酱油中糖精钠的薄层色谱法测定

1、酱油中糖精钠的薄层色谱法测定 一、试验目的 把握以薄层色谱法(tlc)测定酱油中糖精钠(c6h4connaso2)含量的原理与办法。 二、试验原理 在酸性条件下，食品中的糖精钠经乙醚提取、浓缩、薄层色谱分别、显色后，与标准品比较，可实现定性与半定量分析。 三、仪器与试材 1仪器与器材 绽开槽、薄层板(10cm20cm)、玻璃喷雾器、微量注射器等。 2试剂 除特殊解释外，试验中所用试剂均为分析纯，水为去离子水或蒸馏水。 (1)常规试剂：乙醚(不含过氧化物)、hcl、naoh、cuso45h2o、正丁醇、氨水、异丙醇、无水na2so4、无水乙醇、95乙醇、聚酰胺粉(200目)、可溶性淀粉、溴甲酚紫

2、。 (2)常规溶液：hcl溶液(1+1，体积比)、naoh溶液(40gl)、乙醇溶液(50，体积分数)、cuso4溶液(100gl，将10gcuso45h2o以水溶解并定容至100ml)、正丁醇一氨水一无水乙醇绽开剂(7+1+2，体积比)、异丙醇一氨水一无水乙醇绽开剂(7+1+2，体积比)。 (3)溴甲酚紫显色剂(0.4gl)：称取0.04g溴甲酚紫，以乙醇溶液溶解后，用naoh溶液调整ph为8，定容至100ml。 (4)糖精钠标准溶液(1mgml)：取0.0851g经120干燥4h后的糖精钠，以95乙醇溶解，移入100ml容量瓶中，再以95乙醇稀释至刻度。 3试验材料 23种酱油，各250m

3、l。 四、试验步骤 1样品提取 (1)取200ml酱油，置于100ml容量瓶中，加水至约60ml后，加20mlcuso4溶液，混匀，再加44mlnaoh溶液，加水至刻度，混匀，静置30min，过滤。 (2)取50ml滤液置于150ml分液漏斗中，加2mihcl溶液，用30ml、20ml、20ml乙醚分三次提取，合并乙醚提取液。 (3)以5mlhcl酸化的水洗涤乙醚提取液，弃水层。乙醚层以无水na2so4脱水后，使乙醚挥发，加20ml乙醇溶解残留物，密封保存，备用。 2薄层板的制备 (1)称取1.6g聚酰胺粉，加0.4g可溶性淀粉，加约7.0ml水，研磨35min。 (2)立刻涂成0250.30

4、mm厚的10cm20cm的薄层板，室温干燥后，在80下干燥1h。置于干燥器中保存，备用。 3测定 (1)在薄层板纵向的一端(这一端称为下端，另一端称为上端)2cm处，用微量注射器分离点10l、20l样品提取液，同时点3.0l、5.0l、7.0l、10.0l糖精钠标准溶液，各点间距大于1.0cm。 (2)将点好的薄层板放入盛有绽开剂(两种绽开剂任选一种，绽开剂液层约0.5cm，薄层板下端朝下)并预先已达到饱和状态的绽开槽中，绽开至l0cm左右后，取出，挥干。 (3)匀称喷雾显色剂于薄层板上，糖精钠斑点显黄色。按照样品点和标准点的rf值举行定性，按照斑点色彩深浅举行半定量。 4计算 按照下式计算样品中糖精钠的含量： x=m0/v(v2/v1) 式中，x为样品中糖精钠的含量，gl；m0为测定用样液中糖精钠的质量，mg；v为样品的体积，ml；v1为样品提取液残留物加入乙醇的体积