水质微生物检测基础

1、整理ppt微生物基础知识微生物基础知识培训培训宁波安联检测有限公司整理ppt微生物的定义微生物的定义 微生物微生物（microorganism, microbe）:存在于自然界存在于自然界中的一群体型细小、结构简单、肉眼看不见，必须中的一群体型细小、结构简单、肉眼看不见，必须借助于特殊仪器放大后才能观察到的微小生物借助于特殊仪器放大后才能观察到的微小生物按其结构、化学组成及生活习性可分为按其结构、化学组成及生活习性可分为: :原核类:仅有原始核质，无核仁或核膜，细胞器很不完善。如细菌、仅有原始核质，无核仁或核膜，细胞器很不完善。如细菌、放线菌、支原体、立克次氏体、衣原体、螺旋体放线菌、支原体、

2、立克次氏体、衣原体、螺旋体 真核类:细胞核的分化程度较高，有核膜、核仁和染色体，细胞器完细胞核的分化程度较高，有核膜、核仁和染色体，细胞器完整。如真菌（酵母菌和霉菌）、整。如真菌（酵母菌和霉菌）、 原生动物、藻类原生动物、藻类非细胞类:体积微小，能通过除菌过滤器。如病毒和朊病毒等体积微小，能通过除菌过滤器。如病毒和朊病毒等按其致病性可分为按其致病性可分为: :病原性微生物非病原性微生物整理ppt微生物的特点微生物的特点个体小个体小,面积大：面积大：小于小于0.1mm。肉眼不可见。肉眼不可见。分布广分布广, ,种类多（种类多（10万多种）万多种） ：自然界中到处都：自然界中到处都有，如水、空气、

3、土壤等有，如水、空气、土壤等, , 土壤中的数量最多。土壤中的数量最多。代谢强，转化快：代谢强，转化快：发酵乳糖的细菌在发酵乳糖的细菌在1小时内可小时内可分解其自重分解其自重100010000倍的乳糖；产朊假丝酵母倍的乳糖；产朊假丝酵母合成蛋白质的能力比食用公牛强合成蛋白质的能力比食用公牛强10万倍万倍生长旺，繁殖快：生长旺，繁殖快：微生物有惊人的繁殖速度，大微生物有惊人的繁殖速度，大多数微生物几十分钟内就可以繁殖一代多数微生物几十分钟内就可以繁殖一代适应性强，易变异适应性强，易变异（耐药性产生的原因）（耐药性产生的原因）整理ppt葡萄球菌葡萄球菌 整理ppt菌落单位菌落单位菌落单位菌落单位-

4、CFU 由单个菌细胞或几个同种菌细胞在培养基上长成肉由单个菌细胞或几个同种菌细胞在培养基上长成肉眼可见的菌落，每个菌落就是眼可见的菌落，每个菌落就是1CFU光滑型菌落光滑型菌落粗糙型菌落粗糙型菌落整理ppt微生物的分布微生物的分布土壤：土壤：是微生物生活的最适环境是微生物生活的最适环境水：水：仅次于土壤的微生物分布、定居的第二场所仅次于土壤的微生物分布、定居的第二场所空气空气：空气中的微生物主要来源于带有微生物菌体及孢子空气中的微生物主要来源于带有微生物菌体及孢子的灰尘，这类微生物大多数是腐生性的，还来源于人和动的灰尘，这类微生物大多数是腐生性的，还来源于人和动物，它们大多数是通过呼吸道排出的

5、，其中也包含有病原物，它们大多数是通过呼吸道排出的，其中也包含有病原微生物，悬浮在大气中。微生物，悬浮在大气中。 整理ppt微生物的类群和形态结构微生物的类群和形态结构 一、细菌一、细菌 细菌是一类细胞细而短、结构简单、细胞壁坚韧，以二分裂方式无性细菌是一类细胞细而短、结构简单、细胞壁坚韧，以二分裂方式无性繁殖的原核微生物，分布广泛。繁殖的原核微生物，分布广泛。细菌的形态与结构细菌的形态与结构 （1） 球菌球菌 多数球菌直径在多数球菌直径在1微米左右，外观呈球形微米左右，外观呈球形或近似球形。由于繁殖时分裂平面不同可形成不同的排或近似球形。由于繁殖时分裂平面不同可形成不同的排列方式，分为双球菌

6、、链球菌、葡萄球菌等。列方式，分为双球菌、链球菌、葡萄球菌等。 （2） 杆菌杆菌 形态多数呈直杆状，也有的菌体稍弯，多形态多数呈直杆状，也有的菌体稍弯，多数呈分散存在，也有的呈链状排列，分为棒状杆菌、链数呈分散存在，也有的呈链状排列，分为棒状杆菌、链状杆菌、球杆菌等。状杆菌、球杆菌等。 （3） 螺形菌螺形菌 菌体弯曲，呈弧形或螺旋形。如幽门螺菌体弯曲，呈弧形或螺旋形。如幽门螺杆菌。杆菌。 细菌虽小，仍具有一定的细胞结构和功能。细胞壁、细胞细菌虽小，仍具有一定的细胞结构和功能。细胞壁、细胞膜、细胞质和核质等各种细菌都有，是细菌的基本结构。膜、细胞质和核质等各种细菌都有，是细菌的基本结构。整理pp

7、t球菌球菌(coccus)脑膜炎奈瑟菌脑膜炎奈瑟菌肺炎链球菌肺炎链球菌整理ppt杆菌杆菌(bacillus)不同杆菌的大小、长短、粗细很不一致。不同杆菌的大小、长短、粗细很不一致。炭疽芽胞杆菌炭疽芽胞杆菌 3-10 m3-10 m大大中中大肠埃希菌大肠埃希菌 2-3 m2-3 m小小布鲁菌布鲁菌 0.6-1.5 m0.6-1.5 m整理ppt细菌的繁殖细菌的繁殖 细菌生长速度很快，一般约细菌生长速度很快，一般约20min分裂一次。若按此速度分裂一次。若按此速度计算，细菌群体将庞大到难以想象的程度。但事实上由于计算，细菌群体将庞大到难以想象的程度。但事实上由于细菌繁殖中营养物质的逐渐消耗，有害代

8、谢产物的逐渐积细菌繁殖中营养物质的逐渐消耗，有害代谢产物的逐渐积累，细菌不可能始终保持高速度的无限繁殖。经过一段时累，细菌不可能始终保持高速度的无限繁殖。经过一段时间后，细菌繁殖速度逐渐减慢，死亡菌数增多，活菌增长间后，细菌繁殖速度逐渐减慢，死亡菌数增多，活菌增长率随之下降并趋于停滞。率随之下降并趋于停滞。整理ppt热原与内毒素热原与内毒素许多细菌、病毒和真菌（如酵母菌）都能产生热许多细菌、病毒和真菌（如酵母菌）都能产生热原。原。热原是微量即可引起恒温动物体温异常升高热原是微量即可引起恒温动物体温异常升高的物质的总称。的物质的总称。主要物质为细菌内毒素、胞壁酰主要物质为细菌内毒素、胞壁酰二肽及

9、其他抗原抗体复合物、半抗体原物质和某二肽及其他抗原抗体复合物、半抗体原物质和某些药物（类固醇）等。些药物（类固醇）等。1、细菌内毒素一般指革兰阴性细菌细胞壁的结构成分，主、细菌内毒素一般指革兰阴性细菌细胞壁的结构成分，主要是脂多糖。要是脂多糖。 2、细菌内毒素生物学活性可分为两类：一是致病作用，一、细菌内毒素生物学活性可分为两类：一是致病作用，一是保护性反应。是保护性反应。3、其他理化特性、其他理化特性耐热性：耐热性：120加热加热4h，可破坏，可破坏98%。180加热加热2h或或250加热加热30min，才可彻底破坏。，才可彻底破坏。滤过滤过性：其体积小，约在性：其体积小，约在15nm之间，

10、故能通过滤器进入滤液之间，故能通过滤器进入滤液中。中。具有水溶性及不挥发性。具有水溶性及不挥发性。能被强酸、强碱和氧化能被强酸、强碱和氧化剂破坏剂破坏整理ppt消毒与灭菌消毒与灭菌下列术语常用于表示物理或化学方法对微生物的杀灭程度下列术语常用于表示物理或化学方法对微生物的杀灭程度 消毒：消毒：杀死物体上病源微生物的方法杀死物体上病源微生物的方法,并不一定能杀死细并不一定能杀死细菌的芽胞。消毒所用的试剂称为消毒剂。菌的芽胞。消毒所用的试剂称为消毒剂。灭菌：灭菌：杀灭物体上所有微生物的方法。灭菌比消毒要求高，杀灭物体上所有微生物的方法。灭菌比消毒要求高，包括杀灭细菌芽孢在内的全部病原微生物和非病原

11、微生物。包括杀灭细菌芽孢在内的全部病原微生物和非病原微生物。抑菌：抑菌：抑制体内或体外细菌的生长繁殖。常用的抑菌剂为抑制体内或体外细菌的生长繁殖。常用的抑菌剂为各种抗生素，可抑制细菌的繁殖。各种抗生素，可抑制细菌的繁殖。防腐：防腐：防止或抑制体外细菌生长繁殖的方法，细菌一般不防止或抑制体外细菌生长繁殖的方法，细菌一般不死亡。同一种化学药品在高浓度时为消毒剂，低浓度时常死亡。同一种化学药品在高浓度时为消毒剂，低浓度时常为防腐剂。为防腐剂。无菌：无菌：不存在活的细菌。防止细菌进入人体或其他物品的不存在活的细菌。防止细菌进入人体或其他物品的操作技术，为无菌操作。操作技术，为无菌操作。整理ppt消毒与

12、灭菌消毒与灭菌l辐射灭菌法辐射灭菌法 1、紫外线紫外线：波长波长200-300nm的紫外线具有杀的紫外线具有杀 菌作用。穿透物质的能力很差，一般要求紫外灯菌作用。穿透物质的能力很差，一般要求紫外灯距离照射物不超过距离照射物不超过1.0米为宜米为宜 2、电离辐射、电离辐射 高速电子、高速电子、X射线、射线、射线射线 3、微波、微波 波长波长1mm1ml热力灭菌法：使蛋白质、酶及核酸永久性破环，细胞膜溶使蛋白质、酶及核酸永久性破环，细胞膜溶解，导致细胞发生不可逆转的死亡。解，导致细胞发生不可逆转的死亡。1、干热灭菌法干热灭菌法采用灼烧或干热空气灭菌采用灼烧或干热空气灭菌 ，使用方便，使用方便，适用

13、于玻璃器皿和瓷器等耐高温的固体物的灭菌适用于玻璃器皿和瓷器等耐高温的固体物的灭菌 。2、湿热灭菌法湿热灭菌法利用热蒸汽杀死微生物。利用热蒸汽杀死微生物。 高压蒸汽灭菌：利用高温高压蒸汽进行灭菌的方高压蒸汽灭菌：利用高温高压蒸汽进行灭菌的方法法 ，蒸汽的穿透力较热空气强可以杀死一切微生，蒸汽的穿透力较热空气强可以杀死一切微生物，包括细菌的芽孢，真菌的孢子或休眠体等耐物，包括细菌的芽孢，真菌的孢子或休眠体等耐高温的个体高温的个体 。最可靠最适用最广泛的灭菌方法。最可靠最适用最广泛的灭菌方法。整理ppt水质微生物水质微生物 采样采样自来水：自来水：现将自来水龙头用火焰烧灼3min，灭菌；再打开水龙头

14、防水5min（常用的水龙头可以 防水23min）；采样水置于无菌锥形瓶中，采样总量占锥形瓶的80%左右，以便摇匀。水源水：水源水：选取可疑及有代表性的水域，一般距离水面1015cm采样；河道水采样时，将瓶口朝向、水流方向，在指定位置打开瓶盖。采样结束后，样品冷藏运输，尽快检测。整理ppt样品处理、实验准备、实验步骤及报告详见作业指导书整理ppt整理ppt革兰氏染色法革兰氏染色法 革兰染色法是丹麦内科医生革兰染色法是丹麦内科医生 Christain GramChristain Gram于于18841884年创立的一种细菌年创立的一种细菌复染色复染色方法，已有方法，已有130130多多年的历史，仍

15、在广泛使用。年的历史，仍在广泛使用。整理ppt结晶紫结晶紫卢戈碘液液卢戈碘液液95%乙醇乙醇复红复红G-菌：菌：类脂质类脂质肽聚糖肽聚糖G+菌：菌：肽聚糖肽聚糖交联度大交联度大类脂质类脂质通透性学说通透性学说、等电学说、化学学说整理pptv鉴别细菌：把细菌分成鉴别细菌：把细菌分成G G+ +和和G G- -两大类。两大类。v选择抗菌药物：例如选择抗菌药物：例如G G+ +球菌球菌对青霉素敏感对青霉素敏感, ,G G- -杆菌杆菌耐药。耐药。v了解细菌的致病机理：了解细菌的致病机理：G G+ +菌大多产生外毒素菌大多产生外毒素,G,G- -菌菌产生内毒素。产生内毒素。革兰染色的步骤革兰染色的步骤 涂片涂片 干燥干燥 固定固定 染色染色紫碘酒红，分分半半紫碘酒红，分分半半意义整理ppt灭菌接种环灭菌接种环无无菌菌操操作作 细菌合适 细菌较多接种环取盐接种环取盐水水3ul3ul2 2滴滴, ,水滴间距小于水滴间距小于2cm2cm。 取 菌 苔 少 许取 菌 苔 少 许（1mm1mm小菌落半个）小菌落半个）与盐水混匀，涂成与盐水混匀，涂成大于大于1cm1cm2 2均匀涂膜均匀涂膜。涂毕涂毕环移至涂膜中环移至涂膜中