高中生物专题5DNA和蛋白质技术第13课时DNA的粗提取与鉴定同步备课教学案人教版

1、- 1 - / 16第 13 课时 DNA 勺粗提取与鉴定学习导航1.通过阅读教材 P54“基础知识”，掌握提取并检验DNA 的原理和方法。2.结合教材 P55“实验设计”，掌握 DNA 粗提取的选材、析出及鉴定。3.结合教材 P56“操作提示”，掌握实验过程中需注意的问题。4.分析教材 P57“结果分析与评价”中的问题，掌握DNA 粗提取与鉴定的技术。重难点击1.理解 DNA 的理化特性及根据其理化特性而提取和鉴定的原理。2.初步掌握 DNA的粗提取和鉴定方法。一、DNA 勺理化特性、提取及鉴定的原理基础梳理夯实基砒突破要点夯实基砒突破要点1.提取 DNA 的方法和原理(1)提取生物大分子的

2、基本思路：选用一定的物理或化学方法分离具有不同物理或化学性质的 生物大分子。提取 DNA 的方法：利用 DNA 与 RNA 蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面的差异，提取 DNA 去除其他成分。2.DNA 的溶解性(1)DNA 在 NaCI 溶液中的溶解度(2)在酒精溶液中的溶解性：DNA 不溶于酒精溶液， 但是细胞中的某些蛋白质溶于酒精溶液。3.DNA 对酶、高温和洗涤剂的耐受性(1)对酶的耐受性：蛋白酶能水解蛋白质，但对DNA没有影响。(2)对温度的耐受性：大多数蛋白质不能忍受 6080C的高温，而 DNA 在 80C以上才会变性。(3)对洗涤剂的耐受性：洗涤剂能够瓦解细胞膜，但对DNA

3、没有影响。4.DNA 的鉴定在沸水浴的条件下,DNA 与二苯胺反应呈现蓝色。溶液中溶解度最低。- 2 - / 161.DNA 溶解性原理(1)结合 DNA 在 NaCI 溶液中的溶解度曲线，分析DNA 在不同浓度 NaCI 溶液中的溶解度有何特问题探究- 3 - / 16点。项目溶解规律2 moI/L NaCI 溶液0.14 moI/L NaCI 溶液DNADNA 评齋哩y溶解析出DD.I4蛋白质蛋白质在 NaCI 溶液浓度从 2 moI/L降低过程中，溶解度逐渐增大部分发生盐析沉淀溶解1低于 0.14 mol/L 时：DNA 的溶解度随 NaCI 溶液物质的量浓度增加而逐渐降低。2高于 0.

4、14 mol/L 时：DNA 的溶解度随 NaCI 溶液物质的量浓度增加而逐渐升高。(2) 结合图表分析，如何通过控制NaCI 溶液的浓度使 DNA 在盐溶液中溶解或析出，以达到去除杂质的目的？答案 提取获得的 DNA 滤液中含有蛋白质、多糖和RNA 等多种杂质，用 2 mol/L 的 NaCI 溶液溶解 DNA 然后过滤获得滤液，能够去除该条件下不能溶解的杂质；调节NaCI 溶液的物质的量浓度为 0.14 moI/L，使 DNA 析出，然后过滤获得析出物，能够去除该条件下仍然能够溶解 的杂质。(3) DNA 不溶于酒精溶液，而细胞中的某些蛋白质则溶于酒精溶液，此特点对于提取DNA 有什么作用

5、？答案 可以将 DNA 和蛋白质进一步分离。2.DNA 的耐受性原理DNA 变性和蛋白质变性的实质相同吗？请说明原因。答案不同。原因如下：(1) 蛋白质变性是指蛋白质在某些物理或化学因素作用下其特定的空间构象被改变，从而导致 其理化性质的改变以致生物学活性丧失。(2) DNA 变性是指 DNA 分子在高温等条件下，由稳定的双螺旋结构解聚为无规则线性结构的现象，变性时维持双螺旋稳定性的氢键断裂，当温度等条件恢复正常后，DNA 的结构尚能恢复。归纳总结DNA 粗提取的三个原理1 利用 DNA 随 NaCI 溶液浓度的不同而溶解度不同的原理可粗提取DNA2 利用 DNA 不溶于酒精，而细胞内的其他许

6、多物质可溶于酒精的原理可进一步提纯DNA3 利用 DNA 对酶和高温的耐受性可以去除蛋白质杂质。拓展应用卽析題型提塔方法1.在“ DNA 的粗提取与鉴定”实验中，实验原理是利用DNA 在不同浓度的 NaCI 溶液中的溶解度不同来提取的，DNA 的溶解度与图示曲线的对应点相符合的是()- 4 - / 16A.a 点浓度最适合析出 DNAB.b 点浓度最适合析出 DNAC.c 点浓度最适合析出 DNAD.d 点浓度最适合析出 DNA答案 B解析用高浓度的 NaCl 溶液溶解 DNA 能除去在高盐溶液中不能溶解的杂质，用低浓度的 NaCl溶液使 DNA 析出，能除去溶解在低盐溶液中的杂质，因此，反复

7、溶解、析出DNA 能除去与DNA 溶解度不同的杂质。从题图可以看出，DNA 在浓度为 0.14 moL/L 的 NaCl 溶液中的溶解度最小，因此最适合析出 DNA 随着 NaCl 溶液浓度的增大或减小，溶解度均逐渐增大。2.下列有关“ DNA 的粗提取与鉴定”实验的叙述，正确的是（）A. 利用 DNA 能溶于酒精溶液，而蛋白质不溶于酒精溶液，可将DNA 与蛋白质分离B. 利用高温能使 DNA 变性，却对蛋白质没有任何影响的特性，可将DNA 与蛋白质分离C. 利用 DNA 在 0.14 mol/L NaCl 溶液中溶解度最大的特点，可将DNA 与蛋白质分离D. 在 DNA 滤液中加入嫩肉粉，通

8、过木瓜蛋白酶的作用，可将DNA 与蛋白质分离答案 D解析 DNA 不溶于酒精，而蛋白质等杂质溶于酒精，A 项不正确。蛋白质比 DNA 对温度的耐受性更差，因此更容易变性，B 项不正确。DNA 在 0.14 mol/L NaCl 溶液中溶解度最小，而蛋白质在该浓度的 NaCl 溶液中溶解度较大，因此可将DNA 与蛋白质分离，C 项不正确。嫩肉粉中的木瓜蛋白酶只能催化蛋白质水解，而对DNA 没有影响，因此，可将 DNA 与蛋白质分离，D 项正确。【一题多变 1在 DNA 的粗提取过程中，使用嫩肉粉分离DNA 与蛋白质的原理是什么？答案 利用了酶的专一性，嫩肉粉中的木瓜蛋白酶只能催化蛋白质水解，不能

9、催化DNA 水解。二、“ DNA 粗提取与鉴定”实验设计与操作提示棊棊础梳理础梳理夯实基础突破妾点夯实基础突破妾点（一）实验设计1. 实验材料的选取选用 DNA 含量相对较高的生物组织。2. 破碎细胞，获取含 DNA 的滤液（1）动物细胞的破碎选材及方法：选用动物细胞作为实验材料时，由于其无细胞壁，週此可直接采用吸水涨破 的方法。过程：以鸡血为例- 5 - / 16在鸡血细胞液中加入一定量的蒸馏水，同时用玻璃棒搅拌，细胞会吸水涨破，然后用纱布过 滤，过滤后收集滤液即可。(2)植物细胞的破碎方法：需要先用洗涤剂溶解细胞膜。过程：以提取洋葱的 DNA 为例。在切碎的洋葱中加入一定的洗涤剂和食盐，进

10、行充分地搅拌和研磨，过滤后收集研磨液。3.去除滤液中的杂质万案一利用 DNA 在不同浓度的 NaCI 溶液中溶解度不同，通过控制NaCI 溶液的浓度去除杂质万案二直接在滤液中加入嫩肉粉，反应1015 min，嫩肉粉中的木瓜蛋白酶能够分解蛋白质万案二将滤液放在 6075C的恒温水浴箱中保温 1015 min，注意严格控制温度范围4. DNA 的析出利用 DNA 不溶于冷却的酒精溶液这一原理,可从 DNA 溶液中析出比较纯净的 DNA 此时 DNA 勺状态为白色丝状物。5. DNA 的鉴定将白色丝状物溶解于 5 mL 物质的量浓度为 2 mol/L 的 NaCI 溶液中，再加入 4 mL 的二苯胺

11、试 剂，沸水浴加热 5 min，冷却后观察溶液的颜色，同时设计不含DNA 勺 NaCI 溶液作为对照。(二)操作提示1. 以血液为实验材料时，每 100 mL 血液中需要加入 3 g 柠檬酸钠，防止血液凝固。2. 加入洗涤剂后，动作要轻缓、柔和，否则容易产生大量的泡沫，不利于后续步骤的操作。加入酒精和用玻璃棒搅拌时，动作要轻缓，以免加剧DNA 分子的断裂，导致 DNA 分子不能形成絮状沉淀。3. 鉴定 DNA 用的二苯胺试剂要现配现用，否则会影响鉴定的效果。教材中所给的生物材料中，选取哺乳动物的红细胞与鸡血提取DNA 哪个效果更好？答案 用鸡的血液。因为鸡血细胞核DNA 含量丰富，材料易得，而

12、哺乳动物的红细胞无细胞核，不含 DNA2.实验操作分析(1)实验中应采用什么方法使鸡血细胞破裂？- 6 - / 16答案 在鸡血细胞液中加入蒸馏水，使鸡血细胞吸水涨破。(2) 提取菜花的 DNA 时，加入洗涤剂和食盐的作用分别是什么？答案 洗涤剂能瓦解细胞膜，有利于DNA 的释放；食盐的主要成分是NaCI，有利于 DNA 的溶解。(3) 实验过程要充分地搅拌和研磨，如果研磨不充分，会对实验结果产生怎样的影响？答案 研磨不充分会使细胞核内的DNA 释放不完全，提取的 DNA 量变少，导致看不到丝状沉淀物，用二苯胺鉴定不显示蓝色。(4) 实验过程中应如何使用玻璃棒搅拌？为什么？答案搅拌时玻璃棒不能

13、直插烧杯底部，并且搅拌要轻缓，以便获得较完整的DNA 分子。规律方法 DNA 粗提取与鉴定实验中四个关键操作的目的(1)两次加入蒸馏水次数目的第一次使鸡血细胞吸水涨破第二次稀释 NaCI 溶液，使 DNA 逐渐析出(2)三次加 NaCI 溶液次数目的第一次溶解 DNA 析出蛋白质等杂质第二次使 DNA 再溶解，为了获得含杂质较少的DNA第三次溶解 DNA 以便 DNA 与二苯胺反应(3)三次过滤次数目的第一次单层除去细胞破碎后的细胞膜、核膜、糖类、蛋白质等，获得含核物质的滤液第二次两层除去不溶于 2 mol/L NaCI 溶液中的蛋白质等杂质，获得含DNA 的滤液第三次多层除去溶于 0.14

14、mol/L NaCI溶液中的杂质，获得含DNA 的丝状物(4)六次搅拌次数实验操作目的第一次搅拌加蒸馏水的鸡血细胞液加速细胞破裂第二次搅拌含 DNA 的高浓度盐溶液加速 DNA 的溶解第三次搅拌加蒸馏水的 NaCI 溶液析出 DNA第四次搅拌含 DNA 的高浓度盐溶液加速 DNA 的溶解- 7 - / 16第五次搅拌含 DNA 的酒精溶液提取含杂质较少的 DNA第六次搅拌含 DNA 的白色丝状物的盐溶液加速 DNA 的溶解拓展应用哥析題型提炼方法3.在 DNA 的粗提取实验过程中，对 DNA 提取量影响较小的是()A. 使鸡血细胞在蒸馏水中充分破裂，释放出DNA 等核物质B. 搅拌时要用玻璃棒

15、沿一个方向轻缓搅动C. 在析出 DNA 黏稠物时，要缓缓加入蒸馏水，直至黏稠物不再增多D. 要用冷酒精沉淀 DNA 甚至可将混合液再放入冰箱中冷却 答案 B解析 A 项的做法是为了充分释放出核中的DNA 分子，使进入滤液中的 DNA 尽量的多；C 项是让 DNA 充分沉淀，保证 DNA 的量；D 项的道理同 C 项；而 B 项的操作并不能使 DNA 增多或减少。4.下图所示为 DNA 的粗提取与鉴定实验的实验步骤，请据图回答下列问题：(1)请写出的实验步骤名称;3;4。(2)A、B 两支试管中，试管中含有DNA 试管起对照作用。答案(1)提取细胞核物质析出 DNA 的黏稠物 用冷却的酒精析出

16、DNADNA 的鉴定(2)B A解析 在解答本题时，一定要先将图中的每一步操作都看清楚，然后根据图中的有关文字提示判断每一步实验操作的名称。【一题多变】(1)步骤是如何操作的？为什么能将DNA 析出？答案 在滤液中加入 2 mol/L 的 NaCI 溶液，然后再加入蒸馏水，直到黏稠物不再增加为止。I- 8 - / 16能将 DNA 析出的原因是，DNA 在 NaCI 溶液中的溶解度随着 NaCI 溶液浓度的改变而改变，在0.14 mol/L 时溶解度最低。(2)步骤的实验原理是什么？答案步骤是根据 DNA 和某些蛋白质在酒精中的溶解度不同而进行操作的，DNA 不溶于酒精,但某些蛋白质能溶于酒精

17、，据此可以溶解一些杂质，析出含杂质较少的DNA匾匾课堂小结课堂小结在水祐下,尬二苯检混合呈现蔽也反应( )A.蒸馏水 B.NaCI 溶液 C.NaOH 溶液 D.盐酸答案 B解析蛋白酶是利用酶的专一性将DNA 和蛋白质分离，而 NaCI 溶液则是利用 DNA 和蛋白质在该溶液中的溶解度不同将其分离。2.下表有关“ DNA 粗提取和鉴定”的相关操作中所选取的试剂，不正确的是()选项相关操作选取的试剂A破碎鸡血细胞蒸馏水B溶解核内 DNA2 moI/L NaCI 溶液C提取杂质较少的 DNA冷却的 95%的酒精DDNA 的鉴定双缩脲试剂答案 D解析 鉴定 DNA 的试剂是二苯胺，用双缩脲试剂鉴定蛋

18、白质。1.蛋白酶能将蛋白质水解而使染色质中的DNA 分离出来。下列药品可达到上述同一目的的是&杠讥I ffrl-沿育仪IDNA的蟻化 - 的涪解川斷出DNA当堂检测- 9 - / 163.在 DNA 的粗提取和鉴定实验中，有两次DNA 的沉淀析出，其依据的原理是()DNA 在 NaCI 溶液物质的量浓度为 0.14 mol/L 时溶解度最低DNA 在冷却的体积分数为 95%- 10 - / 16的酒精溶液中能沉淀析出A.两次都是B.两次都是C.第一次是，第二次是 D.第一次是，第二次是答案 C解析 第一次沉淀析出是利用浓NaCI 溶液溶解核内 DNA 之后，加蒸馏水稀释 NaCI 溶液

19、至物质的量浓度为 0.14 moI/L，使 DNA 溶解度降低而析出； 第二次沉淀析出是用冷酒精溶液使DNA凝集并溶解非 DNA 物质，达到提纯 DNA 的目的。4.下列关于“ DNA的粗提取与鉴定”实验的叙述中，正确的是（）A.用鸡血作为材料，原因是鸡血红细胞有细胞核，其他动物红细胞没有细胞核B. 用不同浓度的 NaCI 溶液进行 DNA 粗提取，原因是 DNA 在其中溶解度不同C. 用酒精进行提纯，原因是 DNA 溶于酒精，蛋白质不溶于酒精D. 用二苯胺试剂进行鉴定，原因是DNA 溶液中加入二苯胺试剂即呈蓝色答案 B解析 只有哺乳动物的成熟红细胞没有细胞核，A 选项错误；DNA 不溶于酒精

20、，蛋白质溶于酒精，所以可用冷却的酒精来对 DNA 进行提纯，C 选项错误；DNA 溶液中加入二苯胺试剂后要在 水浴加热的情况下才能出现蓝色，D 选项错误。5.下图为“ DNA 的粗提取与鉴定”实验的相关操作。（1）图中实验材料 A 可以是等，研磨前加入的B 应该是。通过上述所示步骤得到滤液C 后，再向滤液中加入 2 mol/L 的 NaCI 溶液的目的是，再过滤得到滤液 D,向滤液 D 中加入蒸馏水的目的是在“ DNA 的粗提取与鉴定”实验中，将含有一定杂质的DNA 丝状物分别放入体积为 2 mL 的4 种溶液中，经搅拌后过滤，获得如表所示的4 种滤液，含 DNA 最少的是滤液。1研磨液搅拌后

21、过滤滤液 E22 mol/L NaCI 溶液搅拌后过滤滤液 F30.14 mol/L NaCI 溶液搅拌后过滤滤液 G4冷却的 95%勺酒精溶液搅拌后过滤滤液 H- 11 - / 16（4）DNA 鉴定的原理是答案（1）洋葱（菜花等）洗涤剂和食盐（2）使 DNA 溶解 使 DNA 溶解度下降而沉淀） 析出- 12 - / 16（3）H （4）在沸水浴条件下，DNA 与二苯胺反应呈现蓝色课时作业学考达标1. 向含有 DNA 的浓度较高的 NaCI 溶液中加入蒸馏水会使（）A.DNA 的溶解度下降 B.DNA 的溶解度上升C.蛋白质的溶解度下降 D.DNA 和蛋白质充分溶解答案 A2. 在提取 D

22、NA 的过程中，最好使用塑料试管和烧杯，目的是（）A.不易破碎 B.减少 DNA 的损失C.增加 DNA 的含量 D.容易刷洗答案 B3.下列图示中能正确反映DNA 溶解度与 NaCI 溶液浓度之间关系的是（）据的原理是（）A.在物质的量浓度为 0.14 mol/L 的 NaCI 溶液中B.DNA 遇二苯胺在沸水浴的条件下会染成蓝色C.DNA 不溶于酒精而细胞中的一些物质易溶于酒精D.质量浓度为 0.1 g/mL 的柠檬酸钠溶液具有抗凝血作用答案 C解析 在质量浓度为 0.14 mol/L 的 NaCI 溶液中DNA 的溶解度最小。4.在采用鸡血为材料对 DNA 进行粗提取的实验中,若需进一步

23、提取含杂质较少的DNA 可以依DNA 的溶解度最小- 13 - / 16答案 C解析 DNA 粗提取的原理有：DNA 在物质的量浓度为 0.14 mol/L 的 NaCI 溶液中溶解度最小和DNA 不溶于体积分数为 95%勺冷酒精。进一步提取含杂质较少的DNA 时用后者。B 项用于 DNA-14- / 16鉴定，D 项中柠檬酸钠可防止血液凝固。5.下列与析出DNA 黏稠物有关的叙述，不正确的是（）A. 操作时缓缓滴加蒸馏水，降低DNA 的溶解度B. 在操作时，用玻璃棒轻缓搅拌，以保证DNA 分子的完整性C. 加蒸馏水可同时降低 DNA 和蛋白质的溶解度，两者均可析出D.当丝状黏稠物不再增加时，

24、此时 NaCI 溶液的浓度相当于 0.14mol/L答案 C解析向含有 DNA 的溶液中加入蒸馏水后，NaCI 溶液的浓度会变小，当NaCI 溶液的浓度为D.制备鸡血细胞的细胞核物质提取液T溶解DNA 并析出T提取较纯净的 DNTDNA 的鉴定答案 A解析 B 项漏掉了 DNA 溶解前要过滤；C 项提取细胞核中 DNA 叙述欠妥，应是提取核物质，并 且应放在溶解 DNA 之前；D 项叙述明显有误。高考提能7.在“DNA 的粗提取和鉴定”实验中，甲、乙、丙、丁四个小组除下表中所列处理方法不同外,其他操作步骤均正确，但实验结果却不同。下列有关叙述不正确的是（）组别实验材料提取核物质时加入的溶液去除

25、杂质时加入的溶液DNA 鉴定时加入的试剂甲鸡血蒸馏水95%勺酒精（25C）二苯胺乙菜花蒸馏水95%勺酒精（冷却）双缩脲试剂丙猪血蒸馏水95%勺酒精（冷却）二苯胺丁鸡血蒸馏水95%勺酒精（冷却）二苯胺0.14 mol/L 时，DNA 的溶解度最小而析出。6.DNA 的粗提取与鉴定实验的正确操作步骤是（A. 制备鸡血细胞液T提取细胞核物质T溶解核内的 解T提取较纯净的 DNT鉴定 DNAB.制备鸡血细胞液T提取细胞核物质T溶解并析出 鉴定 DNAC.制备鸡血细胞液T溶解 DNT提取细胞核中的 的鉴定）DNA析出并滤取 DNA 黏稠物TDNA 的再溶DNA DNA 的再溶解T提取较纯净的DNTDNT

26、DNA 的再溶解T提取较纯净的 DNTDNA- 15 - / 16A. 实验材料选择错误的组别是丙B. 沸水浴后试管中溶液颜色变蓝的组别是甲、丁C. 甲组实验现象差的原因是25C的酒精对 DNA 的凝集效果差D. 乙组实验不成功仅因为在鉴定时加入了双缩脲试剂答案 D解析 菜花细胞有细胞壁，加入蒸馏水不破裂，须加入一定的洗涤剂和食盐并经过研磨。鉴定时要用二苯胺试剂。8.甲、乙两图为“ DNA 的粗提取与鉴定”实验中涉及的两个操作装置图。下列相关叙述正确的是（）甲乙A. 图甲的烧杯和图乙的试管中所用溶剂都为NaCI 溶液，但两者浓度不同B. 图乙试管经稍稍加热后即可观察到一支试管中的溶液明显变蓝，

27、另一支试管中的溶液不变 蓝C. 图甲操作需用玻璃棒迅速搅拌以使DNA 析出，并缠绕在玻璃棒上D. 图乙操作中所用的二苯胺试剂需现配现用以达到较好的鉴定效果答案 D解析 图甲烧杯中为冷却的体积分数为95%勺酒精溶液，图乙试管中为NaCI 溶液，A 错误；图乙试管需要在沸水浴中加热5 min , B 错误；图甲用玻璃棒沿一个方向轻轻搅拌，卷起丝状物，C 错误；图乙操作中所用的二苯胺试剂最好现配现用，否则二苯胺会变成浅蓝色，D 正确。9. 在 DNA 的粗提取与鉴定实验中有三次过滤（1）过滤用蒸馏水稀释过的鸡血细胞液（2）过滤含黏稠物的物质的量浓度为0.14 mol/L 的 NaCI 溶液过滤溶解有

28、 DNA 的物质的量浓度为 2 mol/L 的 NaCl 溶液以上三次过滤分别为了获得（）A. 含核物质的滤液、纱布上的黏稠物、含DNA 的滤液B. 含核物质的滤液、滤液中DNA 黏稠物、含 DNA 滤液C. 含核物质的滤液、滤液中DNA 黏稠物、纱布上的 DNAD. 含较纯 DNA 滤液、纱布上黏稠物、含DNA 滤液答案 A解析过滤用蒸馏水稀释过的鸡血细胞液应取滤液（其内含 DNA）;过滤含黏稠物的物质的量浓 度为 0.14mol/L 的 NaCI 溶液应取黏稠物（因其内含析出的 DNA）; DNA 易溶于物质的量浓度为- 16 - / 162 mol/L 的 NaCl 溶液，故过滤该溶液时

29、应取滤液（其内溶有 DNA。10. 在 DNA 粗提取与鉴定实验中，将第三次过滤获得的纱布上含有DNA 的黏稠物（含有较多杂质）分别处理如下：- 17 - / 16序号操作过程放入 2 mol/L 的 NaCl 溶液，搅拌后过滤再加入 0.14 mol/L 的 NaCl 溶液，搅拌后过滤再加入冷却的、冋体积的体积分数为95%勺酒精溶液，用玻璃棒沿一个方向搅拌，卷起丝状物上述操作过程正确的是（）A.B.C.D.答案 C解析第三次过滤后在纱布上的是粗提取的DNA 此 DNA 中还含有杂质，因此将其溶于 2 mol/L的 NaCl 溶液中，再进行过滤，以除去不溶于2 mol/L 的 NaCl 溶液的

30、杂质。然后向滤液中加入同体积的、冷却的体积分数为95%勺酒精溶液即可析出 DNA 然后挑出 DNA 进行鉴定。11.实验中对 DNA 进行鉴定时，做如下操作：试管序号、AB1力口 2 mol/L 的 NaCl 溶液 5 mL力口 2 mol/L 的 NaCl 溶液 5 mL2不加加入提取的 DNA 丝状物并搅拌3加 4 m苯胺，混匀加 4 m苯胺，混匀4沸水浴 5 分钟沸水浴 5 分钟实验现象实验结论A B（1）根据上图，完成表格空白处的实验内容。（2）对于 B 试管，完成 1、2、3 的操作后溶液颜色如何?在沸水浴中加热的目的是，同时说明DNA 对高温有较强的。（4）A 试管在实验中的作用是

31、。（5）B 试管中溶液颜色的变化程度主要与有关。答案（1）溶液不变蓝色溶液逐渐变蓝色DNA 在沸水浴的情况下遇二苯胺会被染成蓝色- 18 - / 16（2）溶液颜色基本不变（3）加快颜色反应速度耐受性（4）对照（5）加入试管中的 DNA（丝 状物）的多少解析 A、B 两试管形成对照，B 试管中含 DNA 丝状物，A 试管中不含，起对照作用，其他条件 均完全相同。本实验强调反应条件是沸水浴加热 5 min，这样可加快颜色反应的速度，观察对 比两试管的颜色时要等到冷却以后。12.下图为“ DNA 的粗提取与鉴定”实验装置：AH（1）该实验依据的原理是。A. DNA 在 NaCI 溶液中的溶解度随

32、NaCI 溶液浓度的不同而不同B. 利用 DNA 不溶于酒精的性质，可除去细胞中溶于酒精的物质而得到较纯的DNAC. DNA 是大分子有机物，不溶于水而溶于某些有机溶剂D. 在沸水浴中 DNA 遇二苯胺会出现蓝色反应在图 A 所示的实验步骤中加蒸馏水的目的是。通过图B 所示的步骤取得滤液，再在溶液中加入 2 mol/L 的 NaCI 溶液的目的是；图 C 所示实验步骤中加蒸馏水的目的是。鉴定 DNA 的方法是，向溶有 DNA 丝状物的试管中加入试剂，混合均匀后，将试管置于沸水中加热 5 min，冷却后可观察到溶液呈；也可取少许DNA 丝状物置于载玻片上，滴一滴溶液，片刻后用水冲洗，可见丝状物被

33、染成。答案（1）ABD （2）使血细胞破裂使滤液中的 DNA 溶于浓盐溶液降低盐溶液的浓度，使 DNA析出（3）二苯胺蓝色甲基绿绿色解析（1）本实验依据的原理是AB、D 三个方面。（2）图 A、B C 所示为本实验的三个关键 步骤。图 A通过添加蒸馏水，血细胞与蒸馏水相混合而使血细胞处于极度低渗的环境之中，细胞因大量吸水而导致最终破裂，并释放出胞内物。 图 B 通过纱布过滤使血细胞释放出的DNA滤入收集的滤液中（将大量胶状物滤出），再在滤液中加入 2 mol/L 的 NaCI 溶液使 DNA 溶解。 图 C 在DNA 浓盐溶液中加入蒸馏水（大量），可使溶液的 NaCI 浓度降至较低，由于 DN

34、A 在较低 浓度的 NaCI溶液中溶解度很低（在 0.14 moI/L 的 NaCI 溶液中溶解度最低） ， 浓度再变小则 DNA 溶解度将增大， 使 DNA低渗析出，经过滤等手段可以收集到DNA13.某生物兴趣小组开展 DNA 粗提取的相关探究活动，具体步骤如下：材料处理：称取新鲜的花菜、辣椒和蒜黄各 2 份，每份 10 g。剪碎后分成两组，一组置于 20C、 另一组置于20C条件下保存 24 h。DNA 粗提取：- 19 - / 16第一步：将上述材料分别放入研钵中，各加入15 mL 研磨液，充分研磨。用两层纱布过滤，取滤液备用。第二步：先向 6 只小烧杯中分别注入 10 mL 滤液，再加

35、入 20 mL 体积分数为 95%的冷酒精溶液, 然后用玻璃棒缓缓地向一个方向搅拌，使絮状物缠绕在玻璃棒上。第三步：取 6 支试管，分别加入等量的物质的量浓度为2 mol/L NaCI 溶液溶解上述絮状物。DNA 检测：在上述试管中各加入4 mL 二苯胺试剂，混合均匀后，置于沸水浴中加热5 min，待试管冷却后比较溶液的颜色深浅，结果如下表：材料保存温度花菜辣椒蒜黄20C+ + + +20C+ + + + + + +注：“ + ”越多表示蓝色越深。分析上述实验过程，回答下列问题:(1)该探究性实验课题名称是(2) 第二步中“缓缓地”搅拌，这是为了减少。(3) 根据实验结果，得出结论并分析。结论 1:与 20C相比，相同实验材料在20C条件下保存，DNA 的提取量较多。结论 2:针对结论 1,请提出合理的解释：。(4)氯仿密度大于水，能使蛋白质变性沉淀，与水和DNA 均不相溶，且对 DNA 影响极小。为了进一步提高粗提取时 DNA 的纯度，依据氯仿的特性，在第三步的基础上继续操作的步骤是：然后用体积分数为 95%的冷酒精溶液使 DNA 析出。答案(1)探究不同实验材料和不同保存温度对DNA 提取量的影响(2)DNA 断裂(3)等质量的 3 种实