维生素C治疗缺铁性贫血大鼠后血液细胞的改变

1、维生素C治疗缺铁性贫血大鼠后血液细胞的改变王丽 周诣 肖夏懿 陆叶凤 孙顺辉 洪灏指导老师：邹奎昌、李靖（上海中医药大学01级七年制临床医学方向，上海201203）摘要本实验以喂饲低铁饲料和尾部放血的方法造成大鼠缺铁性贫血，观察不同浓度维生素C对缺铁性贫血大鼠的治疗效果。实验结果表明维生素C对于缺铁性贫血的治疗是有可行性的。关键词缺铁性贫血；维生素C；血红蛋白浓度；总铁结合力缺铁性贫血（IDA）是一种最为常见的全球性营养疾病，多年来人们一直对其病因与防治措施进行研究和探讨。人体内的铁主要来源于食物，大多数食物含铁量还是比较丰富的。缺铁性贫血的关键在于新摄入的铁不能很好的吸收与利用。根据病因不同

2、，可分为营养不良、慢性失血和月经过多三类。治疗方面口服铁剂一直被作为治疗缺铁性贫血的主要药物，但铁制剂本身及较大剂量和长疗程补铁都存在着一些缺点。另一方面，维生素C是维持生命的必需营养素之一，它参与体内氧化还原过程，增加毛细血管致密性，减低其渗透性及脆性，增加机体对感染的抵抗力。主要用于坏血病、各种急慢性感染性疾病及紫癜等的防治，且有资料表明维生素C有改善缺铁性贫血的作用，因此我们联想到维生素C是否有可能对缺铁性贫血有治疗作用。我们的实验观察了不同浓度维生素C对缺铁性贫血大鼠的治疗作用，以探讨使用维生素C治疗缺铁性贫血的机理。1 材料与方法11 动物及分组2426天断奶雄性SD健康大鼠25只，

3、体重46.0±4.6g, Hb130g/L，随机分成五组。其中A组为正常对照组，B组为模型对照组（即缺铁组），C组是用0.1g/L维生素C的治疗组，D组是用0.5g/L维生素C的治疗组，E组是用1.0g/L维生素C的治疗组。12 动物饲料低铁饲料的配方：全脂奶粉50，食用油8，蔗糖5，面粉32，氯化钠5。 按每天每只老鼠喂饲50克饲料的量配制。13 观察指标体重、血红蛋白浓度、总铁结合力、血涂片、骨髓涂片14 实验方法B、C、D、E组分别喂饲统一配制的缺铁饲料，每日一次定时喂饲，每日每只50克。给予去离子水饮用。为缩短造模时间，这四组大鼠每天从尾部放血0.5ml。正常组喂饲正常饲料及

4、饮用水。造模五天后用断尾方法采集B、C、D、E组大鼠的血液，用氰化高铁法检测血红蛋白浓度以及铬天青S法检测总铁结合力。并从当天开始给予B、C、D组规定浓度的维生素C灌胃治疗，每日每只1ml。低铁饲料仍然按照造模时的方法喂饲，但省略尾部放血这一步骤。连续灌胃给予维生素C治疗4天后，从大鼠腹股沟处静脉取血3ml，测定血红蛋白浓度、总铁结合力以及制作血涂片、骨髓涂片。实验期间每六天测量一次各组大鼠的体重。2 实验结果21 造模前后及治疗前后大鼠体重表1 造模前后大鼠体重组别 动物数 造模前大鼠体重（kg）造模后大鼠体重（kg）P值A组 50.053±0.003 0.057±0.0

5、03P0.05B组 5 0.050±0.000 0.061±0.004P0.005C组 5 0.052±0.003 0.056±0.004P0.10D组 5 0.054±0.002 0.061±0.002P0.002E组 5 0.050±0.000 0.057±0.003P0.01表2 治疗前后大鼠体重组别动物数 治疗前大鼠体重（kg）治疗后大鼠体重（kg）P值A组 5 0.057±0.003 0.078±0.005P0.001B组 5 0.061±0.004 0.062±0

6、.004P0.10C组 5 0.056±0.004 0.060±0.004P0.10D组 5 0.061±0.002 0.063±0.003P0.20E组 5 0.057±0.003 0.058±0.003P0.5022 治疗前后大鼠总铁结合力组别动物数治疗前大鼠总铁结合力（mol/L）治疗后大鼠总铁结合力（mol/L）A组 5198.35±29.81 198.35±29.81B组 5 957.37±645.86 P0.20 447.75±165.66 P0.001C组 5 977.21

7、7;328.40 P0.10 246.49±20.71 P0.001D组 5 608.38±198.88 P0.20 266.41±15.02 P0.001E组 5 311.19±28.70 P0.20 307.38±215.21 P0.001注：A组为正常组，故没有治疗，总铁结合力只测了一次，以此为参考标准。23 治疗前后大鼠血红蛋白浓度组别动物数治疗前大鼠血红蛋白（g/L）治疗后大鼠血红蛋白（g/L）A组 5108.4±21.6 108.4±21.6B组 5117.4±36.0 P0.5099.6±2

8、8.5 P0.50C组 5105.3±11.5 P0.5092.6±48.1 P0.50D组 5150.4±14.1 P0.0587.0±32.2 P0.20E组 5110.4±33.0 P0.50141.2±41.5 P0.20注：A组为正常组，故没有治疗，血红蛋白浓度只测了一次，以此为参考标准。24 各组大鼠血涂片血涂片经过瑞氏染色，在显微镜下可见B、C、D、E组大鼠的血红蛋白较红细胞减少，红细胞和血小板数目基本正常。成熟红细胞大小不等，普遍体积较小，以小细胞为主，中心淡染区扩大，呈小细胞低色素性贫血。25 各组大鼠骨髓涂片 骨髓

9、涂片经过染色，在显微镜下可见B、C、D、E组大鼠因造血功能正常，所以骨髓增生活跃，红细胞系统增生旺盛，中、晚幼红比例增高，但因缺铁使血红蛋白合成减少，所以有核红细胞胞体较小，胞浆量少，染色偏蓝，边缘不整齐，胞核固缩。而粒细胞系统和巨核细胞系统基本无异常。3 讨论31 造模分析根据机体缺铁变化过程，可将缺铁性贫血分为三期，即隐性缺铁期、缺铁性红细胞生成期和缺铁性贫血期。各期铁的代谢都有相应的改变，可作为诊断依据。具体如下：1隐性缺铁期：此期机体只有储存铁的减少或缺乏，而血红蛋白浓度不下降，红细胞各项指数无变化。临床上虽无贫血表现，但已影响机体健康。因此，必须及早做出诊断。在各项有价值的检验中我们

10、选择了总铁结合力的检测。具体分析如下：从肠粘膜吸收的铁进入血液后，与运铁蛋白结合被运输到骨髓等储存器官中。正常情况下，仅有1/3的运铁蛋白与铁结合，被结合的铁就是血清铁。2/3的运铁蛋白处于未饱和状态，它仍具有与铁结合的能力。抽取静脉血，加上一定量的铁可使运铁蛋白成为饱和状态，所加的铁量被称为未饱和铁结合力。血清铁与未饱和铁结合力之和称为血清总铁结合力（即血浆运铁蛋白最大的载铁能力）。当机体储存铁开始下降时，总铁结合力即升高。该项指标是缺铁性贫血早期的诊断标准之一。在我们的试验中，由治疗前各组大鼠总铁结合力的数据可以看出，B、C、D、E组大鼠较A组大鼠的总铁结合力高，以A组为参考标准，B、C、

11、D、E组即表现为缺铁，可以诊断为隐性缺铁期，造模基本成功。2缺铁性红细胞生成期：机体缺铁后动员储存铁用以合成血红蛋白，维持红细胞数量及血红蛋白的正常范围。如缺铁性贫血病因持续存在，当体内储存铁耗尽后，将进一步出现血清铁降低，红细胞内游离原卟啉增加。由于造模时间短，我们忽略了这一阶段的指标检测，直接跳到第三期。3缺铁性贫血期：如机体缺铁的病因未控制，体内储存铁再趋下降，临床上势必出现贫血表现，化验检查显示小细胞低色素性贫血，在各项检验指标中我们选择了血红蛋白浓度的检测。具体分析如下：血红蛋白浓度是诊断贫血的主要标准，血红蛋白浓度值低于正常即可诊断为贫血。在我们的实验中，由于造模时间较短，所以在治

12、疗前除C组以外，B、D、E组大鼠的血红蛋白浓度值都不低于正常组，说明在短时间内还没有到达缺铁性贫血期。然而经过治疗后，除E组外，B、C、D组大鼠的血红蛋白浓度值都反而低于正常组，说明此时到达了缺铁性贫血期，分析原因可能是因为造模时间不够，直到治疗后才表现出贫血状态。32 维生素C的疗效分析我们摄入的膳食铁中，80是非血红素铁，它必须转化成铁蛋白才能被十二指肠及近段空肠吸收。铁是红细胞成熟阶段中血红蛋白形成所必需的物质，维生素C虽然不参与血红蛋白的形成过程，但它是一种很强的还原剂，可使血浆运铁蛋白中的铁处于低价态（形成二价铁离子），当胃中pH值低时，维生素C渗入铁蛋白，与三价铁离子形成配合物，以

13、血浆铁的形式储存，随食物到达小肠保持其可溶性以促进非血红素铁的吸收，进而供骨髓造血使用，从而改善缺铁性贫血。国内外许多实验及流行病学资料都证明维生素C与缺铁性贫血有密切的关系。由我们的实验可以看出，经维生素C治疗后大鼠的总铁结合力都较治疗前有所降低，这也证实了我们这个试验最初的一部分设想，说明维生素C对于治疗铁缺乏还是有一定效果的。但是治疗后的各组大鼠血红蛋白浓度没有升高反而下降，我们推测原因可能是造模时间过于短暂，此时各治疗组大鼠刚到达缺铁性贫血期，因此维生素C的治疗作用没有体现。在血象和骨髓象方面，治疗组的大鼠都较正常组大鼠表现出贫血状态，这也进一步证实了此时才达到缺铁性贫血期，因此维生素

14、C的治疗作用也没有得到体现。33 关于实验的一些问题分析1关于大鼠的体重问题：造模前后B、C、D、E组大鼠的体重增长与正常组差异不明显，然而治疗后B、C、D、E组大鼠的体重增长明显较正常组大鼠缓慢，这也从一个方面反应了实验造模时间短暂的问题，直到治疗后各组大鼠才表现出贫血状态。2关于维生素C治疗浓度的问题：在这个实验中，我们的三个治疗组分别用了不同浓度的维生素C治疗缺铁性贫血的大鼠，但由于造模时间短暂，导致维生素C的治疗作用并没有体现在血红蛋白浓度值上。虽然总铁结合力的值体现了维生素C的治疗作用，但我们发现和维生素C浓度的相关性没有得到充分体现，还有待以后的实验进一步验证。3关于对后继实验的设想：由于经费、时间及经验的不足，样本量过小，缺乏定量数据等原因，本实验结果可能尚无说服力