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文档简介
1、二、免疫抑制药物应用免疫抑制剂可明显延长移植物在受者体内的存活时间。长时间接受 免疫抑制剂的受者发生感染和恶性肿瘤的可能性明显增大。环抱素A、他克莫司 (FK506)通过抑制IL-2基因的转录而抑制T细胞活化。糖皮质激素诱导活化的T 细胞凋亡,下调MHC分子的表达。硫醴嚓吟可抑制次黃嚓吟核昔酸代谢,干扰DM 合成,从而抑制T淋巴细胞增生。抗人CD3抗体可抑制T细胞的免疫应答。三、诱导耐受诱导对移植物的免疫耐受应是控制排斥反应的最理想方法,但该类方法迄今 多处于实验研究阶段。第十九单元免疫学检测技术【考试大纲】十九、免疫学检测 技术1.抗体的检测及应用抗体进行的 检测(1)概念(2)血凝抑制(3
2、)凝集反应和血型的鉴定(4)免疫荧光(5)放射免疫(6)酶免疫(ELISA和免疫组化)(7)免疫电镜(8)免疫沉淀(9)免疫印迹2.免疫细胞的分离常用方法3.免疫细胞的特异性、数量和功(1)流式细胞术能检测(2)增殖试验(3)细胞毒试验(4)细胞凋亡检测(5)芯片技术(6)细胞因子的生物活性检 测抗体的检测及应用抗体进行的检测一、概念免疫学检测的基本原理是抗原-抗体的特异性结合,山于抗体长存在于血清 中,因此常将体外进行的抗原抗体结合反应称为血清学反应。常见的反应类型有凝 集反应、沉淀反应、中和反应等,相关的技术称为血清学技术。二、血凝抑制有血凝素(HA)的病毒能凝集人或动物红细胞,称为血凝现
3、象,通常用于病 毒的检测。血凝现象被相应抗体抑制称为血凝抑制试验,原理是相应抗体与病毒结 合后,阻止病毒表面HA与红细胞结合,通常用于病毒抗体的快速检测。常用于正 粘病毒、副粘病毒及黃病毒等的辅助诊断、流行病调查,也可用于鉴定病毒型与亚 型。不同的病毒抗体也会相同。三、凝集反应和血型的鉴定红细胞、细菌等颗粒性抗原与相应抗体特异性结合后,形成肉眼可见的凝集 块,这一类反应称为凝集反应。 直接凝集:颗粒性抗原与相应抗体结合产生的凝集反应。可鉴定细菌和血 型。如玻片法为定性试验,常用于菌种鉴定或人类ABO血型的鉴定等。试管法是半 定量试验,常用于检测抗体的滴度或效价。 间接凝集:将可溶性抗原或抗体包
4、被在红细胞或乳胶颗粒载体表面后,与 相应抗体或抗原作用出现的凝集。颗粒载体有红细胞、聚苯乙烯乳胶颗粒等,而相 应的凝集现象分别称为间接血球凝集、间接乳胶凝集,如将人IgG吸附在乳胶颗粒 上的类风湿因子的检测等。将已知抗体吸附在载体上的凝集称为反向间接凝集。如 Rh血型不符检测中队患者抗红细胞Rh抗原IgG的检测。四、免疫荧光免疫荧光是用荧光素与抗体连接成荧光抗体(或抗原),再与待检标本中的 抗原(或抗体)反应,置荧光显微镜下观察,抗原抗体复合物散发出荧光,借此对 标本中的抗原作鉴定和定位。免疫荧光法在病原体的诊断、细胞表面标志的鉴定等 方面用途广泛。五、放射免疫放射免疫技术为一种将放射性同位素
5、测量的高度灵敏性、精确性和抗原抗体 反应的特异性相结合的体外测定超微量物质的新技术。广义来说,凡是应用放射性 同位素标记的抗原或抗体,通过免疫反应测定的技术,都可称为放射免疫技术,经 典的放射免疫技术是标记抗原与未标抗原竞争有限量的抗体,然后通过测定标记抗 原抗体复合物中放射性强度的改变,测定出未标记抗原量。它可以分为两类:竞争 性RIA和非竞争性RIA,也称为免疫放射分析。六、酶免疫(ELISA和免疫组化)酶免疫分析用酶标记的抗体进行的抗原抗体反应。酶标记抗原抗体后形成的酶标记物,既保留抗原或抗体的免疫活性,乂保留 酶的催化活性。当酶标记物与待测样品中相应的抗原或抗体相互作用时,可形成酶 标
6、记抗原抗体复合物。利用复合物上标记的酶催化底物显色,其颜色深浅与待测样 品中抗原或抗体的量相关。该方法灵敬度可达到阴pg/ml水平。常用的标记物有 辣根过氧化物酶HRP和碱性磷酸酶AP等。七、免疫电镜免疫电镜是将免疫化学技术与电镜技术相结合在超微结构水平观察抗原、抗 体结合定位的方法。八、免疫沉淀免疫沉淀是将抗原和抗体特异性结合用于研究蛋口质相互作用的经典方法, 可确定两种蛋口质在细胞内生理性相互作用。九、免疫印迹免疫印迹试验乂称Western印迹法。该法能测定待检蛋口质的分子量和特异 性。应用该法检测血清中的人免疫缺陷病毒(HIV)抗体是确认HIV感染的方法。免疫细胞的分离常用方法体外测定免
7、疫细胞首先要从外周血或淋巴组织中分离所需的细胞。其主要方 法是根据细胞的表面标记、理化性状及功能等方面的差别进行设计。常用的方法有 密度梯度离心法辅以花环沉降或亲合板粘附法等。U前最先进的方法是用荧光激活 细胞分离仪(FACS)可自动、快速和大量地分出各类纯度高、活性强的细胞。免疫细胞的特异性、数量和功能检测一、流式细胞术根据表面表达CD分子的种类、水平和多种CD表达格局,流式细胞术可以二 维荧光方图和比例统计显示待测细胞群体中某群CD+细胞的比例和数量等。二、增殖试验增殖试验也叫淋巴细胞转化试验。可分为T细胞增殖试验、迟发型超敏反应 皮试、B细胞抗体形成细胞测定。三、细胞毒试验细胞毒试验是检
8、测CTL、NK等细胞杀伤靶细胞活性的最为经典可靠的细胞学 技术。四、细胞凋亡检测细胞凋亡检测有琼脂糖凝胶电泳法、FACS法和TUNEL法。五、芯片技术芯片技术基本原理是将各种蛋口质有序地固定于芯片,再用荧光标记抗体与 芯片上对应的蛋白质结合,测定芯片上各点的荧光强度可指示对应的蛋白质的含 量。六、细胞因子的生物活性检测细胞因子的检测技术:生物活性测定法;ELISA检测;DNA聚合酶链反 应。第二十单元免疫学防治【考试大纲】二十、免疫学防治1.免疫治疗(1)概念(2)分类(3)应用2.免疫预防(1)人工免疫的概念(2)人工免疫的分类(3)疫苗的种类及应用免疫治疗一、概念针对机体低下或亢进的免疫状态,人为地增强或抑制机体的免疫功能以达到 治疗疾病目的的治疗方法称为免疫治疗。二分类分类名称用途或特点免疫增强疗法感染、肿瘤、免疫缺陷病的治疗免疫抑制疗法移植排斥、自身免疫病、超敬反应病、炎症的治疗主动免疫治疗人为提供具有免疫原性的制剂,使机体主动产生特异性免疫力被动免疫治疗人为提供免疫应答的效应物质,直接发回免疫效应特异性免疫治疗调整机体免疫功能所用制剂的作用具有抗原特异性非特异性免疫治疗调整机体免疫功能所用
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