质控菌种的管理指南

1、质控菌种的管理指南文件编号：版本：01发行部门：质量管理部 批准者：生效日期：年 月曰 失效日期：年 月曰第1页 共4页1 目的保证质控菌种合理、有效地采购、接收、运输、保存以及使用，保证实验室和 社会的生物安全。2 适用范围所有微生物菌种。3 职责?质量部、研发部根据参照国家相关法规要求进行管理?采购人员、仓储人员、生产操作人员、研发人员、检验人员、运输人员等对 本制度的实施负责?质量管理部负责列出特殊物料处理人员的名单、不定期抽查本制度的执行情 况4 专业术语的定义无5 程序5.1 采购?采购人员必须从中国菌种保藏中心或ATCC等正规渠道购买，能够用于溯源。?实验室常用菌株见附件?室内环境

2、质控溯源用的菌种由实验人员采集扩培并进行鉴定、保存。5.2 接收、贮存5.2.1 接收?化验室库房管理员接收菌种必须特别注意，轻拿轻放，按照采购申请单和送货单确认菌种的名称（中文名称、拉丁名称）、规格、批号、标签、密封情 况、外包装完好情况等（必要时需检查血清型）。必须有明显的识别标识， 有专门人员进行保管及发放。具体出入库管理执行OP-75-07储存与发货控制程序。质控菌种的管理指南文件编号：版本：01发行部门：质量管理部 批准者：生效日期：年 月曰 失效日期：年 月曰第2页 共4页522 贮存方法?平板4C保存法：此法只适合短期保存，可用于每周转种的质控参考菌株的 保存，方法是将要用的菌株

3、转种于相应的平板上，在平板背面标上转种日期 与相应菌名，放入保鲜盒内保存，1个月后高压处理。?甘油肉汤快速冷冻法：适用于一般细菌，可保持细菌13年的活性和生物学特性不变。方法是将对数生长期的细菌（分纯培养1824h）刮取放入含25%的试剂级的甘油肉汤中，放在80C低温冰箱，使菌悬液迅速冻结。?冷冻干燥法：适用于一般细菌，此法可长期保存细菌。方法是将细菌悬液与 赋形剂（如脱脂奶粉、甘露醇等）混合，用冻干机进行冷冻干燥成固态粉末 状态。置于-20 C以下冰冻保存。5.2.3 菌株分类?标准菌株：从国家菌种保藏中心购买的菌株，以干粉形式或冰冻保存，购回 后将之按顺序放于保存盒内（保存盒的编号为110

4、组成），在菌株保存记录表上进行登记，并附有各菌株的购买时间及代数。?室间质评分离株：实验室从洁净车间与实验室的室间质评活动中分纯的菌株，根据不同的菌株特性采取合适的保存法，放置于室间质评分离菌专用的 保存盒（保存盒的编号为1120组成），并在菌株保存记录表上进行登 记。5.3 发放?必须凭部门负责人（化验室主任、研发实验室主任）审核签字的领料单发料， 执行OP-75-07储存与发货控制程序发料时必须告知领料人员注意事项， 防止冻伤、菌种泄露等。5.4 使用5.4.1 冻干菌株?由一20T冰箱取出干粉，从中挑出少许放入 100此肉汤中，静置5min，待 其完全溶解后混匀，再接种至相应培养基平板。

5、5.4.2 甘油菌株?由-80C冰箱取出冷冻菌，从中挑出少许在相应培养基平板上划线接种。每个月应取2支甘油菌进行菌种有效性质控。质控菌种的管理指南文件编号：版本：01发行部门：质量管理部 批准者：生效日期：年 月曰 失效日期：年 月曰第3页 共4页543 对于非苛养菌株的使用是每月的第1周从冰箱中取出（每种菌株）1支，用接种 环取1环菌转种至相应的培养基平板复苏后使用。生长有菌落的培养基平板标 上日期和菌株编号，放入保鲜盒内于 48°C冰箱保存，使用时从保鲜盒内的平 板中转种菌株做培养基灵敏度、鉴定药敏等质控，1个月后高压灭菌丢弃。对于 苛养菌株的使用是每周一从冰箱中取出（每种菌株）

6、1支，无须解冻，直接用接种环取菌后于相应培养基平板上直接划线接种复苏后伎用，1周后高压灭菌丢弃。以上行为均应在在 菌株保存和复苏记录表 上记录。苛养菌株取出转种 后的离心管应立即放回-80C冰箱保存，非苛养菌株的离心管放入 48C冰箱 保存（可供转种菌株不能存活时重转，注意药敏试验质控菌株不要反复冻溶）。5.5 菌株使用、保存的注意事项?取菌种时，必须特别注意，戴手套、穿工作衣、防止微生物的对工作服工作 鞋以及人员的污染危害、接触危害、吸入危害、冻伤危害等。?运输微生物的时候，必须考虑到微生物可能对运输的容器、包装、车辆、人 员等的潜在危害。使用必要的密封或者低温措施，以尽可能降低微生物带来

7、的风险。?不能用含有可发酵糖的培养基保存菌株；不可从选择性培养基或从药敏试验 平板培养基上留取菌株；不可从干枯培养基上取菌保存。菌株保存容器需密 圭寸、安全；温度变化敏感的细菌，如淋病奈瑟菌和脑膜炎奈瑟菌，可用快速 冷冻法长期保存。不可连同培养基直接贮存于冰箱作短期保存；作为抗菌药 物敏感试验质控用的参考菌株，由保存状态取出后，不能连续使用1周以上， 应定期传代，但一般不超过6次；非干粉保存的菌株注意定时转种。5.6 菌株的销毁?销毁保存菌株须经科主任批准，并在菌株销毁登记表上写明销毁原因与方式 等。?用于室内质控的保存菌种传代或移种后， 销毁原菌种之前应仔细检查新旧菌 的标签是否正确。?菌种

8、销毁时，应放置灭菌指示标志，以确认灭菌效果，必要时进行灭菌效果 验证，如炭疽杆菌、肉毒梭状芽胞杆菌和破伤风梭状芽胞杆菌等有较强抵抗 力和强致病性的芽胞菌株，应对其进行间歇性灭菌。杀死全部芽胞的方法是质控菌种的管理指南文件编号：版本：01发行部门：质量管理部 批准者：生效日期：年 月曰 失效日期：年 月曰第4页 共4页将第1次高压灭菌处理物品放37C孵箱培养，使芽胞繁育成繁殖体，再进行 第2次高压灭菌处理。5.7 菌株的管理?菌种应经严格鉴定合格后方可入库，菌种保存冰箱需上锁，实行双人共管， 由化验室主任和主任指派的人员共同保管，并定期进行全面检查，对进出库 的菌种必须清点与登记，不可有差错；质

9、控菌株的每年分装工作由菌株保管 人完成，防止在传代过程中污染。所有需保存的菌株在菌株保存记录表中记录，并输入电脑以电子版形式存档，以便查找。?在菌种的保存盒上应有明显的标签， 且标签应耐水与耐低温，不可因字迹模 糊而导致菌种的错误。保存菌株进出库需在菌株出入库记录表 中登记。?质控菌株每次出库转种均在菌株保存和复苏记录表中进行记录，质控频 率为每日1次的质控菌株可从复苏菌株中每天传代使用。 非保管人员不得从 菌株库中存取菌株。?未经科主任批准，任何人不得以任何理由将菌株带出微生物实验室。?需外送转运的菌株经化验室主任批准后，填写菌株转运记录表备案。?质控菌株与室间质评分菌株在每年分装时的复苏保存情况，要在菌株保存和复苏记录表中进行记录。?菌种销毁需经化验室主任批准，并在 菌株销毁登记表中登记。6 相关参考文件? OP-75-