多糖对树突状细胞功能的影响

1、多糖对树突状细胞功能的影响核心提示：摘要：树突状细胞(dendritic cells，DC)是目前已知机体内功能最强的抗原递呈细胞，也是惟一能启动初始T细胞介导免疫反应的一类细胞。论文综述了多糖对DC功能的影响，多糖能够刺激DC分裂增.摘要：树突状细胞(dendritic cells，DC)是目前已知机体内功能最强的抗原递呈细胞，也是惟一能启动初始T细胞介导免疫反应的一类细胞。论文综述了多糖对DC功能的影响，多糖能够刺激DC分裂增殖，同时能够显著地诱导DC成熟，能够有效增强DC表面分子表达与增强细胞因子分泌的能力，从而促进DC的抗原递呈能力。 关键词：多糖；树突状细胞；抗原 多糖又称多聚糖，是

2、由醛糖或酮糖通过脱水形成糖苷键，并以糖苷键线性或分枝连接而成的链状聚合物。它是由10个以上单糖基通过糖苷键连接而成，2个9个单糖基通过糖苷键连接而成的称寡糖，由一种单糖组成的多糖称均多糖，由两种以上单糖组成的多糖称杂多糖1。多糖链是生命科学中除肽链、核苷酸链之外具有重大意义的第3链，它比肽链和核苷酸链含有更多的生物信息，被认为是生命奥秘中的第三里程碑2。研究表明，多糖具有抗肿瘤、抗炎、抗病毒、降血糖、抗衰老、抗凝血、降血脂等多种生物活性；多糖与蛋白质、脂类形成的糖蛋白、脂多糖，在细胞的识别、分泌以及在蛋白质的加工和转移等方面起着不容忽视的作用；此外它还能影响细胞的分裂和分化、调节细胞的生长和衰

3、老，所以多糖的功能非常广泛。树突状细胞(dendritic cells，DC)是目前公认的体内功能最强的抗原递呈细胞(antigen presenting cells，APC)，它能有效摄取和处理抗原；然后迁移至T细胞区域，显著地刺激初始T细胞(native T cells)的增殖，从而激活T细胞产生特异性细胞毒作用，启动机体免疫反应，在激发以抗原特异性细胞毒性T细胞过继性免疫治疗肿瘤中起着重要作用3。 1多糖对树突状细胞增殖的影响 树突状细胞是目前已知机体内功能最强的抗原递呈细胞，也是惟一能启动初始细胞介导的免疫反应的一类细胞，在恶性肿瘤以及病毒感染的生物治疗中起着重要的作用。但数量极微，给

4、研究和应用带来极大困难。王斌等4观察到灵芝多糖可明显刺激小鼠脾脏DC增殖。他们将不同质量浓度的灵芝多糖、细胞因子与不同浓度的灵芝多糖配合使用，研究其对小鼠脾脏DC的增殖影响，结果发现，灵芝多糖与细胞因子组相比可明显刺激小鼠脾脏DC增殖，其较高质量浓度组作用明显；灵芝多糖与细胞因子合用，与对照组相比均有显著的增殖作用，且明显高于细胞因子组。证明灵芝多糖不仅能促进小鼠脾脏DC的增殖，而且与细胞因子有显著的协同作用。当归多糖不仅能促进小鼠脾脏DC的增殖，而且与细胞因子有显著的协同作用，具有类生长因子和协同生长因子的作用5。 2糖对树突状细胞成熟的影响 DC在受到刺激后可以由未成熟状态转化到成熟状态，

5、成熟的DC具有很强的抗原递呈能力。成熟的DC在细胞形态上发生了一定的变化，如体积增大，细胞形成许多突起；细胞表面高表达MHC类分子。邵鹏等6报道，黄芪多糖能够提高小鼠骨髓来源的DC表面分子CD11c和MHC类分子的表达，并且呈黄芪多糖浓度依赖性；空白组DC的吞噬功能很强，LPS组DC和黄芪多糖处理组DC吞噬功能都明显下降；黄芪多糖能够促进DC白细胞介素12的表达；电镜观察DC的超微结构，可见黄芪多糖处理组DC突起增多，形态上更加成熟。证明黄芪多糖能促进小鼠骨髓来源的DC表型及功能的成熟。韩进超等7报道，黄芪多糖虽不能诱导小鼠髓源性DC前体分化为DC，但可能有促进DC成熟的作用。朱杰等8发现用枸

6、杞多糖刺激小鼠骨髓DC表达IA/IE、CD11c和分泌IL12能力比空白对照组增加，吞噬FITCdextran的能力下降，并可促进同种异基因T细胞的增殖。说明枸杞多糖可以促进体外培养的小鼠骨髓DC的成熟，促进DC诱导的免疫应答启动。李声方等9研究表明，当归多糖可以促进乙肝病毒转基因小鼠DC的成熟，上调其表面协同刺激分子CD86的表达，加强其抗原递呈能力。大量文献证明培养后期加入LPS可诱导DC成熟1011，但对LPS持续性的刺激所产生的效果研究较少，季海峰等12研究脂多糖持续刺激对小鼠骨髓DC成熟的影响时，持续刺激组全程加入脂多糖，结果证明脂多糖持续刺激可抑制DC的发育成熟。学者已经对分化好的

7、DC作了比较深入的研究，脂多糖作为一种DC激活和促成熟剂已经普遍被人们接受，但是目前对未分化的DC研究还比较少，有试验报道，脂多糖对未分化的外周血单核细胞来源的DC(MoDCs)的负调节作用，MoDCs培养基中加入脂多糖将导致DC形态和表型的不成熟；细胞计数显示DC获得量减少，但脂多糖并非导致DC的凋亡；能够上调IL1、IL6、IL8、IL10和TNF的表达，但IL12的含量却很低；降低DC在混合淋巴细胞反应中促淋巴细胞增殖的能力；激活p38MAPK、抑制和降低NFB活性；用抗体中和IL10能部分地改善脂多糖对DC的抑制状态；p38抑制剂不仅能够扭转刺激所导致的形态和表型的不成熟，还能提高DC

8、的抗原递呈能力和促淋巴细胞增殖能力。这表明p38在脂多糖对DC的负调节作用中起非常重要的作用。此研究揭示了脂多糖对DC作用的双重生物学功能，它既能够刺激已经分化的未成熟的DC启动免疫反应来对抗感染，同时它还抑制未分化的DC，从而减弱炎症反应的程度达到保护正常机体组织的目的13。 3多糖对树突状细胞表面分子表达与细胞因子分泌的影响 DC表面的MHC类分子主要参与递呈外源性抗原，诱导抗原特异性CTL反应。DC对T细胞的激活还需要其表面表达的共刺激分子及黏附分子的参与，所以DC表面的CD80及CD54的表达可以影响DC的抗原递呈功能以及能够有效激活T细胞。郭文菁等14发现，罗勒多糖组DC能够表达CD

9、209、CD80、CD83、CD86、CD1a和HLADR，与对照组相比，罗勒多糖组DC表面分子CD80和HLADR的表达均明显上调，证明罗勒多糖能够调节DC表面分子CD80和HLADR的表达。陈国安等15在探讨当归多糖对慢性粒细胞白血病细胞诱导生成DC的影响时，发现GMCSF/IL4/当归多糖培养的DC中CD83、CD80、CD86表达率明显高于GMCSF/IL4组，证明当归多糖能增强这些DC表面分子的表达。试验同时也证明当归多糖能促进IL4和GMCSF对慢性粒细胞白血病细胞诱导的DC的诱生与成熟。李罗清等16研究发现，用GMCSF和IL4诱导7d所获得的DC表达一定水平的MHC类分子和共刺

10、激分子CD80、CD86。培养第6天加入LPS可显著提高其表达，而第0、3、6天连续加入脂多糖则显著抑制其表达。 大量试验证明，多糖还能够影响DC细胞因子的分泌。侯安继等17将羧甲基茯苓多糖加入经粒巨噬细胞集落刺激因子和白细胞介素4培养乙型肝炎病毒转基因小鼠脾脏来源DC，ELISA法检测树突状细胞分泌IL12。羧甲基茯苓多糖在0500 mg/L浓度对HBV转基因小鼠无毒性作用，并能显著促进乙型肝炎病毒转基因小鼠DC分泌IL12，抑制IL10的分泌。透明质酸是一种多糖，在炎症反应中透明质酸被活化的成纤维细胞释放的酶降解出一种低分子量片断sHA能够刺激产生大量的IL1、TNF和IL12，并且TNF

11、的表达有浓度和时间依赖性18。 4多糖作用下树突状细胞对混合淋巴细胞反应的影响 DC越趋于成熟它递呈抗原的能力越强，刺激淋巴细胞增殖的功能也逐渐增强。桑黄多糖试验组DC促淋巴细胞增殖能力是空白组的5倍。IL2是Th1细胞分泌的一种细胞因子，在混合淋巴细胞反应培养上清液中桑黄多糖试验组IL2的含量是空白组的2倍19。灵芝多糖试验组DC促淋巴细胞增殖能力与空白组相比有11.6%20.9%的增高，并且灵芝多糖呈浓度依赖性20。从真菌云芝中提取的蛋白多糖PSK处理人单核细胞来源的DC和小鼠骨髓来源的DC促淋巴细胞增殖能力都比空白组有显著增高，并且DC细胞呈浓度依赖性21。 5多糖对树突状细胞抗肿瘤作用

12、的影响 成熟的DC可高表达MHC分子、协同刺激分子和黏附分子从而刺激初始T细胞诱导初级免疫反应，同时通过分泌IL12活化自然杀伤(NK)细胞，促进Th1型细胞因子的分泌。王俊等22在研究不同剂量香菇多糖单独或联合gp100DC瘤苗对荷瘤小鼠的免疫治疗作用及其相关机制时，发现香菇多糖联合gp100DC瘤苗能有效抑制恶性黑色素瘤生长，无瘤生存率达到66.7%。香菇多糖联合gP100DC瘤苗治疗后，能显著增强荷瘤小鼠的细胞毒性T淋巴细胞(CTL)和NK细胞活性，提高脾细胞干扰素(IFN)和IL2分泌水平，组织学检查发现瘤体及瘤周有大量炎性细胞浸润，肿瘤细胞发生明显坏死。荣微等23报道，香菇多糖能通过调节DC的免疫功能而增强其对肿瘤的浸润功能，从而发挥更好的抗肿瘤作用，因此DC被认为是一种很强的天然佐剂，能诱导细胞毒性T细胞反应，在应用于抗感染和抗肿瘤免疫过程中发挥关键性的作用。 综上所述，多糖在提高机体免疫力、预防多种疾病的发生方面起着重要的作用，这主要归功于它能从