制相应的Levey-Jinning控制图和用这     秦晓光 定量分析的室内质控最常用的方法是Levey-Jin-ning控制图法，而定性分析、半定量分析的室内质控简单采用Levey Jinning控制图法往往得不到满意的结果，这是因为定性分

2、析、半定量分析其精密度难以用CV值表示，因而难以绘制相应的Levey-Jinning控制图和用这一方法来进行质控，必须针对其特点而进行质控，为“抛砖引玉，”物介绍一下作者的观点和经验，供同道们参考。 一、定性分析、半定量分析质控的若干特点 定量分析的室内质控采用Levey Jinning控制图通常是考察其精密度，定性分析，半定量分析判断阴、阳性时有一个“判断值”（cut off值），质控的目的是考察检测结果是否准确和稳定，这和定量分析又有所不同，稳定与否虽与定量分析重复性试验含义相似，但表达方式不同。 定性分析、半定量分析不仅检测项目多，而且方法类型也多，因此决定采取何种质控方法必须要考虑检测

3、方法的特点，例如HBsAg检测可能应用胶体金免疫层株法，也可能应用ELISA法，它们的质控方法则有所区别。至于干化学法作尿蛋白，尿糖等十项检测又属于半定量，质控方法又有不同。 许多定性分析、半定量检测还有一个特点，即往往是“单份”测定，如用试纸条进行检测就是这情况，检测时无法在同一试条上作质控；“单份”测定另一含义是这些检测往往是一个一个样本“单独”进行检测，因此质控就必须考虑这些情况。 二、定性分析、半定量分析质控中必须遵循的原则 定性分析，半定量的检测中，不论采用何种方法，选用何种试纸条或度剂盒，除特异性首先必须了解其“判断值”的确定是否与临床需求相符，如HBsAg检测，用于临床诊断时其灵

4、敏度应<2ng/ml，用于输血机构时应<1ng/ml，如达不到这要求则不能采用,因此选用试剂盒时必须要向厂方索取这方面的资料，如有可能还应应用相应浓度质控品或被测样品测试证实再使用。这应该是一条必须遵循的原则，这一点如做不到，则无论采用什么方法进行质控都不能保证临床的需求.  如果选用试纸进行检测，还要考虑到试纸条之间质量的均一性，即结果在试纸条之间的再现性,另外在试纸条的使用，保存过程中，以及更换批号时都必须随机抽取若干条试纸条进行测试，证明其质量可靠后再使用。 三、两个值得注意的问题 1质控品浓度选择：用肉眼直接判定的阴、阳性结果的测定时，除阴、阳性对照外，最好一浓度

5、在“判断值”附近的质控品，当试剂盒（或试纸条）质量有所变化时，仅有阴性、阳性对照往往还发现不了的情况下，用浓度接近判断值的质控品就可发现。 其理由是任何检测都有误差的存在，试剂盒（或试纸条）不论制备工艺水平多高，也不论质量多高，式纸条问检测结果都存在某些差异，而且检测过程中检测条件的不同也可以造成检测结果的差异，众所周知，这是难以避免的，只是不同产品间差异严重程度不同而已，定性分析是根据“判断值”来判断阴、阳性结果的，在“判断值”附近存在一个“反”Z现象。图1中纵座标如表示为阳性百分率，横座标如表示为被测物浓度，在“判断值”附近将形成如下曲线，形状如反Z，故称“反”现象 500)this.re

6、sized=true;this.style.width=500;" 图1 “反”Z现象 即当被测样本为阴性或低浓度时，皆出现阴性结果，而当阳性、强阳性时，不论试纸条间质量差异多大，也不论使用保存过程中试纸条灵敏度已发生变化时，皆出现阳性结果（当然这种差异及变化也要在一定程度内），也就是仅用阴、阳质控品尚不能灵敏反映试纸条的质量变化；而质控品浓度在“判断值”附近时情况有所不同，有的试纸条可能100%出现阳性结果，有的试纸条可能80%出现阳性结果，有的试纸条可能只有50%出现阳性结果，在试纸条保存过程中及检测条件发生变化时出方可较灵敏的发现，这样可避免假阴性的过多发生（阴性对照则可判断有

7、假阳性的发生）。 如用浓度在“判断值”附近的质控品进行质控，如出现阴性结果，这时检测为阳性的结果仍可报告，而阴性结果在查明原因前不宜报告。  2免疫层析及免疫渗滤一类检测，所用试纸条没有“质控线”或“质控点”，如呈色，它反映了检测过程的无失误，也反映了被测物中没有抑制物，但不能完全说明灵敏度有无变化，这是必须注意的，即不能用“质控线”或“质控点”的结果来完全代替对试纸条质量的评价。 四、质控的一些具体方法和要求： 定性分析、半定量分析有以下几种情况，不同情况应采和不同的质控方法。  1采用免疫层析、免疫渗滤及干化学试纸条进行定性检测又是使用肉眼判断结果的质控可参阅上节（“三

8、。两个值得注意的问题”）内容进行，不再赘述。  2半定量分析时（如尿十分检测，）由于不同尿液分析仪及所用试纸条的不同，对应于相同“+”（“”“+”）被测物（如蛋白，糖等）的浓度并不相同，因此应根据不同尿液分析你有所用试纸条相对应浓度选用或自制质控品进行质控，由于这类检测影响检测结果的不仅与试纸条有关，且与仪器有关，因此每天必须作质控。可用与阳性加号“判断值”相同浓度的质控品进行测试，要求90%的结果完全与予定结果相符，10%的结果只允许相关一个“级差”（如尿蛋白测定，予期结果为“+”时，则90%的结果应为“+”，10%的结果可为“+”或“+”，但不允许有“”或“+”。如与予期结果相符

9、率不足90%，必须寻找原因）。还必须指出对标本检测前仪器的校准不能代替日常的质控（人工尿液分析参考溶液配制方法附本文后，供参考）。  3适用一讯号值来判断阴、阳性结果时，这时需要选择好适当的质控征值。如ELISA法检测HBsAg，讯号值可用OD值、S/N值、S/CO值等，其中OD值波动太大，而阴、阳性判断时用的是S/N值或S/CO值，所以选用S/N值或S/CO值作质控特征比OD值好。 如S/N值或S/CO值呈正分布或变换后呈正态分布，还可采用“即刻性”质控（Grobbs异常值取舍法）及Levey-Jinning控制图进行质控，但质控图的下限必须保证不漏检、不出现假阴性结果。 如采用L

10、evey Jinning控制图，还可根据质控特征值的变化来判断试验灵敏度有关变化，如连续有五个结果在均值一侧，应考虑灵敏度增高（在均值上侧）或降低（在均值下侧），这时发生的概率为3.1%，提示应引起注意，相当Westgard多规则中的12S规则；如果连续有七个结果在均值一侧，则为“失控”（发生的概率为0.78%）,相当13S规则.  在这种类型测定时(不论测抗原或抗体),质控品的浓度最好有一个选择在”判断值”附近。这里有一情况宜以，如直接选择相等于“判断值”浓度的质控品虽然可以，但考虑到实验误差，有时可能出现假阴性结果（除非试剂盒质量能保证100%出现阳性结果），因此可选择浓度略高于

11、“判断值”浓度的质控品。理论上讲，可选择这样的质控品，其S/N值或S/CO值的均值相当于“判断值”S/N值或S/CO值的均值+3SD时浓度作质控品，即其S/N值或S/CO值的均值-3SD时等于或略高于“判断值”S/N值或S/CO值，以保证用这一浓度质控品时，有99.7%的把握判断有无假阴性发生的可能，这是一个原则性要求，按此要求确定质控品浓度实际工作中不一定能做到，可适当放宽条件，但以保证能较可能地发现假阴性为原则。 质控特征如不呈正态分布（合变换后也不呈正态分布），不要勉强地去绘制控图，必须明白，质控图像室内质控重要的质控手段和方法，但不是惟一的质控手段和方法。  4血清学测抗体用

12、滴度报告结果时，其质控判断标准是相关不超过上、下一个滴度，这是临床完全可以接受的标准，作者以为没有必要一定非绘质控图进行质控不可。 综上所述，定性分析，半定量分析的室内质控因不同情况而有所不同，判断“在控”与“失控”的标准也不完全一样，上面已提及最好采用浓度接近“判断值”的质控品进行质控，发为防止假阳性，可同时采和一阴性质控品，当采用试条进行检测时，某些情况下如不能每次检测都用质控品进行质控，亦应每周进行12次质控；另外“失控”时的处理与定理检测有所不同，如当质控出现阴性时（用浓度接近“判断值”的质控品），阴性结果仍可报告，反之如阴性质控品出现假阳性，阴性结果仍可报告。  5组化、免疫组化，免疫荧光技术：在标本检测同时应用阴、阳性对照，观察染色效果即呆，其他染色液亦可用相应标本观察染色效果以判断染色液的质量及染色过程是否可靠。  6其他检测的