喹噁啉类药物残留分析技术——净化方法（一）

1、喹噁啉类药物残留分析技术净化方法（一） (2)净化办法 喹噁啉类药物残留分析主要采纳的净化办法有液液分配(llp) 和固相萃取(spe) 办法。llp 所需时光较长，而喹噁啉类药物不稳定，净化过程不易太长，所以目前最常用的办法是spe技术。 1)液液分配(liquid liquid partition，llp) 本类药物原形及其脱氧代谢物，挺直用有机溶剂提取后，利用药物极性，采纳溶剂对llp净化。huang等测定鸡血液、肌肉、肝脏、肾脏和脂肪中cyx及其代谢物bdcyx，提取液蒸干后，用-llp脱脂，乙腈层再净化后用hplc测定。cyx和bdcyx的loq为0.025g/g(血浆和组织)，办法

2、回收率在73%87%之间，日间rsd小于9.86%。zhang等提取羊组织中cyx及其代谢物bdcyx。肌肉、肝脏、肾脏用提取，脂肪组织用乙腈提取，提取上清液蒸干，用乙腈-正已烷llp净化，取乙腈层蒸干用甲醇复溶后hplc测定，cyx回收率为65%79%，日间cv为6.7%11.1%；bdcyx回收率为70%92%，日间cv为4.7%15.9%；lod为15g/kg，loq为25g/kg。qca和mqca与组织结合，需要解离后提取，而解离办法打算了后续的净化步骤；另外，qca和mqca呈酸性，在酸性溶液中以分子状态存在，在碱性溶液中以离子态存在，这成为开发llp办法的基础。 碱性水解后的净化过

3、程往往涉及多次llp， 较为复杂。hutchinson等分析猪肝中的qca，碱性水解液用浓盐酸中和后，用乙酸乙酯提取，提取液用0.1mol/l(ph8.0)llp反萃取，经scx spe柱净化后，吹去-甲醇洗脱液中的甲醇，用盐酸中和，再与乙酸乙酯llp净化，乙酸乙酯层吹干复溶后，用lc-ms/ms测定。办法回收率为89%111%，cv为0.15%10%，cca 和cc分离为0.16 g/kg和0.27 g/kg。huang等测定鸡组织中cyx的代谢物qca残留，样品经碱性水解，水解液用浓盐酸调整ph 1后，用乙酸乙酯提取，提取液再与0.5 mol/l缓冲液(ph8) llp反萃取，进一步用离子

4、排阻色谱柱净化，甲醇-水洗脱液用盐酸酸化后，再与氯仿llp，蒸干氯仿层，用流淌相溶解后，hplc分析。鸡组织中qca的loq为0.025 mg/kg(内脏组织)和0.02 mg/kg(肌肉)，回收率为70%78%，cv为7.69%11.43%。用同样的办法，huang等提取和净化猪和鸡组织中qct的代谢物mqca，样品的碱性水解液用浓盐酸调整ph 1后，用乙酸乙酯提取，提取液再与水llp，弃去水相，乙酸乙酯层再用0.5 mol/l柠檬酸缓冲液(ph8)反萃取，反萃取液经离子排阻色谱净化后hplc测定，loq为0.05 mg/kg，lod为0.025 mg/kg，回收率为74%84%，cv为4.

5、5%10.8%。 酸性水解提取液在多数状况下挺直经llp转移至有机溶剂中，再进一步处理。della等采纳偏磷酸-甲醇-水(2+20+78，v/v)水解猪肝脏中qca，水解液用乙酸乙酯提取，乙酸乙酯提取液再用0.1mol/l磷酸盐缓冲液(ph7)llp反萃取，水相再经spe净化后，gc-ms测定。办法回收率为90%102%，cv为1.7%8.4%，cca和cc分离为32g/kg和34g/kg，lod为0.2g/kg，loq为0.7g/kg。 wu等采纳5%偏磷酸-10%甲醇溶液水解提取猪肝脏中的qca和mqca，水解液用乙酸乙酯提取，乙酸乙酯用0.01mol/l缓冲液(用磷酸调整ph7.0)ll

6、p反萃取，磷酸盐缓冲液再用正己烷llp脱脂，脱脂后磷酸盐缓冲液经spe净化后测定。回收率为70%110%，cv小于20%。试验发觉，磷酸二氢钾缓冲液浓度从0.011.0mol/l(用磷酸调整ph7.0)均能达到惬意回收率，但是0.01mol/l浓度萃取后杂质含量最少。sniegocki等测定猪肉中cbx代谢物(脱氧卡巴氧、qca)和olq代谢物(mqca)。样品用含偏磷酸的甲醇水解后，再用乙酸乙酯-二氯甲烷(50+50，v/v)llp净化提取，蒸干提取物后用含0.5%异丙醇的1%乙酸溶解，lc-msms测定。cca为1.042.11ug/kg，cc为1.462.89g/kg，回收率在99.8%

7、101.2%之间。 酶解普通在弱碱性条件下举行，酶解液往往加入酸性溶液提取并脱蛋白，酸性提取液经llp转入有机溶剂中，然后再进一步处理。hutchinson等测定猪肝中mqca和qca残留，蛋白酶解液放置室温后加入1ml浓盐酸酸化提取，提取液与乙酸乙酯llp，乙酸乙酯萃取液再用0.1mol/l磷酸钠缓冲液(ph8.0)llp反萃取，进一步spe净化后，lc-ms/ms测定qca的cc。和cc分离为0.4g/kg和1.2ug/kg，mqca分离为0.7g/kg和3.6g/kg。刘正才等(4用蛋白酶酶解鱼、虾、猪肉、鸡肉、牛肉、猪肝中olq代谢残留标识物mqca。酶解液冷至常温后，加入0.3mol/lhci溶液