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文档简介

1、实验五实验五 激素对血糖浓度的影响激素对血糖浓度的影响及血糖浓度的测定及血糖浓度的测定v 血糖是指血液中糖,由于正常人血液中糖主要是葡血糖是指血液中糖,由于正常人血液中糖主要是葡萄糖,所以普通以为,血糖是指血液中的葡萄糖。萄糖,所以普通以为,血糖是指血液中的葡萄糖。正常人空腹血糖浓度为正常人空腹血糖浓度为4.44.46.7mmol/L6.7mmol/L8080120mg/100ml120mg/100ml。v血糖是糖在体内的运输方式。全身各组织都从血液血糖是糖在体内的运输方式。全身各组织都从血液中摄取葡萄糖以氧化供能,特别是脑、肾、红细胞、中摄取葡萄糖以氧化供能,特别是脑、肾、红细胞、视网膜等组

2、织合成糖原才干极低,几乎没有糖原储视网膜等组织合成糖原才干极低,几乎没有糖原储存,必需不断由血液供应葡萄糖。当血糖下降到一存,必需不断由血液供应葡萄糖。当血糖下降到一定程度时,就会严重妨碍脑等组织的能量代射,从定程度时,就会严重妨碍脑等组织的能量代射,从而影响它们的功能。所以维持血糖浓度的相对恒定而影响它们的功能。所以维持血糖浓度的相对恒定有着重要的临床意义。有着重要的临床意义。血糖浓度的调理血糖浓度的调理v血糖浓度能维持相对恒定是由于机体内存在血糖浓度能维持相对恒定是由于机体内存在一整套高效率的调理机制,精细地控制着血一整套高效率的调理机制,精细地控制着血糖的来源与去路,使之到达动态平衡。糖

3、的来源与去路,使之到达动态平衡。神经系统的调理作用神经系统的调理作用 神经系统对血糖浓度的调理作用主要经过神经系统对血糖浓度的调理作用主要经过下丘脑和自主神经系统对所控制激素的分泌,下丘脑和自主神经系统对所控制激素的分泌,后者再经过影响血糖来源与去路关键酶的活后者再经过影响血糖来源与去路关键酶的活性来实现。神经系统的调理最终经过细胞程性来实现。神经系统的调理最终经过细胞程度的调理来到达目的。度的调理来到达目的。激素激素v使血糖浓度降低的激素使血糖浓度降低的激素 胰岛素胰岛素v使血糖浓度升高的激素使血糖浓度升高的激素 胰高血糖素、肾上腺素、肾上胰高血糖素、肾上腺素、肾上腺皮质激素、生长素、甲状腺

4、素腺皮质激素、生长素、甲状腺素v它们对血糖的调理主要是经过对糖代谢各主要途径的影响来它们对血糖的调理主要是经过对糖代谢各主要途径的影响来实现的。实现的。v在激素发扬调理血糖浓度的作用中,最重要的是胰岛素和胰在激素发扬调理血糖浓度的作用中,最重要的是胰岛素和胰高血糖素。肾上腺素在应激时发扬作用,而肾上腺皮质激素、高血糖素。肾上腺素在应激时发扬作用,而肾上腺皮质激素、生长激素、甲状腺素等都可影响血糖程度,但在生理性调理生长激素、甲状腺素等都可影响血糖程度,但在生理性调理中仅居次要位置。中仅居次要位置。胰岛素胰岛素v使肌肉和脂肪组织细胞膜对葡萄糖的通透性添加,使肌肉和脂肪组织细胞膜对葡萄糖的通透性添

5、加,利于血糖进入这些组织进展代谢。利于血糖进入这些组织进展代谢。v诱导葡萄糖激酶、磷酸果糖激酶和丙酮酸激酶的诱导葡萄糖激酶、磷酸果糖激酶和丙酮酸激酶的合成,加速细胞内葡萄糖的分解利用。合成,加速细胞内葡萄糖的分解利用。v经过使细胞内经过使细胞内cAMPcAMP含量减少,激活糖原合成酶和含量减少,激活糖原合成酶和丙酮酸脱氢酶系,抑制磷酸化酶和糖异生关键酶丙酮酸脱氢酶系,抑制磷酸化酶和糖异生关键酶等,使糖原合成添加,糖的氧化利用、糖转变为等,使糖原合成添加,糖的氧化利用、糖转变为脂肪的反响添加,血糖去路增快;使糖原分解和脂肪的反响添加,血糖去路增快;使糖原分解和糖异生减少或受抑制,使血糖来源减少,

6、最终使糖异生减少或受抑制,使血糖来源减少,最终使血糖浓度降低。血糖浓度降低。 胰高血糖素 主要经过提高靶细胞内cAMP含量到达调理血糖浓度的目的。细胞内的cAMP可激活依赖cAMP的蛋白激酶,后者经过酶蛋白的共价修饰改动细胞内酶的活性,即激活糖原分解和糖异生的关键酶,抑制糖原合成和糖氧化的关键酶,使血糖升高。 肾上腺素 经过cAMP激活肝中糖原磷酸化酶使糖原分解,还有诱导肝中磷酸烯醇式丙酮酸激酶及果糖二磷酸酶的合成促进糖异生作用,使氨基酸转化成葡萄糖,从而使血糖上升。 激素对血糖浓度的影响激素对血糖浓度的影响 -邻甲苯胺法测血糖邻甲苯胺法测血糖目的及要求:目的及要求:掌握邻甲苯胺测血糖的原理和

7、方法掌握邻甲苯胺测血糖的原理和方法掌握血糖的正常范围和意义掌握血糖的正常范围和意义掌握胰岛素和肾上腺素对血糖浓度的影响及掌握胰岛素和肾上腺素对血糖浓度的影响及作用机制作用机制 根本原理根本原理葡萄糖在有机酸溶液中能与某些芳香葡萄糖在有机酸溶液中能与某些芳香胺类化合物如苯胺、联苯胺、邻甲胺类化合物如苯胺、联苯胺、邻甲苯胺等起缩合反响,生成希夫氏苯胺等起缩合反响,生成希夫氏Schiff)碱式有色衍生物,再经过碱式有色衍生物,再经过分光光度计比色测定得到葡萄糖浓分光光度计比色测定得到葡萄糖浓度。度。本实验用的是邻甲苯胺法。本实验用的是邻甲苯胺法。邻甲苯胺不与非糖复原性物质显色,邻甲苯胺不与非糖复原性

8、物质显色,而与已醛糖显色。葡萄糖的醛基在而与已醛糖显色。葡萄糖的醛基在热醋酸溶液中与邻甲苯胺的氨基相热醋酸溶液中与邻甲苯胺的氨基相互缩合成兰绿色的希夫氏碱,该兰互缩合成兰绿色的希夫氏碱,该兰绿色在一定范围内与葡萄糖浓度成绿色在一定范围内与葡萄糖浓度成正比。此法测得正常人的空腹血糖正比。此法测得正常人的空腹血糖值为值为70-100mg/dl,兔约为兔约为130mg/dl左右。左右。操作操作1.1.取预先饥饿取预先饥饿14-1614-16小时的正常家兔小时的正常家兔2 2只,只,称重。称重。2.2.从耳缘静脉采血:剪毛从耳缘静脉采血:剪毛二甲苯棉球擦二甲苯棉球擦拭拭干棉球擦干干棉球擦干碘酒、酒精消

9、毒碘酒、酒精消毒77号号针头穿刺取血针头穿刺取血放入加有抗凝剂草酸放入加有抗凝剂草酸钠:钠:2mg/ml2mg/ml的烧杯中的烧杯中摇匀。摇匀。3.13.1只家兔肌肉注射胰岛素只家兔肌肉注射胰岛素5u/Kg5u/Kg,另,另一只家兔皮下注射肾上腺素一只家兔皮下注射肾上腺素0.5mg/0.5mg/每每只动物。只动物。4.304.30分钟后,分别从耳缘静脉取血。分钟后,分别从耳缘静脉取血。5.5.无蛋白血滤液的制备:取短试管无蛋白血滤液的制备:取短试管3 3只,只,各加空腹、胰岛素、肾上腺素处置抗凝各加空腹、胰岛素、肾上腺素处置抗凝血血0.4ml0.4ml,5%5%三氯醋酸三氯醋酸3.6ml3.6

10、ml,混匀,混匀,3000rpm3000rpm离心离心5min5min,上清即为无蛋白血滤,上清即为无蛋白血滤液。液。6.取取4支试管按下表操作单位:支试管按下表操作单位:ml 空白管空白管 规范管规范管 样品管样品管1空腹空腹 样品管样品管2用药用药蒸馏水蒸馏水 1.0 - - - 规范液规范液 - 1.0 - - 血滤液血滤液 - - 1.0空腹空腹 1.0用药用药邻甲苯邻甲苯胺试剂胺试剂 2.5 2.5 2.5 2.5 混匀,混匀,100水浴水浴8分钟,冷却。分钟,冷却。630nm比色,读取光密度。比色,读取光密度。 血糖血糖mg/dl =mg/dl = (mg%) (mg%)计算计算测

11、定管吸光度测定管吸光度规范管吸光度规范管吸光度100 本卷须知本卷须知 1.离心机的运用离心机的运用 .离心前一定要配平位置配平和分量配离心前一定要配平位置配平和分量配平。平。 .运用时离心机的盖子一定要盖紧,以免运用时离心机的盖子一定要盖紧,以免发生不测。发生不测。 .要等离心机完全静止后才干翻开盖子。要等离心机完全静止后才干翻开盖子。 2.微量移液器的运用微量移液器的运用 3.取血时的本卷须知取血时的本卷须知 .注射器、刀片的运用。注射器、刀片的运用。 .注射器在取血前要肝素化。注射器在取血前要肝素化。 .心脏取血时要留意进针的位置和深度。心脏取血时要留意进针的位置和深度。 .留意不要将空

12、气注入动物体内。留意不要将空气注入动物体内。 血液放入试管中时要先将注射器的针头血液放入试管中时要先将注射器的针头取下,以防溶血。取下,以防溶血。 4.邻甲苯胺具有毒性和腐蚀性,操作时要留邻甲苯胺具有毒性和腐蚀性,操作时要留意。意。v临床意义临床意义v 1.1.血糖升高:病理性主要见于糖尿病,其血糖升高:病理性主要见于糖尿病,其他内分泌疾病如肾上腺皮质机能亢进,垂体他内分泌疾病如肾上腺皮质机能亢进,垂体前叶机能亢进等。前叶机能亢进等。v 2.2.血糖降低:病理性如胰岛细胞瘤、胰血糖降低:病理性如胰岛细胞瘤、胰岛素分泌过多,过量胰岛素治疗,肾上腺皮岛素分泌过多,过量胰岛素治疗,肾上腺皮质功能减退等。质功能减退等。本次实验报告已论文方式书写本次实验报告已论文方式书写标题标题作者作者单位单位 【摘要】目的:【摘要】目的: 方法:方法: 结果:结果

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