糖类的测定课件

1、糖类的测定（一）碱性铜盐法（一）碱性铜盐法1、直接滴定法、直接滴定法2）原理）原理 将一定量的碱性酒石酸铜甲、乙液等量混合，将一定量的碱性酒石酸铜甲、乙液等量混合，立即生成天蓝色的氢氧化铜沉淀。立即生成天蓝色的氢氧化铜沉淀。 CuSO4+2NaOH=Cu（OH）2 +Na2SO41）试剂）试剂碱性酒石酸铜甲液：硫酸铜，次甲基蓝碱性酒石酸铜甲液：硫酸铜，次甲基蓝 碱性酒石酸铜乙液：酒石酸钾钠，碱性酒石酸铜乙液：酒石酸钾钠，NaOH，亚铁氰化钾，亚铁氰化钾 糖类的测定 这种沉淀很快与酒石酸钾钠反应，生成这种沉淀很快与酒石酸钾钠反应，生成深蓝色的可溶性酒石酸钾钠铜络合物。深蓝色的可溶性酒石酸钾钠铜络

2、合物。糖类的测定 在加热的条件下，用样液滴定，在加热的条件下，用样液滴定， 酒石酸钾钠酒石酸钾钠铜具有氧化性，能将还原糖氧化成醛酸，本身还铜具有氧化性，能将还原糖氧化成醛酸，本身还原成红色的氧化亚铜沉淀。原成红色的氧化亚铜沉淀。 糖类的测定 为消除氧化亚铜沉淀对滴定终点观察的干扰，为消除氧化亚铜沉淀对滴定终点观察的干扰，在碱性酒石酸铜乙液中加入少量亚铁氰化钾，使在碱性酒石酸铜乙液中加入少量亚铁氰化钾，使之与之与Cu2O生成可溶性的络合物，而不再析出红生成可溶性的络合物，而不再析出红色沉淀，消除沉淀对观察滴定终点的干扰，使终色沉淀，消除沉淀对观察滴定终点的干扰，使终点更明显。点更明显。Cu2O

3、+K4Fe(CN)6+H2O=K2Cu2Fe(CN)6+2KOH糖类的测定 以次甲基蓝为指示剂，次甲基蓝是氧化以次甲基蓝为指示剂，次甲基蓝是氧化还原指示剂，其氧化型为蓝色，还原型为无还原指示剂，其氧化型为蓝色，还原型为无色，它的氧化能力比色，它的氧化能力比Cu2+弱，待弱，待Cu2+全部被全部被还原后，稍过量的还原糖把次甲基蓝还原，还原后，稍过量的还原糖把次甲基蓝还原，蓝色褪去，即为滴定终点。蓝色褪去，即为滴定终点。糖类的测定3）适用范围及特点）适用范围及特点适用范围：各类食品，深色食品准确性较差。适用范围：各类食品，深色食品准确性较差。特点：国家标准分析方法特点：国家标准分析方法 试剂用量少

4、，操作和计算都较简便、快速，试剂用量少，操作和计算都较简便、快速， 终点明显。终点明显。4）测定方法）测定方法样品样品 提取提取 250mL容量瓶容量瓶 加澄清剂加澄清剂水定容水定容 摇匀、静置、干滤纸过滤摇匀、静置、干滤纸过滤 弃去初滤液弃去初滤液 （1）样品处理）样品处理糖类的测定m1-10mL碱性酒石酸铜溶液相当于葡萄糖的质量，碱性酒石酸铜溶液相当于葡萄糖的质量，mg -葡萄糖标准溶液的质量浓度，葡萄糖标准溶液的质量浓度，mg/mLV-标定时消耗的葡萄糖标准溶液的体积，标定时消耗的葡萄糖标准溶液的体积，mL （2）碱性酒石酸铜溶液的标定）碱性酒石酸铜溶液的标定碱性酒石酸铜甲、乙液各碱性酒

5、石酸铜甲、乙液各5mL 250 mL锥形瓶锥形瓶 水水10mL 玻璃珠玻璃珠3粒粒 滴加约滴加约9mL葡萄糖标准溶液葡萄糖标准溶液 加热（加热（2min内沸腾）内沸腾） 准确沸腾准确沸腾30S滴定（滴定（1d/2S） 蓝色刚好褪去蓝色刚好褪去m1=V糖类的测定（3）样品溶液预测）样品溶液预测甲、乙液各甲、乙液各5mL 250 mL锥形瓶锥形瓶 水水10mL 玻璃珠玻璃珠3粒粒 加热（加热（2min内沸腾）内沸腾） 准确沸腾准确沸腾30S 滴加样液（先快后慢，保持沸腾）滴加样液（先快后慢，保持沸腾） 蓝色刚好褪去蓝色刚好褪去（4）样品溶液测定）样品溶液测定甲、乙液各甲、乙液各5mL 250 mL

6、锥形瓶锥形瓶 水水10mL 玻璃珠玻璃珠3粒粒 加约加约V预测预测-1 mL样液样液 加热加热(2min内沸腾内沸腾) 准确沸腾准确沸腾30S 滴加样液滴加样液(1d/2S) 蓝色刚好褪去蓝色刚好褪去糖类的测定滴定速度过快，消耗糖液多，反之，滴定速度过快，消耗糖液多，反之，消耗糖液少。消耗糖液少。影响测定结果的主要操作因素影响测定结果的主要操作因素碱度愈高，二价铜的还原愈快。碱度愈高，二价铜的还原愈快。因此标定和测定时消耗的体积应因此标定和测定时消耗的体积应接近，使反应体系碱度一致。接近，使反应体系碱度一致。使反应液在使反应液在2min内沸腾。内沸腾。时间短，消耗糖液多，反之，消耗糖液少。时间

7、短，消耗糖液多，反之，消耗糖液少。整个滴定工作需控制在整个滴定工作需控制在3min内完成。内完成。反应液碱度：反应液碱度：热源强度：热源强度：沸腾时间：沸腾时间：滴定速度：滴定速度：糖类的测定2、高锰酸钾滴定法、高锰酸钾滴定法2）原理）原理1）试剂）试剂碱性酒石酸铜甲液：硫酸铜碱性酒石酸铜甲液：硫酸铜碱性酒石酸铜乙液：酒石酸钾钠，碱性酒石酸铜乙液：酒石酸钾钠，NaOH 将一定量的样液与一定量过量的碱性酒石酸铜将一定量的样液与一定量过量的碱性酒石酸铜溶液反应，在加热条件下，还原糖将二价铜盐还原溶液反应，在加热条件下，还原糖将二价铜盐还原为氧化亚铜。为氧化亚铜。（反应式同直接滴定法）反应式同直接滴

8、定法）糖类的测定 经过滤，得氧化亚铜沉淀。经过滤，得氧化亚铜沉淀。加入过量的酸性硫酸铁将加入过量的酸性硫酸铁将其氧化溶解，而硫酸铁被定量地还原成亚铁盐。其氧化溶解，而硫酸铁被定量地还原成亚铁盐。Cu2O+Fe2(SO4)3+H2SO4= 2CuSO4+2FeSO4+H2O用高锰酸钾标准溶液滴定所生成的亚铁盐。用高锰酸钾标准溶液滴定所生成的亚铁盐。10FeSO4+2KMnO4+8H2SO4=5Fe2(SO4)3+K2SO4+2MnSO4+8H2O 根据高锰酸钾标准溶液消耗量可计算出氧化亚根据高锰酸钾标准溶液消耗量可计算出氧化亚铜的量，再从检索表中查出氧化亚铜量相当的还原铜的量，再从检索表中查出氧

9、化亚铜量相当的还原糖的量，即可计算出样品中还原糖含量。糖的量，即可计算出样品中还原糖含量。糖类的测定3）适用范围及特点）适用范围及特点各类食品。有色样液也不受限制。各类食品。有色样液也不受限制。准确性和重现性都优于直接滴定法，准确性和重现性都优于直接滴定法，操作复杂费时，需专用的检索表。操作复杂费时，需专用的检索表。国家标准分析方法。国家标准分析方法。适用范围：适用范围：特点：特点：4） 测定方法测定方法（1）样品处理）样品处理样品样品 提取提取 250mL容量瓶容量瓶 澄清剂澄清剂水定容水定容 摇匀、静置、干燥滤纸过滤摇匀、静置、干燥滤纸过滤 弃去初滤液弃去初滤液糖类的测定（2）测定步骤）测

10、定步骤同时吸取同时吸取50 mL水按上法做空白实验水按上法做空白实验50mL样液样液 烧杯烧杯 甲、乙液各甲、乙液各25mL盖上表面皿，加热（盖上表面皿，加热（4min内沸腾，准确沸腾内沸腾，准确沸腾2min） 25mL 硫酸铁、硫酸铁、25mL水水 搅拌使沉淀溶解搅拌使沉淀溶解 KMnO4标准溶液滴定至微红色标准溶液滴定至微红色 抽滤抽滤滤器放回烧杯滤器放回烧杯热水洗热水洗糖类的测定5） 计算计算1000100008.14325)(0VVcx式中：式中：c-KMnO4标准溶液浓度，标准溶液浓度，mol/L V-样液消耗样液消耗KMnO4标准溶液的体积，标准溶液的体积，mL V0-试剂空白消耗试剂空白消耗KMnO4标准溶液的体积，标准溶液的体积，mL 14308-Cu2O的摩尔质量，的摩尔质量，g/ mol x-与滴定所消耗与滴定所消耗KMnO4溶液相当的