中药及其制剂的含量测定方法

1、中药及其制剂的含量测定方法徐隽佳药学0202 3021901009中药及其制剂制剂产生的疗效不是 某单一成分作用的结果，也不是某些成 分简单作用的加和，是各成分之间的协 同作用。用一种成份衡量其质量优劣有 失偏颇，某单一成分的含量高低并不一 定与其临床作用呈简单的线性关系。目的确定某种成分的含量高低是否符合规定以判定药物的优 劣,确保临床用药的安全有效有重要的作用.特点只能对某一个或几个成分进行测定受到对照品的限制测定药味选择君药毒性药贵重药测 定成分 的选定原则：测定成分应尽量与中医'理论一致，与药理作用和主治-有效成分（首选）I功能一致 丿毒性成分：保证中药制剂的安全性有效成分不确

2、定的：可测定指标性成分测定浸出物测定总成分：总黄酮，总生物碱，总有机酸.样品的预处理粉碎提取分离净化常用定量方法-化学分析法：重量法、容量法分光光度法：可见-紫外分光光度法薄层扫描法(TLCS):薄层吸收扫描法, 薄层荧光扫描法高效液相色谱法气相色谱法荧光分析法应用：某些含量较高的成分、矿物药制剂中的 无机成分优点：仪器简单，结果准确缺点：灵敏度低、专属性不高重量法分类挥发法：有挥发性或能定量转化为挥发性物 质的组分的含量萃取法：被测组分在互不相容的两相中溶解 度不同（例）沉淀法：将被测组分定量转化为难溶化合物昆明山海棠片的含量测定取本品60片一除去糖衣+青密称定一研细一精密称取适量 （约相当

3、于25片）一置200ml锥形瓶中一加适量硅藻土 一混匀一加乙醇70ml 加热回流40minf放冷滤过一 滤渣再加乙醇加热回流滤过一合并滤液一置水浴上蒸干一 残渣加盐酸溶液（1100） 30ml置水浴上搅拌使溶解一放 冷一滤过一残渣再用盐酸同法提取3次一合并滤液于分 液漏斗中一加氨试液使溶液成碱性一用乙醯振摇提取4次 一合并乙醯液一用水振摇洗涤2次一乙醯液用滤纸滤过 一滤液置已称定重量的蒸发皿中-> 低温水浴蒸去乙醯一 残渣加少量乙醇蒸干一置100°C干燥至恒重一>称定重量（不得少于1.0mg/片）f吸收系数法丿契压專:鸚富 r单波长光度法对照品比较才、 日I标准曲线V、|

4、双波长法 | A在030.7间（计算分光光度法系数倍率法I为宜 一丿样品经连续回流左金丸中小漿碱含量的测提取，柱色谱 净化后，用吸 收系数法测定 照分光光度法，在345nm处测定吸收度按盐酸小槃碱(C20H17NO4 HCI)的吸收度(E1%1cm)为728计算丿AID含量(mg/ml)二 W*100*L*100%(E1%1cm)r以薄层色谱法为基础发展起来的薄层色谱组分原位分析方法 及薄层色谱的记录方法用一定波长的光照射在薄层板上，对薄层色谱中吸收紫外光 或可见光的斑点，或经激发后能发射出荧光的斑点进行扫描. 即固定波长，斑点移动，测定A-1或F-1曲线将扫描得到的图谱及积分数据用于药品的鉴

5、别、杂质检查或 含量测定双波长薄层扫描仪常选择斑点中化合物 的吸收峰波长作为测 定波长选择化合物吸收的基线部 分（即化合物无吸收的部 分）作为参比波长用一定波长的光束对薄层板进 行扫描，记录其吸光度随展开 距离的变化，即得薄层扫描曲 线丿吸光度/KX1 校正前的标准曲线2 校正后的标准曲线根据散射参数SX的值将AKX曲 线校正后即可用于定量/ 2Z吸光度与物质浓度服从'Kubelka-Munk 方程k为单位薄层厚度的吸光系数KX称吸收参数（相当于斑点单在一定范围内， 峰面积与斑点中 的物质的量（或 点样量）成直线SX的值于薄层板固定相的性质、粒度和分布有关7薄层荧光扫描法适用范围本身具

6、有荧光或经过适当处理后可产生荧光的物质的测定光源用氤灯或汞灯，采用直线式扫描.专属性强，灵敏度高灵敏度比吸收法高13个数量级，最低可测到1050pg样品，但适用范围较窄. 对于能产生荧光的物质，可直接采用荧光扫描法测定对于有紫外吸收，而不能产生荧光的物质，需采用荧光淬灭法测定.定量依据当溶液浓度很稀时(ECL<0.05),荧光物质的荧光强度F与激发 光光强10及物质浓度C之间存在如下关系F=2.3K'l0ECL=KC荧光效率有关为常数，E为吸收系数，厶为薄层厚度.F- 卑点荧光强度的积分值(色谱峰峰面积),组分浓度.即在点样量很小时，斑点中组分的浓度与其荧光强度、成线性关系耳Ku

7、belka一Munk理论不适用于薄层荧光扫描，无需进行曲 线桩直.TLCS定量分析方法外标法内标法定量依据C样 =A样C对照 A对照C - 人样 c。样_ AX U对照A对照外标法（外标一点法，外标两点法）最常用 简便，但点样必须准确薄层板间差异较大，应采用随行标准法（即供试品与标准溶液或对照液交叉点在同一板上）-外标一点法 工作曲线通过原点，只需点一种浓度的标准品溶液， 与供试液同板展开，对比，测定组分含量.C组分的重量或浓度；A组分的峰面积比直线的斜率或比例常数外标二点法工作曲线不通过原点时，需用外标二点法定 量至少需点二种不同浓度的标准溶液（或一 种浓度两种点样量），才能决定一直线.A计

8、算 C=F1A+F2F2纵坐标的截距，其值由仪器自动算出.内标法（内标一点法，内标二点法）''X定义：选一个纯物质作为内标物，并准确称取一定量内标物加至供试液及标准液中，计算供试品溶液中某组分含量的定量方法.丿优点：定量准确度与点样量无关.缺点：内标物不易寻找,操作麻烦较少应用個标物要>与被测组分及样品中其他组分完全分离， 纯度高丿高效液相色谱法中药制剂多采用反相高效液相色谱法反相色谱法特点 流动相极性大于固定相极性的分配色谱法。常用固定相 非极性固定相：十八烷基硅烷键合硅胶（ODS或6）辛基键合硅胶（Cg）等 常用流动相 甲醇水或乙月青水。出峰先后 极性强的组分因K值较小先流出色谱柱，极 性小的组分后流出。流动相中有机溶剂的比例增加，极 性减小，洗脱力增强反相离子对色谱分离的样品离子与离子对试剂的反离把离子对试剂加入极性流动相中,壬生成不荷电的中性离子对,从而增加了样品离子在非极性固定相中的溶解度，使分离系数增加，改善分离效 色谱柱 Ci*或qB流动相 含310mmol/L离子对试剂的反相流动相被分离组分及离 子对试剂的疏水性越大，所需有机溶剂比例越高.离子对选择 碱类分离 常用烷基磺酸（盐）,如己烷磺酸钠、庚烷磺酸钠、十二烷基磺酸钠