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文档简介

1、专题检测A卷(时间:45分钟总分值:100分)考查知识点及角度难度及题号根底中档稍难基因工程的根本操作1、2、3、4、6、7、91315基因工程的应用5、8、10蛋白质工程1112、14一、选择题(12小题,每题560分)1 .以下关于基因工程的表达,错误的选项是().A.目的基因和受体细胞均可来自动、植物或微生物B.限制性核酸内切酶和 DNA连接酶是两类常用的工具酶C.人胰岛素原基因在大肠杆菌中表达的胰岛素原无生物活性D.载体上的抗性基因有利于筛选含重组DNA的细胞和促进目的基因的表达解析人胰岛素原基因中有内含子存在,因此在大肠杆菌中表达后无生物活性.载体上的抗性基因有处于筛选含重组DNA的

2、细胞,但由于它和目的基因是相互独立的,并不能促进目的基因的表达.答案 D2 .以下关于限制酶的说法正确的选项是().A.限制酶广泛存在于各种生物中,微生物中很少分布8. 一种限制酶只能识别一种特定的核甘酸序列C.不同的限制酶切割 DNA后都会形成黏性末端D.限制酶的作用部位是特定核甘酸形成的氢键解析此题主要考查限制酶的有关知识.限制酶主要是从原核生物中别离纯化出来的,并不是广泛存在于各种生物中,一种限制酶能识别双链DNA的某种特定核甘酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个脱氧核甘酸之间的磷酸二酯键断开,DNA分子经限制酶切割形成的末端有两种形式 黏性末端和平末端.答案 B3 .工程菌是指().

3、A.用物理或化学方法,诱发菌类自身某些基因得到高效表达的菌类细胞株系B.用遗传工程的方法,使同种不同株系的菌类杂交,得到的新细胞株系C.用基因工程的方法,使外源基因得到高效率表达的菌类细胞株系D.从自然界中选取能迅速增殖的菌类解析 工程菌是指用基因工程的方法,使外源基因得到高效率表达的菌类细胞株系.本题A项是诱变育种的例子;B项是杂交育种的例子;D项是最传统的育种方式 一一选择 育种.故正确答案为 Co答案 C4 . 一个双链DNA经一限制酶切割一次形成的黏性末端个数为().A. 1B. 2C. 3D. 4解析 限制性核酸内切酶只能识别双链DNA上特定的核甘酸序列,并在识别的特定部位切割,将每

4、条链切割点处脱氧核糖与磷酸之间的磷酸二酯键断开.因而切割一次后会形成一个切口,每条链上形成一个黏性末端,共切出两个黏性末端.答案 B5 .下表有关基因表达的选项中,不可能的是().基因表达的细胞表达产物A细菌抗虫蛋白基因抗虫棉叶肉细胞细菌抗虫蛋白B人酪氨酸酶基因正常人皮肤细胞人酪氨酸酶C动物胰岛素基因大肠杆菌工程菌细胞动物胰岛素D兔血红蛋白基因兔成熟红细胞兔血红蛋白解析 抗虫棉叶肉细胞中存在细菌抗虫蛋白基因, 细菌抗虫蛋白基因能够表达产生细菌抗虫蛋白;正常人皮肤细胞中含有人酪氨酸酶基因,人酪氨酸酶基因能够表达产生人酪 氨酸酶;大肠杆菌工程菌细胞存在动物胰岛素基因,动物胰岛素基因能够表达产生动物

5、 胰岛素;兔成熟红细胞中无细胞核及各种细胞器,所以无兔血红蛋白基因不能表达产生 兔血红蛋白.答案 D6 .在基因工程中,为将目的基因导入受体细胞常采用土壤农杆菌转化法,在土壤农杆菌中常含有一个Ti质粒.某科研小组欲将某抗虫基因导入某植物,以下分析错误的选项是().A. Ti质粒含有对宿主细胞生存具有决定性作用的基因,是基因工程中重要的载体B.用Ca2+处理细菌是重组 Ti质粒导入土壤农杆菌中的重要方法C.重组Ti质粒的土壤农杆菌成功感染植物细胞,可通过植物组织培养技术将该细胞培 养成具有抗虫性状的植物D.假设能够在植物细胞中检测到抗虫基因,那么说明将重组质粒成功地导入到了受体细胞解析 Ti质粒

6、是基因工程中重要的载体,不含有对宿主细胞生存具有决定性作用的基因;用Ca2+处理细菌可增加细胞壁的通透性,是重组 Ti质粒导入土壤农杆菌中的重要方法;转基因成功的植物细胞,可通过植物组织培养技术,获得转基因植物.在植物细 胞中检测到抗虫目的基因,说明目的基因已成功导入,但不能证实其能表达.答案 A7 .基因工程技术也称 DNA重组技术,其实施必须具备的4个必要条件是().A.工具酶、目的基因、载体、受体细胞B.重组DNA、RNA聚合酶、限制性内切酶、DNA连接酶C.模板DNA、信使RNA、质粒、受体细胞D.目的基因、限制性内切酶、载体、受体细胞解析 基因工程是根据人们的意愿,把一种生物的个别基

7、因目的基因复制出来,加以修饰改造,然后放到另一种生物的细胞 受体细胞里,定向地改造生物的遗传性状.基 因操作的工具酶是限制性内切酶和 DNA连接酶,基因进入受体细胞的运输工具是载体. 答案 A8 .干扰素是治疗癌症的重要药物,它必须从血液中提取,每升人血中只能提取0.5 pg所如下图生产干扰素.CflOOaCJ/ 干扰素基因带干扰索基困的质粒干扰素除母菌以价格昂贵.美国加利福尼亚的某生物制品公司用如下方法从上述方式中可以看出该公司生产干扰素运用的方法是.A .个体间的杂交B.基因工程C.蛋白质工程D.器官移植解析 从图中可以看出整个过程为将人的淋巴细胞中限制干扰素合成的基因与质粒结合后导入酵母

8、菌,并从酵母菌产物中提取干扰素,这项技术为基因工程.答案 B9 .在基因工程中,假设受体细胞是细菌,那么用来处理该细菌以增强细胞壁通透性的化学试剂 是.A.氯化钠B,聚乙二醇C.氯化钙D,二苯胺解析 用CaCl2处理细菌,可增强细胞壁的通透性,以使其成为感受态细胞,从而便于接受外源DNA分子.答案 C10 .以下图表示基因工程中获取水稻某目的基因的不同方法.以下相关表达中正确的选项是方法昌mRNA方法3u “心楂fl帆懵,ATP等I V M U I I I I F (2ITITTiJMllll 1111 i iiji LA.这三种方法都用到酶,都是在体外进行B.碱基对的排列顺序均相同C.图示a

9、、b、c三种方法均属人工合成法D.方法a不遵循中央法那么解析 由图示可知a为逆转录法获得目的基因,用到逆转录酶;b为直接从生物体获得目的基因,用到限制酶;c为用PCR技术扩增获取目的基因,用到 Taq酶,且三种方法 均在生物体外进行,故 A正确;图示中 为逆转录法,为直接别离目的基因, 为人 工合成法.答案 A11 .上海医学遗传研究所成功培育出第一头携带人白蛋白的转基因牛,他们还研究出一种可大大提升基因表达水平的新方法,使转基因动物乳汁中的药物蛋白含量提升30多倍.标志着我国转基因研究向产业化的目标又迈进了一大步.以下有关的表达中,正确的选项是().A.所谓“提升基因表达水平是指设法使牛的乳

10、腺细胞中含有更多的人白蛋白基因B.可将白蛋白基因导入牛的卵细胞中,通过组织培养形成转基因牛C.人们只在转基因牛的乳汁中才能获取人白蛋白,是由于只在转基因牛的乳腺细胞中 才有人白蛋白基因D.运用基因工程技术让牛合成人白蛋白,该技术将导致定向变异解析 “提升基因表达水平是指设法使牛的乳腺细胞中的人白蛋白基因合成出更多的蛋白质.动物细胞的全能性变窄,用牛的卵细胞不能培养形成转基因牛.转基因牛的 细胞中都含有人白蛋白基因,人们只在转基因牛的乳汁中才能获取人白蛋白,是由于人 白蛋白基因只在转基因牛的乳腺细胞中表达.答案 D12.基因工程与蛋白质工程的区别是().A.基因工程需对基因进行分子水平操作,蛋白

11、质工程不对基因进行操作B.基因工程合成自然界已存在的蛋白质,蛋白质工程可以合成自然界不存在的蛋白质C.基因工程是分子水平操作,蛋白质工程是细胞水平(或性状水平)的操作D.基因工程完全不同于蛋白质工程解析 蛋白质工程是在基因工程根底上延伸出来的第二代基因工程,是从分子水平对蛋白质进行改造设计,然后直接对相应的基因进行修饰加工甚至人工进行基因合成,从而 对现有蛋白质进行改造,或制造一种新的蛋白质,以满足人类的生产和生活的需要.而基因工程只是将外源基因导入另一生物体内,并使之表达,表达人类所需的性状,或者 获取所需的产品,因此,基因工程在原那么上只能生产自然界中已存在的蛋白质.答案 B、非选择题(共

12、3小题,共40分)卜图为农杆菌转化法13. (12分)农杆菌转化法是将目的基因导入植物细胞采用最多的方法. 示意图,请据图答复以下问题.0T-DS 出现也就性状代地悚农杆菌转化法示意图(1)Ti质粒多存在于细菌中,它是能自我复制的 .(2)获取外源基因(目的基因)需要限制酶的参与,而目的基因在重组过程中需要 酶的参与,并依据碱基 原那么进行重组.(3)Ti质粒原存在于 ;中,其上的T-DNA具有可转移到受体细胞并整合到受体细胞的 上的特点,因此携带外源基因的DNA片段必须插入到 部位.(4)农杆菌转化法适于将目的基因导入 和裸子植物,而不易于感染大多数(5)假设将相关的目的基因导入动物细胞或微

13、生物细胞那么常采用 和.解析 将目的基因导入受体细胞的方法多种多样,应根据受体细胞的类型和目的基因的特点分别采用相应的方法.农杆菌转化法适于将目的基因导入植物细胞,而显微注射技术和Ca2+处理法感受态细胞法分别适于将目的基因导入动物细胞和微生物细胞.答案 (1)小型环状 DNA分子 (2)DNA连接 互补配对(3)农杆菌细胞质染色体DNA T-DNA片段内部4双子叶植物单子叶植物5显微注射技术Ca2+处理法感受态细胞法14. 12分2021年11月,武汉大学利用细菌将人的血清白蛋白基因导入水稻体内,借助水 稻合成了人的血清白蛋白,这种蛋白质和人体自然产生的这类物质是完全一致的,这一 成果轰动了

14、生物界.结合图示答复转基因水稻培育过程的相关问题.C AATTG 一和限制酶 Mun I和限制酶 EcoR I的识别序列及切割位点分别是一gaattc一.为保证重组质粒表达载体的准确构建,应该怎样操作?2过程常用的细菌是 .3经历的生理过程主要有 和 两个阶段.培育出转基因水稻完整个体所依据的生物学原理是 .4基因工程的最后步骤是目的基因的检测与鉴定,在此步骤可对培育的植株进行分子水平的检测,可检测的物质有 、.解析 1目的基因的两侧是限制酶 EcoRI的识别序列,因此需用限制酶EcoR I切割含目的基因的DNA分子;但是假设用限制酶EcoRI切割质粒,会破坏标记基因,因此,需用限制酶Mun

15、I切割质粒;用这两种酶切出的黏性末端相同,因此可用 DNA连接酶 连接目的基因和质粒.2将表达载体导入植物细胞最常用的方法是农杆菌转化法,因此常用的细菌是农杆菌.3过程是组织培养获得完整植株的过程,因此主要的过程是脱分化获得愈伤组织,经再分化获得胚状体. 转基因植物的培育表达了植物细胞的全能性.4目的基因的检测与鉴定在分子水平上来看,应进行目的基因、转录出的mRNA和翻译出的蛋白质三种物质的检测 一.答案 1用限制酶 Mun I切割质粒 用限制酶EcoR I切割含目的基因的 DNA分子 用DNA连接酶连接目的基因和质粒2农杆菌 3脱分化 再分化 植物细胞的全能性4人血清白蛋白基因 人血清白蛋白

16、基因转录出的 mRNA 人血清白蛋白15. 16分2021潍坊SARS是由一种RNA病毒感染所引起的疾病.SARS病毒外表的S蛋白是主要的病毒抗原,在SARS病人康复后的血清中有抗S蛋白的特异性抗体.某研究小组为了研制预防SARS病毒的疫苗,开展了前期研究工作.其简要的操作流程如下:器一酶用国而酶携带5战 因的承制 表达载体A携带S基- 因的审组 法认载体H导人大 版打由1实验步骤所代表的反响过程是 2步骤构建重组表达载体A和重组表达载体B必须使用3如果省略步骤而将大量扩增的S基因直接导入大肠杆菌, 一般情况下,不能得到表达的S蛋白,其原因是 S基因在大肠杆菌中不能 ,也不能 .4为了检验步骤

17、所表达的S蛋白是否与病毒 S蛋白有相同的免疫反响特征,可用与 进行抗原一抗体特异性反响实验,从而得出结论.步骤和的结果相比,原核细胞表达的S蛋白与真核细胞表达的S蛋白的氨基酸序列选填“相同或“不同,根本原因是解析 此题考查基因工程的工具及操作步骤和学生识图水平.1图中RNA-DNA表示通过逆转录方式获得目的基因.2基因表达载体构建时,需要利用限制酶对载体和目的基因进行剪切,形成黏性末端,然后用 DNA连接酶将目的基因和载体连接起来,形 成重组载体.3目的基因导入受体细胞后,需要借助于载体在受体细胞中进行复制而扩增目的基因,从而获得大量的表达产物,而直接导入那么容易被受体细胞中的DNA水解酶所水

18、解,导致得不到表达产物.4S蛋白为SARS病毒外表主要的病毒抗原,因此用抗原一抗体特异性反响实验可检测其是否具有同样的抗原性.5步骤和相比,基因相同,只是导入的受体细胞的种类不同,由于真核生物和原核生物共用一套密码子,所 以表达产物相同.答案1逆转录 2限制性核酸内切酶和 DNA连接酶 3复制 以其为模板合成 S基 因的mRNA或转录4大肠杆菌中表达的 S蛋白 SARS康复病人血清 5相同表 达蛋白质所用的基因相同B卷时间:45分钟总分值:100分考查知识点及角度来源:数理化网难度及题号根底中档稍难基因工程的操作1、 2、 3、 4、 125、7、8、911、15基因工程的应用“6、1013蛋

19、白质工程14、选择题共12小题,每题4分,共48分1 .在DNA连接酶的催化下形成的化学键和位置分别是().A .氢键碱基与脱氧核糖之间B .氢键碱基与碱基之间C.磷酸二酯键 磷酸与脱氧核糖之间D.磷酸二酯键 脱氧核糖与碱基之间解析 此题考查 DNA连接酶的作用.DNA连接酶的作用只是催化 DNA片段的“缝 合,能恢复被限制酶切开了的两个核甘酸之间的磷酸二酯键,不能催化氢键形成.答案 C2 .从基因文库中获取目的基因的根据是().A.基因的核甘酸序列B.基因的功能C.基因的转录产物 mRNAD.以上都是解析 此题考查从基因文库中获取目的基因的方法,解题关键是理解从基因文库中获取目的基因的依据.

20、从基因文库中获取目的基因的依据有:(1)基因的核甘酸序列;(2)基因的功能;(3)基因在染色体上的位置;(4)基因的转录产物 mRNA ; (5)基因的译产物蛋 白质等.答案 D3 .以下有关基因工程操作的表达,.正确的选项是().A .用同种限制性核酸内切酶切割载体与目的基因可获得相同的黏性末端B .以蛋白质的氨基酸序列为依据合成的目的基因与原基因的碱基序列相同C.检测到受体细胞含有目的基因就标志着基因工程操作的成功D.用含抗生素抗性基因的质粒作为载体是由于其抗性基因便于与外源基因连接解析 一种氨基酸可对应多个密码子,以蛋白质的氨基酸序列为依据合成的目的基因与原基因的碱基序列可能不同.只有目

21、的基因在受体细胞中成功表达才标志着基因工程操 作的成功.用含抗生素抗性基因的质粒作为载体,是由于抗性基因作为标记基因可检测 载体是否导入到受体细胞中.答案 A4 .以下关于基因文库的说法,错误的选项是().A.可分为基因组文库和局部基因文库8. cDNA文库属于局部基因文库C.基因组文库的基因在不同物种之间均可进行基因交流D.同种生物的cDNA文库基因数量较基因组文库基因数量少解析 基因组文库只有局部基因能够在不同物种之间进行交流.故正确答案为Co答案 C5 .以下关于DNA连接酶的表达正确的选项是().催化相同黏性末端的 DNA片段之间的连接催化不同黏性末端的 DNA片段之间的连接催化两个黏

22、性末端互补碱基间氢键的形成催化两个核甘酸之间的磷酸二酯键的形成A.B.C.D.解析 在DNA重组技术中,两个DNA片段间必须有相同黏性末端才能互补配对,进行结合;具有相同黏性末端的 DNA分子连接时,DNA连接酶的作用是催化两个核甘酸之 间的磷酸二酯键的形成,即把 “梯子的“扶手缝合起来.故正确答案为 D.答案 D6 .科学家在培育抗虫棉时,经过了许多复杂的过程和不懈的努力,才获得成功.起初把苏 云金芽抱杆菌的抗虫基因插入载体质粒中,然后导入棉花的受精卵中,结果抗虫基因在 棉花体内没有表达.之后在插入抗虫基因的质粒中插入启动子(抗虫基因首端),导入棉花受精卵,长成的棉花植株还是没有抗虫水平.科

23、学家又在有启动子、抗虫基因的质粒 中插.入终止子(抗虫基因末端),导入棉花受精卵,结果长成的植株有了抗虫水平.那么 作为重组的载体应具备的结构是().A .目的基因、启动子、标记基因B.目的基因、终止子、标记基因C.目的基因、启动子、终止子、标记基因D.启动子、终止子、标记基因解析 一个基因表达载体的组成,除了目的基因外,还必须有启动子、终止子以及标记基因等.RNA聚合酶与启动子结合,驱动基因转录出mRNA.终止子在目的基因的尾端,作用是终止转录.标记基因是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因.故正确答案为Co答案 C7.以下黏性末端属于同种限制性核酸内切酶切割而成的是().-T-C-GI IA

24、G-C-T-T-AA一C-A-GTTCCA一AATT-CG 一 AGCTTT一A一GA.B.C.D,解析 同种限制酶切割形成的黏性末端碱基能互补配对.答案 B8.某线性DNA分子含有3 000个碱基对(bp),先用限制酶a切割,再把得到的产物用限制 酶b切割,得到的 DNA片段大小如下表.限制酶 a和b的识别序列和切割位点如图所 示.以下有关说法正确的选项是().a梅I-AGATCT-TCTAGAGGATCC-一CCTAGG-a酶切割产物(bp)b酶再次切割产物(bp)1 600; 1 100; 300800; 300A.在t装DNA分子中,a酶与b酶的识别序列分别有 3个和2个B. a酶与b

25、酶切出的黏性末端不能相互连接C. a酶与b酶切断的化学键分别为磷酸二酯键和氢键D.用这两种酶和 DNA连接酶对该DNA分子进行反复切割、连接操作,假设干循环后,一AGATCC 一一TCTAGG 一序列会明显增多解析 由a、b酶切割后产生的 DNA片段可确认a酶识别序列有2个,b酶识别序列也有2个,a酶和b酶切出的黏性末端可进行互补配对,故可连接;a、b酶均切割3,5磷酸二酯键.答案 D9 .检测转基因生物是否转录出 mRNA ,应通过何种分子杂交方法实现().A . DNA DNA 杂交B. DNA RNA 杂交C. RNA一蛋白质杂交D.蛋白质一蛋白质杂交解析 A、B、D三项分别是在复制、转

26、录和译水平上检测基因工程是否成功的方法,C项所述分子.杂交方法是不存在的.故正确答案为 Bo答案 B10 .在用基因工程技术构建抗除草剂的转基因烟草过程中,以下操作错误的选项是.A.用限制性核酸内切酶切割烟草花叶病毒的核酸B.用DNA连接酶连接经切割的抗除草剂基因和载体C.将重组DNA分子导入烟草原生质体D.用含除草剂的培养基筛选转基因烟草细胞解析 此题考查基因工程操作的程序,解题关键是理解基因工程的根本操作和过程.限制性核酸内切酶切割的是 DNA ,而烟草花叶病毒的遗传物质为RNA , A错;目的基因与运载体的连接由 DNA连接酶催化连接,B正确;烟草原生质体可以作为受体细胞,C正确;目的基

27、由于抗除草剂基因,所以未成功导入目的基因的细胞不具有抗除草剂的能力,筛选的时候应该用含除草剂的培养基筛选转基因烟草细胞,D正确.答案 A11 .现有一长度为 1000碱基对bp的DNA分子,用限制性核酸内切酶EcoR I单独酶切后得到的DNA分子仍是1000 bp,用Kpn I单独酶切得到 400 bp和600 bp两种长度的DNA分子,用EcoR I、Kpn I同时酶切后得到 200 bp和600 bp两种长度的 DNA分子,该.氏曲IA* I fiWKpftl Kpnj氏口小套Kpn成刑C, 600EcolUDNA分子的酶切图谱如下图正确的选项是EcoR I单独酶切后碱基对数应考虑最初DN

28、A分子呈环状.故解析 此题考查的是限制酶的特点.用限制性核酸内切酶量不变,长度不变,说明切割后仍是一条 DNA分子,正确答案为Do答案 D12 .以下技术依据 DNA分子杂交原理的是.观察DNA在细胞中的分布检测目的基因是否导入细胞检测目的基因是否翻译 检测目的基因是否进行转录A.B.解析解题流程如下:C.D.利用甲基绿对细胞 染色.显微镜观察H观察DNA在细胞中的分布检测原理利用DNA分子杂交|目的毡因是否耳人受体细胞目的基因是否转录出mRXA利川抗川一抗体杂幻U n的基因虻否译成蛋白质答案 C二、非选择题共3小题,共52分13.16分以下图表示从苏云金芽抱杆菌别离出来的杀虫晶体蛋白质基因

29、转基因抗虫棉的图解.请据图答复下面的问题.简称Bt基因及形成Bi提取目的某因转入受体细胞一林基因抗虫绵原毒素鲤吧 活化的3昆虫肠道上成削胞哈 影晌昆 毒性物质上的特异性受体馍白结合虫生长1图中a过程要用到的酶是2在进行图中b过程时,由我国科学家独创的十分简便经济的方法是 ,此外, 也经常采用 法.假设要培育转基因绵羊,那么此过程要用 的方法.3为确定抗虫棉是否培育成功,既要用放射性同位素标记的 作探针进行分子杂交测试,又要在个体水平上鉴定,后者具体过程是4活化的毒性物质应是一种 分子,可以全部或局部嵌合于昆虫的细胞膜上,使细胞膜产生孔道,导致细胞由于渗透平衡的破坏而破裂.5我国在“86甜划资助

30、下开展 Bt抗虫棉、抗虫水稻等研究,可以减少农药、杀虫剂的使用.这将对 起到重要作用.解析1图中a过程是提取目的基因,用到的酶是限制酶.2b为将目的基因导入受体细胞.花粉管通道法是我国科学家所创,此外还有农杆菌转化法、基因枪法等将目的基因导入植物细胞的方法,常用的是农杆菌转化法.3检测目的基因是否导入受体细胞的方法,可在分子水平检测和个体水平检测等.4活化毒性物质是晶体蛋白在蛋白酶的作用下得到的,是多肽.5减少农药、杀虫剂的使用必然有利于环境保护.答案1限制性核酸内切酶2花粉管通道法农杆菌转化显微注射3杀虫晶体蛋白质基因或Bt基因、目的基因让害虫吞食抗虫棉叶子,观察害虫的存活状态或其他合理答案4多肽5环境保护14. 18分科学家将鱼抗冻蛋白基因转入番茄,使番茄的耐寒水平大大提升,可以在相对寒冷的环境中生长.以下图是转基因抗冻番茄的培育过程示意图.III抗四环素基因鱼的抗冻 蛋白基因转基因抗懿胚状体质管苗冻番茄1假设图中n是科学家构建的鱼抗冻蛋白基因的表达载体,那么该基因表达载体的组成通常应包括 等.2科学家常采用 法将鱼抗冻蛋白基因导入番茄细胞内.通常采用 技术检测目的基因是否插入番茄的基因组.3多聚半乳糖醛酸酶PG酶可将成熟的番茄果实细胞壁中的多聚半乳糖醛酸降解为半 乳糖醛酸,从而导致果实软化.抑制PG酶的活性可以延长番茄果实储藏期,请

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