W7202微生物与环境监测-4-微教材

1、微生物学及操作技术课程-微教材微课编号W7202微课名称微生物与环境监测所属模块（章节）M7子模块M7-2关键词微生物 粪便 水 空气 土壤 是否通用通用 农产品 食品是否重点建设是 否微课类型讲授型微课形式讲坛式教学设计模式启发式提问教学目标了解粪便和土壤中的微生物，掌握水体和空气中微生物教学内容知识点技能点粪便中微生物监测；水中微生物监测；空气中微生物监测；土壤中微生物监测知识讲解一、粪便中微生物（一）概述病原菌一般在环境中存在的数量不大，而且检测方法较复杂，其他微生物作为代表，间接指示肠道病原菌存在，即为粪便指示菌，其需要满足的条件有：1、是人畜粪便中的正常菌，且数量比粪便中其他菌少；2

2、、受人畜粪便污染的环境中可检出，而未受污染环境无该菌存在；3、排出之环境后，该菌存活时间与肠道致病菌相当或略长；4、对氯等消毒剂及其他不良因素的抵抗力略强与肠道致病菌；5、检出与鉴定方法比较简单。主要粪便指示菌有以下几种。 主要含有大肠菌群、粪链球菌、产气荚膜杆菌、铜绿假单胞菌和金黄色葡萄球菌。（二）主要指示微生物1、大肠菌群：是一群以大肠埃希氏菌为主的需氧及兼性厌氧、革兰氏阴性、无芽孢杆菌，能在48h内发酵乳糖并产酸产气。 测定的大肠菌群中的细菌并非全部来自粪便，有可能有腐败的植物、土壤带来，因此有不确定性。 2、粪大肠菌群：是能在发酵乳糖的大肠菌群，亦称耐热性大肠菌群。 粪大肠菌群与粪便中

3、大肠杆菌数量直接相关。 在外环境中粪大肠菌群不宜繁殖。 粪大肠菌群较总大肠菌群作为粪便污染指标菌意义更大。 检测方法也是多管发酵法和滤膜法。 3、粪链球菌：是短链状的革兰氏阳性球菌。 其作为粪便污染指标菌的优点在于在水中不会自行繁殖，但抵抗力弱于病菌。 粪链球菌可为水质细菌学评价提供有意义的补充材料。 4、产气荚膜梭菌为：革兰氏阳性，具有芽孢，能还原亚硫酸盐的厌氧菌； 存在人及温血动物的粪便中，可作为粪便污染指示菌其优点有： 有芽孢，对氯等消毒剂及外界不良环境有较强的抵抗力； 能在水中较长期存在； 特别适用于在含有有毒物质（如氯等）的水体中检测是否有过粪便污染。5、蛭弧菌：是一类以捕食细菌为生

4、的寄生菌，依靠对宿主菌的寄生和裂解使自身得到生长繁殖。当水体收到污染时，可供蛭弧菌寄生的宿主的增加，因而蛭弧菌； 大量繁殖，数量增加对污染起到指示作用； 生长繁殖需要一定时间，因此对污染的指示有滞后期； 当蛭弧菌增高时，可长时间持续较高水平； 可用蛭弧菌联合大肠菌群表示水体收粪便污染的的新旧或污染是否持续。 （三）其他指示微生物 1、沙门氏菌 种类繁多，有些对人和动物有致病性； 能引起人类伤寒症、急性肠胃炎和败血症等； 经粪-口传播，污染食品、药用动物脏器等； 在口服用药和食品中不得检出。 2、志贺氏菌 引起人类细菌性痢疾； 经粪-口传播； 被规定为食品卫生指示菌，不得检出。3、铜绿假单胞菌：

5、也称绿脓，为革兰氏阴性具有单根鞭毛的小杆菌； 存在于人畜粪便和污水中，可作为粪便污染指示菌； 此菌还存在于人的皮肤和上呼吸道，常见的条件致病菌，药品、化妆品和游泳池水的卫生指示菌。 4、金黄色葡萄球菌：为革兰氏阳性，排列成葡萄状的球菌； 存在于正常人的皮肤、鼻咽部及家畜的皮肤和肠道； 侵入破损的皮肤和粘膜，可引起局部化脓性炎症，严重时可引起败血症。有些菌株污染食品生产可产生肠毒素，达到一定剂量引起食物中毒； 在食品、化妆品、药品、游泳池水均作为重要卫生指示菌之一。 二、水中微生物监测（一）水中微生物的种类和分布1、水中的微生物主要来源： 水体中固有的微生物 来自土壤的微生物 来自生产和生活的微

6、生物 来自空气的微生物 2、种类和分布海水中常见的微生物有假单胞菌属、弧菌属、黄色杆菌属、无色杆菌属及芽孢杆菌属。 淡水中主要是一些能分解各种有机物的腐生菌，如芽孢杆菌、生孢梭菌、变形杆菌等，有的甚至还含有伤寒、痢疾、霍乱、肝炎等人类病原菌。 （二）生活饮用水的细菌标准 1、生化特征比较大肠菌群的生理习性与伤寒杆菌、副伤寒杆菌和痢疾杆菌等病原菌的生理特征较为相似，而且在粪便中数量最多，检出技术也较为方便，最合适作为水污染的卫生指标。 大肠菌群一般包括四种：大肠埃希杆菌、产气肠杆菌、枸橼酸盐杆菌和副大肠杆菌 2、细菌卫生标准生活饮用水卫生标准（GB 5749-2010） 细菌总数1mL水中不超过

7、100cfu;大肠菌群数1L水中不超过3MPN； 细菌总数平均每升不得超过1000cfu（三）水的细菌学检验1、水中细菌总数测定：无菌操作方法用灭菌吸管吸取1mL充分混合均匀的水样注入无菌平皿中，倒入融化的营养琼脂培养基的约15mL，在37 的温度下培养24h以后，数出生长的细菌菌落数，即为1mL水样中的细菌总数。2、大肠菌群的测定：大肠菌群是指能在37、24h之内发酵乳糖产酸产气，好氧及兼性厌氧的革兰氏阴性无芽孢杆菌的统称。方法主要包括多管发酵法和滤膜法。多管发酵法：又称最大可能数法（MPN），主要包括以下几步：（1）初发酵试验：加入含有乳糖蛋白陈培养基（液）中，经37培养24h；（2）平板

8、分离：将初发酵试验产酸产气的发酵管分别接种在伊红美兰琼脂平板上，置37培养24h，观察菌落形态；挑选可疑为大肠菌群细菌的菌落涂片、革兰氏染色、镜检和进行证实试验；（3）复发酵试验（证实试验）：上述可能为大肠菌群的菌落再次接入乳糖蛋白陈培养液，置37培养24h后观察结果；（4）观察结果：复发酵试验中有产酸产气者即最后确证为由大肠菌群存在；根据初发酵的数目及试验所用的检样量，利用数理统计原理或查阅专用统计表，最后算出每毫升检样中大肠菌群的最可能数目。滤膜法：主要包括抽取水样、滤膜过滤、抽滤细菌、滤膜培养、鉴定并计数典型菌落和计算总大肠菌群数。（四）水中病毒及其检验水中主要含有的病毒有脊椎灰质盐病毒

9、、肝炎病毒和其他肠道病毒 主要检验方法是饰斑检验法（五）水中微生物控制水中微生物主要消毒方法有含（1）氯氧化剂的消毒 （2）紫外线的消毒 （3）臭氧消毒 （4）微电解消毒 （5）加热消毒 三、空气中微生物监测（一）空气中微生物主要来源空气中微生物主要来源于尘土飞扬、小水滴、人和动物身体的脱臼物、呼吸物、口腔微生物。 敞开的污水处理系统通过机械搅拌、鼓风曝气等可使污水中的微生物以气溶胶的形式溅到空气中。 （二）空气微生物的种类和分布1、种类：主要是腐生的种类； 主要有霉菌、酵母菌、真菌孢子等空气中微生物的分布随环2、分布：（1）粪便境条件及微生物抵抗力不同而呈现不同的分布规律； （2）空气中微生物的数量决定于尘埃的总量。 （三）空气微生物的卫生标准目前没有统一的空气细菌卫生标准 空气污染指标：500-1000cfu/m3以上 （四）空气微生物的检测 主要检测方法有1、沉降平板法 2、液体撞击法 3、撞击平板法 4、滤膜法四、土壤中微生物监测 （一）土壤