植株中全N,P,K的测定

1、植株全氮、磷、钾测定方法一、植物全氮测定（一）H2SO4-H 2O2 消煮法1 、适用范围本方法不包括硝态氮的植物全氮测定,适合于含硝态氮低的植物样品的测定。2、方法提要植物中的氮、磷大多数以有机态存在，钾以离子态存在。样品经浓 H2SO4和氧化剂H 2O2 消煮,有机物被氧化分解,有机氮和磷转化成铵盐和磷酸盐,钾也全部释出。消煮液经定容后，可用于氮、磷、钾的定量。采用H2O2为加速消煮的氧化剂 ,不仅操作手续简单快速,对氮、磷、钾的定量没有干扰,而且具有能满足一般生产和科研工作所要求的准确度。但要注意遵照操作规程的要求操作,防止有机氮被氧化成N 2 气或氮的氧化物而损失。3、试剂（ 1 ）硫

2、酸（化学纯,比重1.84）;（2） 30% H2O2（分析纯）。4、主要仪器设备。消煮炉，定氮蒸馏器。5、操作步骤称取植物样品（0.5mm）0.30.5g（称准至0.0002g）装入100ml开氏瓶或消煮管的底部,加浓H2SO4 5ml, 摇匀（最好放置过夜）,在电炉或消煮炉上先小火加热待H2SO4发白烟后再升高温度，当溶液呈均匀的棕黑色时取下。稍冷后加入 10 滴H2O2,再加热至微沸，消煮约710min,稍冷后重复加H2O2,再消煮。如此重复数（3-4 ）次，每次添加的H2O2应逐次减少,消煮至溶液呈无色或清亮后，再加 热10min,除去剩余的H2O2。取下冷却后 用水将消煮液无损地转移入

3、100ml （或 者 50ml ）容量瓶中,冷却至室温后定容（V 1）。用无磷钾的干的定量滤纸过滤,或放置澄清后吸取清液测定氮、磷、钾。每批消煮的同时,进行空白试验,以校正试剂和方法的误差。6、注释（1）所用的H2O2应不含氮和磷。H2O2在保存中可能自动分解，加热和光 照能促使其分解，故应保存于阴凉处。在H2O2中加入少量H2SO4酸化,可防止 H2O2分解。（ 2） 称样量决定于NPK 含量,健状茎叶称0.5g, 种子 0.3g, 老熟茎叶可称1g,若新鲜茎叶样，可按干样的5倍称样。称样量大时，可适当增加浓H2SO4用量。（3）加H2O2时应直接滴入瓶底液中，如滴在瓶劲内壁上，将不起氧化作

4、用， 若遗留下来还会影响磷的显色。（二）水杨酸-锌粉还原-H 2SO4-加速剂消煮法1 、适用范围包括销态氮的植物全氮测定,适合于硝态氮含量较高的植物样品的测定。2、方法原理样品中的硝态氮在室温下与硫酸介质中的水杨酸作用,生成硝基水杨酸,再用硫代硫酸钠及锌粉使硝基水杨酸还原为氨基水杨酸.然后按H2SO4-加速剂消煮法进行消煮法进行消煮样品,使样品中全部氮转化为铵盐。3、试剂（ 1 ）固体Na 2S2O 3;2 ）还原锌粉（AR）;（ 3） 水杨酸 -硫酸 :30g 水杨酸溶于1L 浓硫酸中。也可以该用含苯酚的浓硫酸 :40g 苯酚溶于1L 浓硫酸中。4、仪器设备。同上。5、操作步骤称取磨细烘干

5、样品（过0.25mm筛）0.10000.2000g或新鲜茎叶样品1.0002.000g,置于100ml开氏瓶或消煮管中，先用水湿?闰内样品（烘干样），然后 加水杨酸-硫酸10ml,摇匀后室温放置30min,加入Na2s2O3约1.5g,锌粉0.4g和水 10ml, 放置 10 min, 待还原反应完成后,加入混合加速剂2g, 按土壤全氮测定方法进行消煮, 消煮完毕,取下冷却后,用水将消煮液无损地转移入100ml 容量瓶中，冷却至室温后定容（V1）。用于滤纸过滤，或放置澄清后吸取清液测定氮。每批消煮的同时,进行空白试验,以校正试剂和方法的误差。（三）消煮液中铵的定量（凯氏法）1 、适用范围。适合

6、于各种植物样品消煮液中氮的定量。2、方法原理植物样品经开氏消煮、定容后 ,吸取部分消煮液碱化,使铵盐转变成氨,经蒸馏,用H3BO3吸收硼酸中吸收的氨可直接用标准酸滴定，以甲基红-澳甲酚绿混合指示剂指标终点。3、试剂（ 1 ） 400g/L NaOH 溶液。（2） 20g/L H 3BO3-指示剂溶液。（ 3）酸标准溶液c（HCL 或 1/2H 2SO4）=0.01mol/L 。4、仪器设备。蒸馏装置或半自动蒸馏仪。5、蒸馏检查蒸储装置是否漏气和管道是否洁净后，吸取定容后的消煮液5.0010.00mL （V 2,含 NH 4-N 约 1mg）, 注入半微量蒸馏器的内室。另取150ml 三角瓶，内

7、加5 ml 2% H 3BO3指示剂溶液（若为包括硝态氮的待测液，应加约6 mL的400g/L NaOH 溶液 ）,通过蒸气蒸馏（注意开放冷凝水,勿使馏出液温度超过40 C）。待储出液体积约达5060ml时，停止蒸储，用少量已调节至pH4.5的水冲洗冷凝管末端。用酸标准溶液滴定馏出液至由蓝绿色突变为紫红色（终点的颜色应和空白测定的滴定终点相同）。与此同时进行空白测定的蒸馏、滴定、以校正试剂和滴定误差。6、结果计算（N）, %= c（V-V 0） X0.014 XD Xl00/m；式中：（N）植物全氮的质量分数，;c 酸标准溶液的浓度,mol/L;V滴定试样所用的酸标准液体积,ml;V0 滴定空

8、白所用的酸标准液, ml;0.014 N 的摩尔质量,kg/mol;D 分取倍数（即消煮液定容体积Vi/吸取测定的体积V2）。二、植物全磷的测定（一） 钒钼黄吸光光度法i 、适用范围。适合于含磷量较高的植物样品的测定（如籽粒样品）。2、方法原理植物样品经浓H2SO4消煮使各种形态的磷转变成磷酸盐。待测液中的正磷酸与偏钒酸和钼酸能生成黄色的三元杂多酸,其吸光度与磷浓度成正比,可在波长400490nm处用吸光光度法测定。磷浓度较高时选用较长的波长，较低时选用 较短波长。此法的优点是操作简便,可在室温下显色,黄色稳定,在 HNO 3、 HClO 4和H2SO4等介质中都适用，对酸度和显色剂浓度的要求

9、也不十分严格，干扰物少，在 可见光范围内灵敏度较低，适测范围广(约为120mg/L P),故广泛应用于含磷 较高而且变幅较大的植物和肥料样品中磷的测定。3、试剂(1)锐铝酸钱溶液：25.0g铝酸钱(NH 4)6Mo 7O2 . 4H 2O,分析纯溶于400mL 水中,必要时可适当加热,但温度不得超过60。另将1.25g 偏钒酸铵(NH 4VO3,分析纯)溶于300mL沸水中，冷却后加入250mL浓HNO3(分析纯)。将铝酸钱溶液缓缓注入铀酸钱(溶液中，不断搅匀，最后加水稀释至1L,贮于棕色瓶 中。( 2) NaOH 溶液 (c=6mol/L):24gNaOH 溶于水 , 稀释至 100ml 。

10、(3)二硝基酚指示剂(p=2g/L):0.2g2,6-二硝基酚或2,4-二硝基酚溶于 100ml 水中。(4)磷标准溶液p(P)=50mg/L:0.2195g( 干燥的KH2P。4(分析纯)溶于水, 加入 5ml 浓 HNO 3,于 1L 容器瓶中定容。4、主要仪器设备。分光光度计。5、分析步骤准确吸取定容，过滤或澄清后的消煮液520ml( V2,含P0.050.75mg)放入50ml 容量瓶中,加 2 滴二硝基酚指示剂,滴加6mol/LNaOH 中和至刚呈黄色,加入 10.00ml 钒钼酸铵试剂,用水定容(V3)。 15min 后 ,用1cm 光径的比色槽在波长 440nm 处进行测定,以空

11、白溶液(空白溶液消煮液按上述步骤显色),调节仪器零点。校准曲线或直线回归方程:准确吸取50mg/L P 标准液 0, 1, 2.5, 7.5, 10,15ml 分别放入50mL 容量瓶中,按上述步骤显色,即得0, 1.0, 2.5 , 5.0, 7.5, 10,15 ml P 的标准系列溶液,与待测液一起进行测定,读取吸光度,然后绘制校准曲线或求直线回归方程。6、结果计算p(P) XV3X(Vi/V2)Xl0-4(P尸m式中：(P) 植物磷白质量分数，;p(P)从校准曲线或回归方程求彳#的显色液中磷的质量浓度,mg/L；V i消煮液定容体积，ml;V 2吸取测定白消煮液体积，ml;V 3显色液

12、体积，ml;m 称样量,g;10-4 将mg/L 浓度单位换算为百分含量的换算因数。7、注释（1）显色液中p（P）=15 mg/L时，测定波长420nm;520mg/L 用490nm。待测液中Fe3+浓度高应选用450nm,以清除Fe3+干扰。校准曲线也应 用同样波长测定绘制。（ 2）一般室温下,温度对显色影响不大,但室温太低（如 <15 ）时 ,需显色30min 。稳定时间可达24h 。（3）如试液为HCl,HClO 4介质，显色剂应用HCl配制;试液为H2SO4介质，显 色剂也用H2SO4配制。显色液酸的适宜浓度范围为0.21.6 mol/L,最好是0.5 1.0 mol/L 。酸度

13、高显色慢且不完全,甚至不显色;低于 0.2 mol/L 易产生沉淀物,干扰测定。铝酸盐在显色液中的终浓度适宜范围为 1.6X10-310-2mol/L,铀酸 盐为 8 X10-52.2 X10-3 mol/L。4、此法干扰离子少。主要干扰离子是铁，当显色液中Fe3+浓度超过0.1%时, 它的黄色有干扰,可用扣除空白消除。（二）钼锑抗吸光光度法1 、适用范围适合于含磷量较低的植物样品的测定（如茎秆样品等）。2、方法提要植物样品经浓H2SO4消煮使各种形态的磷转变成磷酸盐。在一定酸度下，待测液中的正磷酸与钼酸铵和酒石酸锑钾生成一种三元杂多酸,后者在室温下能迅速被抗坏血酸还原为蓝色络合物,可用吸光光

14、度法测定。3、试剂（ 1 ） 6mol/L NaOH 溶液(3) 2mol/L(1/2 H 2SO4)硫酸溶液 56mL 浓 H2SO4 加水至 100mL。(4)铝睇贮存液：浓H2SO4(分析纯)126 ml缓慢地注入约400 ml水中，搅 拌 ,冷却。10.0g 钼酸铵(分析纯)溶解于约60的 300ml 水中 ,冷却。然后将H2SO4溶液缓缓倒入铝酸钱溶液中，再加入100 ml0.5%酒石酸睇钾(KSbOC4O6 .1/2H 2O,分析纯)溶液，最后用水稀释至1L,避光贮存。此贮存液含铝酸钱为1%,酸浓度为c(1/2 H 2SO4)=4.5 mol/L(5)铝睇抗显色剂：1.50g抗坏血

15、酸(C6H8。6,左旋,旋光度+21+22,分析纯 ) 溶于 100ml 钼锑贮存液中,此液须随配随用,有效期一天,冰箱中存放,可用35天。(6)磷标准工作液p(P)=5 mg/L:吸取100mg/L P 标准贮存液稀释20倍, 即为 5 mg/L P 标准工作溶液,此溶液不宜久存。4、主要仪器设备。同上5、分析步骤吸取定容过滤或澄清后的消煮液 2.005.00ml(V 2,含P530 u g)于50ml 容量瓶中，用水稀释至约30ml,加12滴二硝基酚指示剂，滴加6mol/L NaOH 溶液中和至刚呈黄色，再加入1滴2mol/L(1/2 H 2SO4)溶液,使溶液的黄色刚刚褪 去，然后加入铝

16、睇抗显色剂5.00ml,摇匀，用水定容(V3)。在室温高于15 c的条件 下放置 30min 后 ,用 1cm 光径比色槽在波长700nm 处测定吸光度,以空白溶液为参比调节仪器零点。校准曲线或直线回归方程：准确吸取p(P尸5mg/L标准工作溶液0, 1,2, 4,6, 8 ml, 分别放入50mL 容量瓶中,加水至30ml, 同上步骤显色并定容, 即得0,按0.1, 0.2, 0.4, 0.6, 0.8 mg/L P 标准系列溶液, 与待测液同时测定,读取吸光度,然后绘制校准曲线或直线回归方程。6、结果计算:同 1 。7、注释根据分光光度计性能，可选用650890nm波长处测定，880890

17、nm处灵敏度高三、植物全钾的测定火焰光度法（一）适用范围。适合于植物样品消煮液中钾含量的测定。（二）方法提要植物样品经消煮或浸提,并经稀释后,待测液中的K 可用火焰光度法测定。（三）试剂K 标准溶液p（K尸 100mg/L :0.1907gKCl（分析纯），在 105 110 C 干燥 2h）溶于水,于 1L 容量瓶中定容,存于塑料瓶中。（四）主要仪器设备。火焰光度计。（五）分析步骤吸取定容后的消煮液5.0010.00ml（ V2）放入50mL容量瓶中，用水定容（Vi）, 直接在火焰光度计上测定,读取检流计读数。校准曲线或直线回归方程准确吸取100mg/L K 标准溶液0, 1, 2.5, 10, 20ml, 分别放入50mL 容量瓶中,加水定容的空白消煮液5 或 10ml（ 使标准溶液中的离子成分和待测液相近）,加水定容。即得0, 2,