赛分科技-SRT体积排阻色谱柱

1、体积排阻色谱柱水溶性体积排阻色谱柱（SEC）Ø SRT 系列Ø SRT-C系列Ø Zenix系列Ø Zenix-C系列脂溶性体积排阻色谱柱（GPC）Ø Mono GPC系列Ø HTP GPC系列纳米管专用体积排阻色谱柱Ø CNT系列简述：赛分科技体积排阻色谱柱以其高分辨率、高稳定性在全球富有盛名，广泛的应用于世界各地实验室的分析、检测工作中。赛分科技体积排阻柱技术一直走在世界的前列：SRT系列是世界上使用最为广泛的SEC色谱柱之一；Zenix系列采用3 m硅胶填料，是目前世界上分辨率最高的SEC色谱柱；SRT-C、Zenix

2、-C采用独特的键合技术，专为疏水性及聚合物修饰蛋白量身打造；Mono GPC系列所采用的填料孔径均一、具有优良的耐溶剂性；HTP GPC可耐受250 温度。CNT系列是世界上唯一用于碳纳米管分离的专用产品。水溶性体积排阻色谱柱概述SRT、Zenix、SRT-C 和Zenix-C系列体积排阻色谱柱均采用经特殊表面修饰的高纯硅胶作为填料，其修饰方式为在硅胶表面化学键合一层均一、亲水、纳米厚度的中性聚合物薄膜。 SRT、Zenix和SRT-C、Zenix-C键合方式的不同之处在于：前两者固定相表面键合的是一层“站立”着的单分子层，而后两者则是一层“平躺”着的单分子层。同时Zenix和Zenix-C为

3、3 um粒径，SRT和SRT-C为5 um粒径，这四款体积排阻柱相互配合，可满足客户对分辨率及柱效的不同要求。赛分科技完整的产品线为生物分子体积排阻分离提供了稳定、重现和最高分辨率的最优选择。固定相的差异图1. 固定相修饰的差异：SRT和Zenix在硅胶表面修饰了一层“站立”着的亲水中性单分子层，SRT-C和Zenix-C在硅胶表面修饰了一层“平躺”的亲水中性单分子层。粒径差异图2. Zenix和Zenix-C以3 µm多孔硅胶为基质； SRT和 SRT-C 以5 µm多孔硅胶为基质Zenix和Zenix-C的独特优点Zenix 和Zenix-C色谱柱采用3 µm

4、粒径的填料，为生物分子的分离提供最高的柱效。图3. 孔径为300 Å的SRT SEC柱与Zenix SEC柱对BSA分离效果的对比。色谱柱: 7.8x300mm; 流动相: 150mM 磷酸盐缓冲液, pH 7.0; 流速: 1.0mL/min; 检测波长: 214nm; 进样量: 10mL (5.0 mg/mL)表1. Sepax SEC色谱柱的主要特点特性SRTZenixSRT-CZenix-C粒径5 µm3 µm5 µm3 µm孔径(Å)100, 150, 300, 500, 1000 & 2000100, 150, 3

5、00150, 300 & 500100, 150, 300分辨率高最高，更短的柱子得到更快的分离高最高，更短的柱子得到更快的分离效率高为5 um 柱的两倍高为5 um 柱的两倍选择性 SRT与Zenix相同SRT-C与Zenix-C相同表面结构化学键合一层“站立”的单分子层化学键合一层“平躺”的单分子层典型应用领域单克隆抗体、蛋白、多肽、核酸、寡核苷酸、病毒和水溶性聚合物等“棘手的样品”包括胰岛素、膜蛋白等疏水性蛋白，聚合物 (如PEG、肽链等) 修饰的单克隆抗体蛋白SRT体积排阻色谱柱概述SRT SEC键合固定相采用专利的表面修饰技术，通过在高纯度具有良好机械稳定性的硅胶基质上，键合

6、一层均匀的纳米厚度中性亲水薄膜而制备得到。工艺采用可控的化学修饰技术，因此能确保柱与柱之间有着可靠的重现性。SEC填料采用化学键合技术，表面亲水涂层覆盖完全，因此不仅具有优异的稳定性，而且对蛋白等生物样品的非特异性吸附作用也非常小。精心设计的大孔体积可保证高的分离容量以及优异的分辨率。广泛应用于生物分子及水溶性聚合物的分离和检测。优异的特性Ø 高柱容量、高分辨率Ø 宽的pH范围 (pH范围2-8.5)Ø 使用寿命长Ø 低盐浓度洗脱，适合LC-MS分析Ø 对于生物样品常见的PEG或者吐温80等物质无强吸附Ø 极低的非特异性吸附, 高的蛋

7、白回收率及活性回收率Ø 解决多维色谱分析应用应用领域Ø 蛋白药物 (人血白蛋白、免疫球蛋白、HGH、EPO等)Ø 多肽 (Peptide)Ø 水溶性聚合物 (多糖、PEG)Ø 抗生素 (头孢类抗生素)Ø 抗体 (Antibodies)、疫苗 (Vaccine)Ø 病毒蛋白 (Virus Protein)、细胞发酵液、DNA标准测试谱图及蛋白分子量校正曲线图1. SRT SEC柱 标准蛋白测试图谱11a11a色谱柱: SRT SEC-100、SRT SEC-150、SRT SEC-300、SRT SEC-500和SRT SEC

8、-1000柱( 5 µm, 4.6mm I.D.×300mm)流动相: 150 mM磷酸盐缓冲液，pH 7.0流速: 0.35 mL/min检测波长: UV 214nm温度:室温 (23°C)进样体积: 3µL样品: 1a）甲状腺球蛋白聚合体; 1) 甲状腺球蛋白 (1.0mg/mL), 670kD； 2) BSA双聚体, 132kD； 3) BSA (1.0mg/mL), 66kD; 4) 核糖核酸酶A (1.0 mg/mL), 13.7kD; 5）尿嘧啶(2.5 mg/mL), 120 D。表1. SRT SEC色谱柱技术参数表固定相SRT SEC-

9、100 SRT SEC-150 SRT SEC-300SRT SEC-500SRT SEC-1000SRT SEC-2000材料表面键合亲水薄膜的硅胶表面键合亲水薄膜的硅胶表面键合亲水薄膜的硅胶表面键合亲水薄膜的硅胶表面键合亲水薄膜的硅胶表面键合亲水薄膜的硅胶颗粒大小5 mm5 mm5 mm5 mm5 mm5 mm孔径 (Å) 100 150 300 500 1,000 2,000蛋白分子量范围100 - 100,000500 - 150,0005,000 1,250,00015,000 - 5,000,00050,000 - 7,500,000> 10,000,000水溶性聚

10、合物分子量范围 500-10,000500-25,0001,000-100,0002,500-500,0005,000-1,500,00050,000->2,500,000pH稳定性2 8.5，短时间可耐受 8.5-9.52 8.5 ，短时可耐 8.5-9.52 8.5 ，短时可耐 8.5-9.52 8.5 ，短时可耐 8.5-9.52 8.5 ，短时可耐 8.5-9.52 8.5 ，短时可耐 8.5-9.5反压 (psi for a 7.8x300 mm) 700 700 700 700700700最大压力 (psi) 4,500 4,500 3,500 3,000 3,000 3,0

11、00盐浓度范围20 mM - 2.0 M20 mM - 2.0 M20 mM - 2.0 M20 mM - 2.0 M20 mM - 2.0 M20 mM - 2.0 M最高使用温度 80oC 80oC 80oC 80 oC 80 oC 80 oC流动相兼容性常规水相及有机相溶剂常规水相及有机相溶剂常规水相及有机相溶剂常规水相及有机相溶剂常规水相及有机相溶剂常规水相及有机相溶剂宽的孔径选择基于独有的表面修饰技术，赛分SRT SEC柱提供众多孔径规格（从100Å到2000Å）以供用户选择。SRT SEC固定相在众多的分离应用中可实现高的分离及最大的回收率。其应用领域涵盖了生物

12、大分子（如蛋白质和核酸）、生物小分子（如缩氨酸和寡聚核苷酸）、天然高分子（如多糖）、人造高分子、生物细胞（如细菌和病毒），以及纳米粒子等。图2. SRT SEC柱蛋白分子量校正曲线色谱柱: 7.8x300 mm, 5 µm流动相: 150 mM phosphate buffer, pH 7.0流速: 1.0 mL/min检测波长: UV 280nm进样量: 10 µL样品: 1. Thyroglobulin, 670 kD; 2. g-Globulin, 158 kD; 3. BSA, 66 kD; 4. Ovalbumin, 44 kD; 5. Myoglobin, 17

13、.6 kD; 6. Ribonuclease A, 13.7 kD; 7. B12, 1.35 kD; 8. Uracil, 120高容量、高分辨率体积排阻色谱中，填料的孔体积决定了色谱柱的最高容量。孔体积越大，柱容量就越高，分离效果也越好。赛分科技精心设计的SRT固定相具有大的孔体积，例如SRT SEC-150、300、500孔体积为1.31.5mL/g，而SRT SEC-100、1000、2000的孔体积为1.01.1mL/g。图3显示，而T柱则不能实现基线分离。另外，SRT柱分离聚-DL-丙氨酸的完美峰形表明其对聚-DL-丙氨酸没有非特异性作用。反之，T柱分离聚-DL-丙氨酸时的峰形变宽

14、和拖尾现象则说明该柱固定相与样品之间存在某些非特异性结合作用。图3. 相近孔体积的SRT SEC-150与某品牌T SEC柱的比较色谱柱: SRT SEC-150, 7.8x300 mm, 5 µm流动相: 150 mM PBS, pH 7流速: 1.0 mL/min温度: Ambient (23° C)检测波长: UV 280nm进样量: 10 µL样品: 1) Thyroglobulin, 670kD; 2) BSA monomer, 66kD; 3) Ribonuclease A, 13.7kD; 4) poly-DL-alanine, 1-5 kDa; 5

15、) Uracil, 120D. (All columns are brand new and equilibrated for >5 column volumes with mobile phase to get flat baseline. All samples run on same day).高载量上样量是体积排阻色谱分离与纯化的重要指标。从图4可以看到，以BSA作为目标分子，赛分SRT 分析柱的上样量可以超过500g，说明其具有高载量的特点。图4. BSA loading test on a SRT SEC-150 column.色谱柱: 7.8x300 mm (5 µ

16、;m)流动相: 150 mM PBS, pH 8.5流速: 1.0 mL/min进样体积:10 µL检测波长:UV214 nm高的批间重现性SRT SEC固定相的合成采用可控的表面化学修饰技术，其表面涂层高度重现，使得填料批次与批次之间有着良好的重现性，加之严格的装柱工艺控制，确保了不同批次色谱柱之间的保留时间的差异在5%以内。图5是蛋白标准混合样品在3个不同批次SRT SEC-150柱上分离得到的结果。其中核糖核酸酶A的保留时间差异最大，但也在2%以内。图5. 三个不同批次SRT SEC-150柱之间的对比图谱 色谱柱: SRT SEC-150 (5 µm, 4.6x30

17、0 mm)流动相:150 mM phosphate buffer, pH 7.0流速:0.35 mL/min检测波长:UV 214 nm温度:Ambient (23 oC)进样量:5 µL样品:1) Thyroglobulin (1.0 mg/mL), 2) BSA (1.0 mg/mL), 3) Ribonuclease A (1.0 mg/mL), 4) Uracil (2.5 mg/mL)优异的稳定性SRT SEC固定相表面具有一层极致密的亲水、中性聚合物薄膜，可以阻止流动相接触薄膜内侧，防止薄膜脱落，即使在高流速下也能保持高的稳定性。图6. SRT SEC色谱柱稳定性测试色谱

18、柱: SRT SEC-300, 5 µm, 7.8x300 mm流速: 1.7 mL/min. 流动相: 250 mM NaCl in 100 mM sodium phosphate, pH 7.0. 样品: monoclonal antibody.SRT SECSRT SEC固定相可用于多种缓冲体系，如醋酸铵、磷酸盐、Tris等。当用150mM的磷酸缓冲液（pH 7.0）作为流动相时，在45天内进样100次保留时间的偏差在5%以内（见图7）。SRT SEC固定相可在高盐浓度，如2.0M 下使用。另外，SRT SEC柱在有机溶剂如甲醇、乙醇、THF、DMF、DMSO等中也可使用。图7

19、. SRT SEC柱pH8.5条件下稳定性的测试色谱柱: SRT SEC-300, 5 µm, 4.6x300 mm流动相: 150mM PBS, pH 8.5流速: 0.35 mL/min. 检测波长: 214nm 进样量: 3µL 样品: 1）Thyroglobulin, 2）BSA, 3）Ribonuclease A, 4）Uracil高蛋白回收率 SRT SEC固定相为中性亲水固定相。蛋白和其他生物分子与SRT柱固定相之间几乎没有非特异性相互作用。蛋白不会吸附到硅胶基质表面，因此SRT色谱柱对蛋白具有高的回收率，且能保持很好的活性。例如，在分离酸性蛋白BSA以及碱性

20、蛋白溶菌酶的过程中样品回收率大于95%。应用实例图8. SRT SEC-150对抗体的分离色谱柱: SRT SEC-150, 5 µm, 7.8x300 mm流动相: 150 mM PBS, pH 7.0流速: 1.0 mL/min检测波长: UV 280 nm进样量: 10 µL (1.0 mg/mL)图9. SRT SEC-300对抗体的分离色谱柱: SRT SEC-300, 5 µm, 7.8x300 mm流动相: 150 mM PBS, pH 7.0流速: 1.0 mL/min检测波长: UV 280 nm进样量: 10 µL (1.0 mg/m

21、L)图10. 大肠杆菌发酵液的分离色谱柱: SRT SEC, 5 µm, 7.8x300 mm 流动相: 0.15 M PBS, pH 7.0流速: 1.0 mL/min检测波长: UV 280nm进样量: 10 µL样品: E. coli lysate (2.5 mg/mL)图11. 人血白蛋白的分析色谱柱: SRT SEC-300, 5mm, 7.8×300mm 流动相: 0.2mol/L PBS(pH7.0，含有1%异丙醇)流速: 0.6 mL/min进样量: 20 µL，检测波长: UV280 nm图12. 低分子量多聚糖的分离植物根部提取物中牛

22、膝多糖的分离 (ABPS) (MW<10,000).色谱柱: SRT SEC-100, SRT SEC-150, 5 µm, 4.6×300mm流动相: 10 mM PBS, pH 6.8流速: 0.35 mL/min检测波长: UV 192nm进样量: 1.0µL样品: 牛膝多糖(ABPS), 50mg/mL水溶液图13. 头孢地嗪钠分析色谱柱: Zenix SEC-150, 3mm, 7.8×300mm 流动相: 5mM Phosphate Buffer (pH=7.0) : ACN = 95 : 5 (V/V) 流速: 0.8 mL/min；

23、 温度: 室温检测波长: UV 231nm； 进样量: 20 µL样品: 头孢地嗪钠Bio-rad 订购信息Sepax SRT SEC-100产品名称粒度孔径规格订货号SRT SEC-1005um100 Å21.5x600mm215100-21560SRT SEC-1005um100 Å21.5x300mm215100-21530SRT SEC-1005um100 Å7.5x600mm215100-7560SRT SEC-1005um100 Å7.8x300mm215100-7830SRT SEC-1005um100 Å7.8x150

24、mm215100-7815SRT SEC-1005um100 Å7.8x50 (Guard)215100-7805SRT SEC-1005um100 Å4.6x300mm215100-4630SRT SEC-1005um100 Å4.6x150mm215100-4615SRT SEC-1005um100 Å4.6x50 (Guard)215100-4605Sepax SRT SEC-150产品名称粒度孔径规格订货号SRT SEC-1505um150 Å21.5x600mm215150-21560SRT SEC-1505um150 Å2

25、1.5x300mm215150-21530SRT SEC-1505um150 Å7.5x600mm215150-7560SRT SEC-1505um150 Å7.8x300mm215150-7830SRT SEC-1505um150 Å7.8x150mm215150-7815SRT SEC-1505um150 Å7.8x50 (Guard)215150-7805SRT SEC-1505um150 Å4.6x300mm215150-4630SRT SEC-1505um150 Å4.6x150mm215150-4615SRT SEC-15

26、05um150 Å4.6x50 (Guard)215150-4605Sepax SRT SEC-300产品名称粒度孔径规格订货号 SRT SEC-3005um300 Å21.5x600mm215300-21560 SRT SEC-3005um300 Å21.5x300mm215300-21530 SRT SEC-3005um300 Å7.5x600mm215300-7560 SRT SEC-3005um300 Å7.8x300mm215300-7830 SRT SEC-3005um300 Å7.8x150mm215300-7815 S

27、RT SEC-3005um300 Å7.8x50 (Guard)215300-7805 SRT SEC-3005um300 Å4.6x300mm215300-4630 SRT SEC-3005um300 Å4.6x150mm215300-4615 SRT SEC-3005um300 Å4.6x50 (Guard)215300-4605Sepax SRT SEC-500产品名称粒度孔径规格订货号SRT SEC-5005um500 Å21.5x600mm215500-21560SRT SEC-5005um500 Å21.5x300mm21

28、5500-21530SRT SEC-5005um500 Å7.5x600mm215500-7560SRT SEC-5005um500 Å7.8x300mm215500-7830SRT SEC-5005um500 Å7.8x150mm215500-7815SRT SEC-5005um500 Å7.8x50 (Guard)215500-7805SRT SEC-5005um500 Å4.6x300mm215500-4630SRT SEC-5005um500 Å4.6x150mm215500-4615SRT SEC-5005um500

29、97;4.6x50 (Guard)215500-4605Sepax SRT SEC-1000产品名称粒度孔径规格订货号 SRT SEC-10005um1000 Å21.5x600mm215950-21560 SRT SEC-10005um1000 Å21.5x300mm215950-21530 SRT SEC-10005um1000 Å7.5x600mm215950-7560 SRT SEC-10005um1000 Å7.8x300mm215950-7830 SRT SEC-10005um1000 Å7.8x150mm215950-7815 S

30、RT SEC-10005um1000 Å7.8x50 (Guard)215950-7805 SRT SEC-10005um1000 Å4.6x300mm215950-4630 SRT SEC-10005um1000 Å4.6x150mm215950-4615 SRT SEC-10005um1000 Å4.6x50 (Guard)215950-4605Sepax SRT SEC-2000产品名称粒度孔径规格订货号 SRT SEC-20005um2000 Å21.5x600mm215980-21560 SRT SEC-20005um2000

31、97;21.5x300mm215980-21530 SRT SEC-20005um2000 Å7.5x600mm215980-7560 SRT SEC-20005um2000 Å7.8x300mm215980-7830 SRT SEC-20005um2000 Å7.8x150mm215980-7815 SRT SEC-20005um2000 Å7.8x50 (Guard)215980-7805 SRT SEC-20005um2000 Å4.6x300mm215980-4630 SRT SEC-20005um2000 Å4.6x150m

32、m215980-4615 SRT SEC-20005um2000 Å4.6x50 (Guard)215980-4605注：以上为常备规格订货信息，其它规格或特殊定制产品，电询。SRT-C体积排阻色谱柱概述在实际的蛋白分离、分析工作中，科研工作者经常会遇到某些疏水性蛋白及聚合物改性蛋白在常规SEC柱上出峰状态与理论不符的情况。针对此种情况，赛分科技在SRT系列色谱柱的基础上，专门推出针对该类样品的Sepax SRT-C SEC系列色谱柱。该键合固定相采用专利的表面修饰技术，通过在高纯度的硅胶基质上键合均匀的纳米厚度中性亲水涂层而制备得到。由于采用可控的化学修饰技术，确保了填料批间有着可

33、靠的重现性。SEC填料采用化学键合技术，表面亲水涂层覆盖完全，因此不仅具有优异的稳定性，而且对蛋白等生物样品的非特异性吸附作用也非常小。同时，大的孔体积保证了高的载样量及优异的分辨率。优异的特性Ø 高载量及高分辨率Ø 稳定的批间重现性Ø 高的蛋白回收率，且蛋白不易失活Ø 极低的非特异性吸附Ø 专为疏水性蛋白及改性蛋白（如PEG化抗体）Ø 适用于常规生物样品的分离与制备。图1. SRT-C SEC的蛋白分子量校正曲线色谱柱:7.8x300 mm, 5 µm流动相: 150 mM phosphate buffer, pH 7.0

34、流速:1.0 mL/min检测波长:UV 214 nm进样量:10 µL样品: 1. Thyroglobulin, 670 kD; 2. g-Globulin, 158 kD; 3. BSA, 66 kD; 4. Ovalbumin, 44 kD; 5. Myoglobin, 17.6 kD; 6. Ribonuclease A, 13.7 kD; 7. B12, 1.35 kD; 8. Uracil, 120表1.SRT-C SEC色谱柱技术参数表固定相SRT-C SEC-150 SRT-C SEC- 300 SRT-C SEC- 500材料表面键合亲水薄膜的硅胶表面键合亲水薄膜的

35、硅胶表面键合亲水薄膜的硅胶颗粒大小5 mm5 mm5 mm孔径 (Å) 150 300 500蛋白质分子量范围 500 - 150,0005,000 1,250,00015,000 5,000,000水溶性聚合物分子量范围 500-25,0001,000-100,00025,000-500,000pH 稳定性2 8.5 短时可耐8.5-9.52 8.5 短时可耐8.5-9.52 8.5 短时可耐8.5-9.5反压 (psi for a 7.8x300 mm) 700 700 700 最大压力 (psi) 4,500 3,500 3,000盐浓度范围20 mM - 2.0 M20 mM

36、 - 2.0 M20 mM - 2.0 M最高使用温度 (oC) 80 80 80流动相兼容性常规水相及有机相溶剂常规水相及有机相溶剂常规水相及有机相溶剂独特的固定相结构图2. 固定相的区别: SRT是单层直立状的键合层（Zenix同SRT）；SRT-C 是单层平铺状的键合层应用实例图3. 单克隆抗体的分离色谱柱:SRT-C SEC-300, 5 µm, 7.8x300 mm流动相:150 mM PBS, pH 7, 流速:1.0 mL/min温度:Ambient (23° C), 检测波长:UV 280nm，进样量:10 µL 样品:Monoclonal ant

37、ibody (1.3 mg/mL)图4. 蛋白混合物的分离色谱柱: SRT-C 300 (7.8x300 mm, 5 µm)流动相: 150 mM PBS, pH 7流速: 1.0 mL/min温度: Ambient (23° C)检测: UV 214nm进样量: 10 µL样品: 1) Thyroglobulin, 670kD; 2) g-Globulin, 158 kD; 3) Ovalbumin, 44kD; 4) Myoglobin, 17.6 kD; 5) Poly-DL-alanine (1-5 kD); 6) Uracil, 120D. 订购信息Se

38、pax SRT-C SEC-150产品名称粒度孔径规格订货号SRT-C SEC-1505um150 Å21.5x600mm235150-21560SRT-C SEC-1505um150 Å21.5x300mm235150-21530SRT-C SEC-1505um150 Å7.5x600mm235150-7560SRT-C SEC-1505um150 Å7.8x300mm235150-7830SRT-C SEC-1505um150 Å7.8x150mm235150-7815SRT-C SEC-1505um150 Å7.8x50 (Gu

39、ard)235150-7805SRT-C SEC-1505um150 Å4.6x300mm235150-4630SRT-C SEC-1505um150 Å4.6x150mm235150-4615SRT-C SEC-1505um150 Å4.6x50 (Guard)235150-4605Sepax SRT- C SEC-300产品名称粒度孔径规格订货号 SRT-C SEC-3005um300 Å21.5x600mm235300-21560 SRT-C SEC-3005um300 Å21.5x300mm235300-21530 SRT-C SEC-

40、3005um300 Å7.5x600mm235300-7560 SRT-C SEC-3005um300 Å7.8x300mm235300-7830 SRT-C SEC-3005um300 Å7.8x150mm235300-7815 SRT-C SEC-3005um300 Å7.8x50 (Guard)235300-7805 SRT-C SEC-3005um300 Å4.6x300mm235300-4630 SRT-C SEC-3005um300 Å4.6x150mm235300-4615 SRT-C SEC-3005um300

41、97;4.6x50 (Guard)235300-4605Sepax SRT- C SEC-500产品名称粒度孔径规格订货号SRT-C SEC-5005um500 Å21.5x600mm235500-21560SRT-C SEC-5005um500 Å21.5x300mm235500-21530SRT-C SEC-5005um500 Å7.5x600mm235500-7560SRT-C SEC-5005um500 Å7.8x300mm235500-7830SRT-C SEC-5005um500 Å7.8x150mm235500-7815SRT-C

42、 SEC-5005um500 Å7.8x50 (Guard)235500-7805SRT-C SEC-5005um500 Å4.6x300mm235500-4630SRT-C SEC-5005um500 Å4.6x150mm235500-4615SRT-C SEC-5005um500 Å4.6x50 (Guard)235500-4605注：以上为常备规格订货信息，其它规格或特殊定制产品，电询。Zenix体积排阻色谱柱概述Zenix体积排阻色谱柱采用单分散、球形、表面键合了一层纳米厚度中性亲水性薄膜的3m硅胶作为填料。3m的粒径结合大的孔体积使其成为目前国

43、际上分辨率最高的体积排阻柱。赛分科技独有的表面键合技术保证了填料表面键合的最大化，使其具有高的化学稳定性及最小的非特异性吸附。Zenix系列体积排阻柱有100、150及300Å三种孔径选择，广泛的应用于生物分子及水溶性聚合物的分离与分析。优异的特性Ø 采用3m粒径填料Ø 具有最高的柱效及分辨率Ø 稳定的批间重现性Ø 高的蛋白回收率，且蛋白不易失活Ø 极低的非特异性吸附Ø 适用于常规生物样品的分离与制备，包括：蛋白、核酸、寡核苷酸、多肽和病毒等。Ø 适用于中性聚合物的分析与纯化，包括：多糖、合成聚合物、纳米材料等。图

44、1. Zenix SEC的蛋白分子量校正曲线色谱柱: 7.8x300 mm, 5 µm流动相: 150 mM phosphate buffer, pH 7.0流速: 1.0 mL/min检测: UV 214 nm进样体积: 10 µL样品: 1. Thyroglobulin, 670 kD; 2. g-Globulin, 158 kD; 3. BSA, 66 kD; 4. Ovalbumin, 44 kD; 5. Myoglobin, 17.6 kD; 6. Ribonuclease A, 13.7 kD; 7. B12, 1.35 kD; 8. Uracil, 120表1

45、. Zenix SEC色谱柱技术参数表固定相Zenix SEC-100 Zenix SEC-150 Zenix SEC-300材料表面键合亲水薄膜的硅胶表面键合亲水薄膜的硅胶表面键合亲水薄膜的硅胶颗粒大小3 mm3 mm3 mm孔径 (Å) 100 150 300蛋白分子量范围100 - 100,000500 - 150,0005,000 1,250,000水溶性聚合物分子量范围 500-10,000500-25,0001,000-100,000pH 稳定性2 8.5，短时可耐pH 8.5-9.52 8.5，短时可耐pH 8.5-9.52 8.5，短时可耐pH 8.5-9.5反压 (

46、for a 7.8x300 mm) 1,500 psi 1,500 psi 1,500 psi 最大耐受压力 (psi) 4,500 4,500 3,500盐浓度范围20 mM - 2.0 M20 mM - 2.0 M20 mM - 2.0 M最高使用温度 (oC) 80 80 80流动相的兼容性常规水相及有机相溶剂常规水相及有机相溶剂常规水相及有机相溶剂最高的分辨率图2. Zenix SEC-300和SRT SEC-300分离蛋白混合物A色谱柱: Zenix SEC-300和SRT SEC-300流动相: 150mM PBS, pH 7.0流速: 7.8x300 mm为1.0mL/min；4

47、.6x300 mm为0.35mL/min温度: 室温(23); 检测波长: 214nm进样量: 10L(4.6x300 mm为3L)样品: 1)甲状腺球蛋白(1.0mg/L), 670kD; 2)BSA二聚体, 132kD; 3) BSA(1.0mg/L), 66kD; 4)核糖核酸酶A(1.0mg/L), 13.7kD; 5)尿嘧啶(2.5 mg/mL), 120D.表2. Zenix SEC-150和Zenix SEC -300分离效率峰蛋白Zenix 300 (4.6x300) Zenix 300(7.8x300)SRT 300(7.8x300)1甲状腺球蛋白2180173011202B

48、SA二聚体4390460027203BSA102801309065904核糖核酸酶A1649022000111605尿嘧啶336403850027860开发小粒径填料的优势在于能实现更高的分离效率和分辨率。当粒径从5m降至3m时，柱效几乎为原先的两倍。如图2和表2所示：当填料粒径从5m降至3m时，BSA二聚体、BSA、核糖核酸酶A的塔板数分别从2720、6590、11160提高到4600、13090、22000。Fig.2 和Fig.3进一步表明3m Zenix柱在分离各种蛋白时能实现更高的分离效率。P-氨基苯甲酸使用30cm长的Zenix柱时能够达到40,000的塔板数。图3. Zenix

49、SEC-150和Zenix SEC-300(内径为7.8mm)分离蛋白混合物A色谱柱: Zenix SEC (7.8x300 mm, 3 µm)流动相: 150mM PBS, pH 7.0流速: 1.0mL/min反压 : Zenix 300为1,375 psi  Zenix 150为1,100psi温度: 室温( 23)检测波长: 214nm进样量: 10L样品: 1)甲状腺球蛋白(1.0mg/L), 670kD; 2)BSA二聚体, 132kD; 3) BSA(1.0mg/L), 66kD; 4)核糖核A (1.0mg/L), 13.7kD; 5)尿嘧啶(2.

50、5 mg/mL), 120D.表3. Zenix SEC-150和Zenix SEC -300分离效率(内径为7.8mm)峰蛋白Zenix 150Zenix 3001甲状腺球蛋白1805024602BSA二聚体242051103BSA5620130904核糖核酸酶嘧啶4200038500图4. Zenix SEC-150和Zenix SEC-300(内径为7.8mm)分离蛋白混合物B色谱柱: Zenix SEC (7.8x300 mm, 3 µm)流动相: 150mM PBS, pH 7.0流速: 1.0mL/min反压 : Zenix 300为1

51、,375 psi; Zenix 150为1,100psi温度: 室温( 23)检测波长: 214nm进样量: 10L样品: 1)甲状腺球蛋白, 670kD; 2) g-球蛋白,158kD; 3)卵清蛋白, 44kD; 4)核糖核酸酶A, 13.7kD; 5) p-氨基苯甲酸, 137D.表4. Zenix SEC-150和Zenix SEC -300分离效率(内径为7.8mm)峰蛋白Zenix 150Zenix 3001甲状腺球蛋白1285014502g-球蛋白286036503卵清蛋白6780117604核糖核酸酶-氨基苯甲酸4190039400高载样量载样量是衡量

52、体积排阻色谱柱性能的重要指标之一，下图表明Zenix系列分析色谱柱在BSA上样量高达500µg的情况下，仍保持着完美的分析峰形。图5. Zenix SEC-150 色谱柱对BSA载样量的测试图谱色谱柱: Zenix SEC-150 (3 µm, 7.8x300 mm)流动相: 150 mM PBS, pH 7.0流速: 1.0 mL/min进样量: 10 µL检测波长: UV214 nm图6. Zenix SEC-300 色谱柱对BSA载样量的测试图谱色谱柱: Zenix SEC-300 (3 µm, 7.8x300 mm)流动相: 150 mM PBS

53、, pH 7.0流速: 1.0 mL/min进样量: 10 µL检测波长: UV214 nm高稳定性赛分科技独有的表面修饰技术使得硅胶表面的键合密度达到最大化，从而阻止了能够促进键合相脱落的溶剂分子向薄膜内侧的扩散，保证了其在pH2-8.5范围的稳定使用。Zenix体积排阻柱适用于大多数水性及有机溶剂，包括：醋酸、磷酸、Tris缓冲盐体系、甲醇、乙醇、THF、DMF、DMSO等，同时可耐受高盐溶液，如2.0M的NaCl。流动相的兼容性Zenix SEC固定相能与大多水相缓冲液兼容，如醋酸铵、磷酸盐、Tris等。Zenix SEC固定相能够承受高浓度盐，如2.0M。同时Zenix SEC柱在有机溶剂中，如甲醇、乙醇、