乙型肝炎病毒抗体诊断胶体金法SOP准则操作程序1

1、精心整理乙型肝炎病毒抗体诊断(胶体金法 SOP测定标准操作程序编写者：宿金涛日期：2012年3月1日一. 原理：乙型肝炎病毒表面抗原、表面抗体、e抗原、e抗体、核心抗体检测试剂盒(胶体金 法)采用胶体金免疫层析分析技术、将五个诊断意义相关的试剂通过一个包装组合在一起，同时进行乙型肝炎病毒五项标志物的检测，在不影响各自性能的情况下，便于客户的储存和使用。HBsAg佥测试剂采用双抗体夹心法，试剂含有被事先固定于膜上测试区(T)的抗体。测试时，标本滴入试剂加样处，标本与预包被的胶体金颗粒结合的抗HBsAg抗体反应。然后，混合物随之在毛细效应下向上层析。如是阳性，胶体金抗体在层析过程中先于标本中的 H

2、BsAg吉合, 随后家何物会被固定在膜上的抗 HBsAg抗体结合，在测试区内(T)会出现一条紫红色带。这条带 是HBsAg抗体-HBsAg-HBsAg抗体金标粒子的复合物在膜上结合形成的。 如是阴性，则测试区内(T) 将没有紫红色带。无论HBsAg是否存在于标本中，一条紫红色带都会出现在指控内(C)。质控区内(C)所显现的紫红色条带是判定是否有足够标本，层析过程是否正常的标准，同时也作为试剂 的内控标准。HBsAt检测试剂双抗原夹心法，试剂含有被事先固定于膜上测试区(T)的乙肝表面抗体。测试时，标本滴入试剂加样处，标本与预包被的胶体金颗粒结合的HBsAg反应。然后，混合物随之在毛细效应下向上层

3、析。如是阳性，胶体金抗体在层析过程中先于标本中的 HBsAg吉合，随后 结合物会被固定在膜上的HBsAg抗体结合，在测试区内(T)会出现一条紫红色条带。这条带是 HBsAg-HBsAb-HBsA金标粒子的复合物在膜上结合形成的。如果阴性，贝U测试区内(T)将没有紫红色条带。无论HBsAg是否存在于标本中，一条紫红色条带都会出现在质控区内(C)。质控区内(C)所显现的紫红色条带是判定是否有足够标本，层析过程是否正常的标准，同时也作为试剂的内控标准。HBeAg佥测试剂采用双抗体夹心法，试剂含有被事先固定于膜上测试区(T)的乙肝e抗体。测试时，标本滴入试剂加样处，标本与预包被的胶体金颗粒结合的HBe

4、Ag抗体反应。然后，混合物随之在毛细效应下向上层析。如是阳性，胶体金抗体在层析过程中先于标本中的HBeAg吉合,随后结合物会被固定在膜上的 HBeAg抗体结合，在测试区内(T)会出现一条紫红色条带。这条带是 HBeAg抗体-HBeAg-HBeAg抗体金标粒子的复合物在膜上结合形成的。如果阴性，贝U测试区内(T)将没有紫红色条带。无论HBeAg抗体是否存在于标本中，一条紫红色条带都会出现在质控区内(C)。质控区内(C)所显现的紫红色条带是判定是否有足够标本，层析过程是否正常的标准，同时也作为 试剂的内控标准。HBeAb,HBcAb佥测试剂才有竞争抑制法，试剂含有被事先固定于膜上测试区(T)的抗体

5、。测试时，血清或血浆标本滴入试剂加样处，随之标本在毛细效应下向上层析。如标本中含有相 应的抗体，则同膜上测试区(T)的抗体竞争与预包被在金标粒子的相应抗体反应。如果标本中没有 相应抗体，预包被在金标粒子的复合物的相应抗原则同膜上测试区(T)的抗体全部结合。阳性标本，测试区内(T)将没有紫红色条带，阴性标本，测试区内(T)将会出现明显的紫红色条带。无论相应的 抗体是否存在于标本中，一条紫红色条带都会出现在质控区内(C)。质控区内(C)所显现的紫红色条 带是判定是否有足够标本，层析过程是否正常的标准，同时也作为试剂的内控标准。精心整理二. 试剂：英科新创乙肝五项检测卡（胶体金法）。规格为25人份/

6、盒。产品标准编号：YZB/国 0378-2009。三. 操作步骤：1、将待测标本从储存条件下取出，平衡至室温（18-25 C）并编号。2、 将胶体金测试卡从包装盒中取出，打开铝箔包装袋，平置于台面上。编号（与样品相对应）；3、用塑料滴管加2-3滴样本血清或血浆，加入试剂板的五个加样孔。4、 等待紫红色条带的出现，测试结果应在测定开始后20分钟开始读取。30分钟后判断无效。四. 参考范围：正常人为阴性。五. 结果判定HBsAgHBsAbHBeAg阳性：两条紫红色条带出现。一条位于测试区（T）内，另一条位于质控区（C）。阳性结果表 明：标本中含有待测物质。阴性：仅质控区（C）出现一条紫红色条带，在

7、测试区（T）内无紫红色条带出现。阴性结果表 明：标本中检测不出待测物质无效：质控区（C）未出现紫红色条带，表明不正确的操作过程或试剂已变质损坏。在此情况 下，应再次仔细阅读说明书，并用新的试剂重新测试。如果问题仍然存在，应立即停止使用此批号 产品，并与当地供应商联系。注意：测试区（T）内的紫红色条带可显现出颜色深浅的现象。但是，在规定的观察时间内， 不论该色带颜色深浅，即使只有非常弱的色带也应判定为阳性结果。HBeAbHBcAb阳性：仅质控区（C）出现一条紫红色条带，在测试区（T）内无紫红色条带出现。阳性结果表 明：标本中含有待测物质。阴性：两条紫红色条带出现，一条位于测试区（T）内，另一条位

8、于质控区（C）。阴性结果表 明：标本中检测不出待测物质。无效：质控区（C）未出现紫红色条带，表明不正确的操作过程或试剂已变质损坏。在此情况下， 应再次仔细阅读说明书，并用新的试剂重新测试。如果问题仍然存在，应立即停止使用此批号产品,精心整理并与当地供应商联系序MB若KBeKbMBcAb岀時gt+一+急性HBV感染趋向恢复；慢1圭哄.菇带者；传染性弱.即幡薔的乙軒小三阳.510%2+一+*急性或慢性乙型肝炎感粢.提示HBV复制,转染强.即俗踰的3一一过去和现在去翩过HBV10*4一一一既往巒染未能测出抗-黔；恢臭期廳塢已消，抗-殴肖未出现；无症伏鹿£幅菇带着，51015一（1）既往感染

9、过HB¥ ；急性HBV感染恢复期；（3）少数标本仍有传染性.HBW廳崔已过；抗展也出现前的窗口期6+1注射过乙肝苗有免遽；既往感舉：假阳性.7=+-資性HDV感后療复.0.89+一+角性KBV®染；慢性晦洪带者；传染性翼lOISK+一一4既往感巣，仍有免疫力.砸¥感染,恢复期.計15»六.临床意义:乙肝肝炎病毒引起的感染带来了严重的公共卫生问题。母婴传播、性传播和血液传播是最主要的传 播途径。尽早的发现感染可以有效的减少疾病的传播。乙肝五项检测卡（胶体金法）定性检测人血清、血浆中的乙肝表面抗原、表面抗体、e抗体、核心抗体、用于乙型肝炎病毒感染的辅助诊断。

10、七. 病人及样本要求：1、本品适用于血清、血浆样本，血浆样本对临床常用抗凝剂（ EDTA肝素、枸椽酸钠）无要求； 样本的采集须遵循常规的医疗样本的采集方法并遵守相关的医学规定。2、采集静脉血样本必须在无菌条件下操作，并避免样品溶血。3、 如果血清和血浆样品收集后7天内检测，样品须放在2-8 C保存；大于7天须20C以下冷 冻保存。4、溶血、粘稠及高脂标本不适于本试剂。含特珠物质（如强氧化剂）的标本可能会导致检测结 果不稳定，在检测前须清除。八. 注意事项：1、 检测必须符合实验室管理规范和物物安全守则的规定，操作时必须戴手套、穿工作服、严格 健全和执行消毒隔离制度。2、 乙型肝炎病毒表面抗原、表面抗体、e抗原、e抗体、核心抗体检测试剂盒（胶体金法）适 用于测试血清或血浆标本，其他标本或溶液进行检测可能出现异常结果。3、由于在技术上和操作上可能出现的失误， 同时也由于标本中存在干扰物质， 检测结果有可能 错误。4、请保证适量的标本用于检测，过多或过少的标本量都有可能导致结果的偏差。精心整理5、测试结果应在测定开始后20分钟读取，30分钟后判定无效。6、本产品为目视读取结果，为保证判定结果的正确，请勿在光线昏暗处对结果进行判读。7、试剂可在室温下保