α－萘异硫氰酸酯诱导大鼠肝损伤机理及中药的保护作用

1、萘异硫氰酸酯诱导大鼠肝损伤机理及中药的保护作用         06-11-15 15:32:00     编辑：studa20     作者;周文柱，孙立，苏伯固，冯秉安【摘要】  目的  拟通过对萘异硫氰酸酯(ANIT)诱导大鼠肝损伤发病机理的探讨，对引起肝损伤的因素进行系统的研究。方法  选择S-D大鼠，雄性，随机分4组，检测数据以平均值±标准差表示，采用方差分析，相关分析进行统计学处理。结

2、果  -大鼠经ANIT染毒后，病理切片显示肝损伤明显，汇管区有大量中性粒细胞浸润。经金石散及地塞米松治疗后，生化指标均有所下降，中药金石散优于地塞米松，血生化指标与PLA2活性相关分析显示，呈正相关。结论   ANIT诱导的肝毒性损伤程度与肝组织匀浆PLA2活力呈正相关，应用抑制剂降低PLA2活力，肝损伤程度也减轻，中药金石散具有降低PLA2活性，减轻肝毒性损伤。        【关键词】  ANIT；   肝损伤；   磷脂酶A2；  金石散&

3、#160;       A study of ANIT-induced liver injury in rats and the protective effect of herb               【Abstract】  Objective  To search the factors of liver injury via the ANIT-induced liver in

4、jury in rats.Methods  Male Sprague-Dawley rats，were divided into 4 groups，data were analyzed using a completely randmized factorial ANOVA and linear correlation.Results  After ANIT intoxication，the necrosis of hepatic cell and neutrophil infiltration im periportal region of the liver were

5、observed in liver setions.Jinshisan can reduce the ALT，the TBIL.PLA2 correlated positively with ALT、AKP and TBIL.Conclusion  The severity of ANIT-induced liver injury correlated positively with the PLA2.Jinshisan can protect against the rat ANIT-induced liver injury.     

6、60;  【Key words】  ANIT；  liver injury；  PLA2；  Jin shi san         肝毒性损伤在临床工作中经常会遇到，是肝硬化、门脉高压等严重危害人民健康疾病的基础性病变。本实验以大鼠为研究对象，探讨萘异硫氰酸酯(ANIT)诱导肝毒性损伤的机理，观察大鼠血清ALP、AKP、TBIL的变化，以及肝组织匀浆PLA2活性与上述生化指标之间的关系。同时研究中药金石散在ANIT诱导肝毒性损伤中有何作用。   

7、60;   1  材料与方法         1.1  实验动物   采用雄性S-D大鼠，体重200250g（大连医科大学动物实验中心提供）。        1.2  主要试剂和仪器   ANIT(北京通县育才精细化工厂)；    卵磷脂（上海沪通研究所）；    地塞米松（天津药业有限公司）；   

8、; 金石散（大连医科大学附属二院中药制剂室）；    721分光光度计（上海第三分析仪器厂）；数字显示酸度计（PXJ-IB型）（郑州电子仪器厂）。        1.3  实验方法          动物分组  采用雄性S-D大鼠72只，体重200250g，普通饲养，随机分成组，每组18只，分别为：(1)空白组，(2)模型组，(3)金石散治疗组，(4)地塞米松治疗组。首先，用香油配制ANIT溶液，浓度为20mg/ml

9、，按100mg/kg体重，（2）、（3）、（4）组一次性灌胃染毒。2天后，每组断颈处死大鼠6只，进行各项检查。余下的大鼠处理如下：（1）、（2）组予以灌注生理盐水，1.0ml/100g体重/d，分2次灌胃。（3）组予以金石散20mg/100g体重/1.0mlNS/d，分2次灌胃。（4）组予以地塞米松0.05mg/100g体重/1.0mlNS/d，分两次灌胃。于4天后、6天后分批断颈处死大鼠，留血清检测肝功能生化指标，取肝脏做组织匀浆检测PLA2活性及光镜检查。          肝功能的血清生化指标测定  

10、; 血清丙氨酸氨基转移酶赖氏比色法； 血清碱性磷酸酶磷酸苯二钠法； 血清总胆红素-甲醇法。          PLA2的测定   采用改进的微量测定法进行。          肝组织的光镜检查  光镜：取新鲜肝组织，切成0.5cm厚的小块，置10%甲醛固定液中，常规石蜡包埋切片，HE染色。        1.4  统计学方法  每组数据均以平均值&

11、#177;标准差表示。用方差分析和相关分析进行统计学处理，以P<0.05为显著性判定标准。        2  实验结果        2.1  实验大鼠血清生化指标的变化          血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）  S-D大鼠经ANIT染毒后2天，ALT迅速升高，是空白组的5.39倍(P<0.01)，天后，ALT已开始下降但仍是空白组的3.77倍(P<

12、;0.01)，而金石散、地塞米松治疗组ALT下降更加迅速，与模型组比较差异有显著性(P<0.01)，天后，模型组与地塞米松组差异已无显著性，而模型组与空白组差异有显著性(P<0.01)，模型组与金石散组差异仍有显著性(P<0.01)，但有所接近。见表。表1  大鼠血清ALT活性  （U/L，x±s）注：n=6，与模型组比较，*P0.05，*P0.01    血清碱性磷酸酶(AKP)    大鼠染毒2 天后，AKP增加与ALT 相似，是空白组的3.2倍(P<0.01)。天后已趋下降，但模型组与各组比较差异有显著性(P<0.01)。天后，已恢复正常，差异无显著性(P>0.05)。见表。表2  大鼠血清AKP  (U/L，x±s) 注：n=6，与模型组比较，*P0.01