HPLC仪器操作规程

1、HPLC仪器操作规程一.每个月该做的事情. 专门对应.点开图标D-2000 Elite Administration.lnk,出现下图 ,点击图标后,出现下图 在 应用程序明里面填上你想建立的文件夹名,如:图里现在建立的文件夹名即为200907,再在驱动器里指定你想存储的位置,如,图里指定位置为D 盘下.建立好后,选点创建.然后关闭就可以了.二. 我们每天该做的事情.首先我们打开电脑,然后开仪器(开启的顺序是organizerL2130L2200L2300L2400,然后选点 图标D-2000 Elite.lnk 出现下图 点图标,出现连机状态,直接点 ,等画面出现为下图,表明连机成功. 确认

2、即可. 点图标,将泵开启.然后点图标,下图所示: 点,再点,出现提示框 这时,将排液阀打开(即在L2130上的一个白色的凸起旋钮,逆时针旋转90度,然后选择 是, 泵开始排液,A B C D 四个管路一个个选点过去,每个管路排液2-5分钟.目前我们4个管路的液体分别为,A 是甲醇,B 是水,C 是乙腈,D 是流动相(未加入乙腈. 排液结束后,点 关闭净化,将排液阀顺时针方向旋转关紧. 点,出现下图 在里面,我们把流速设定为1ML/MIN,C为10%,D为90%.完成后,点.关闭窗口.再点图标,出现 这个图标的意思是,我要选择我今天做的样品的结果存储在哪个文件夹下面,比如,现在是3月份, 我选择

3、2009.03这个文件夹做为我的存储地方.双击即可.再点,出现下图 目前里面有两个样品表,但每天的样品量是不同的,这就需要我们根据每天新的样品情况来编辑样品表.随便打开一个样品表,比如20090329-2,出现下图 上面就是一个我们比较标准的一个进样表,前面3行,即 无论是什么情况,都应该是有的,不允许改变.下面,就根据我们样品实际情况一一加入.注意:我们最后有个冲洗柱子的方法,不是每个进样表都需要有的,柱冲洗的方法需要被用到的时候是,我们每天这批样品检测结束后,没有样品需要被检测了,实验结束时候,才需要把这个柱冲洗的方法加入.设定结束后,我们将,起个我们当天的名字保存,如我们今天是2009年

4、3月30日,我们就可以起20090330,如果我们当天不止一批样品,我们可以起成20090330-1,等下批可以起成20090330-2,等等.关闭窗口.将我们实验须检测的样品,一一放入我们编辑的对应位置. 点,出现图,我们就可以选择一个我们刚刚编辑好的样品表打开了,比如,200090329-2是我们刚刚编辑好的,我就选择打开出现下图 等白色基线走成一条直线,我们就可以进样了,这个时间基本需要45分钟-1小时左右,有时候可能半小时就行,线走直了后,我们还需要确认一个很重要的工作是,看看仪器的压力,就在上图显示,我们要确认我们的压力在6.5-8MPa 之间,如果超过或者少于都是不对的,要停下来检

5、查,看看是不是流动相用完了,瓶子放错了,管路堵了等等.或电话联系工程师咨询.如果一切没问题,点,就可以开始检测了. 如果我们的检测需要过夜,那我们在点后,检测面会出现,点开,出现图 选取 使用静止,确认就可以.这样这个样品表被执行完后,可以自我关机.需要注意的是,这个自我关机,仅是关闭了泵,关闭了灯,关了柱温箱的加热,仪器的电源是并没有被关闭的.。我们重新起动仪器的时候要,点图标,将泵开启.然后点图标,下图所示 : 重新设定流速和流动相比例, 前面做过介绍,不做重复了.点图标,进入下画面 把柱温箱温度设定在40度. 点图标,出现下图 选取,就可以了。这样仪器就被重新正确开启,我们接下去就按步骤

6、正常操作就可以了。检测结束后,我们就需要对化验的结果进行数据处理了.点图标,出现下图 比如0006是我们刚刚完成好检测的,选好后,按确定,打开 首先呢,要对标准样品进行处理,求出回归曲线. 打开标准样(2PPM,出现图 选点图标,然后再用,这两个图标中的一个,把屏幕上的竖直白线移动到三聚氰胺的峰上,如图点图标 ,然后再点 ,再点开图标 ,出现图 , 按照三聚氰胺的保留时间的多少,来设定 时间的跨度,原则是保留时间前后的 1.2-1.8 分 钟.比如按图显示,保留时间是 22.95 分钟,那我们就将 时间设定在 21.3 分钟,将 形进行实际调整的.设定好后按 ,关闭窗口,出现图 设定在 24.

7、2 分钟,这是根据图 按住 Ctrl 键,用鼠标选点 191 ,192, 193. 按 ,然后,点 ,就可以看到标品的标准曲线了. 然后,将所有检测样品,都用 Ctrl 键+鼠标选点住,按 点图标 ,就可以完全看结果了.等关闭窗口后,会出现 ,再按下 ,进去后, 选点是就可以. 分析结束后关机,是把软件先关了,仪器关机顺序是 L2400L2300L2200L2130Organizer.最后 关闭电脑. 三. 注意事项 1 所有进 HPLC 仪器里面的液体,都必须经过超声 20 分钟,如果液体在仪器上摆放超过 4 天还未 用完,必须重新超声,过滤。纯水直接倒掉,这个要求必须严格执行. 2洗针液的比例是 甲醇:水 1