Tris-HCl及其他几种缓冲液配方

1、Tris 是什么有什么作用 Tris-HCI , Tris-EDTA 如何配制Tris :三羟甲基氨基甲烷三羟甲基氨基甲烷（Tris（hydroxymethyl）aminomethane，般简称为 Tris ）是一种有机化合物，其分子式为（HOCH2）3CNH2Tris 被广泛应用于生物化学和分子生物学实验中的缓冲 液的制备。例如，在生物化学实验中常用的TAE 和 TBE 缓冲液（用于核酸的溶解）都需要用到 Tris。由于它含有氨基因此可以与醛发生缩合反应Tris 为弱碱，在室温（25C下，它的 pKa 为；根据缓冲理论，Tris 缓冲液的有效 缓冲范围在到之间。Tris 碱的水溶液 pH 在

2、左右，一般加入盐酸以调节pH 值至所需值，即可获得该pH 值的缓冲液。但同时应注意温度对于Tris 的 pKa 的影响。由于 Tris 缓冲液为弱碱性溶液，DNA 在这样的溶液中会被去质子化，从而提高其溶解性。人们常常在 Tris 盐酸缓冲液中加入 EDTA 制成“ TE 缓冲液”，TE 缓冲液被用于 DNA 的稳定和储存。如果将调节pH 值的酸溶液换成乙酸，则获得“ TAE缓冲液”（Tris/Acetate/EDTA ）,而换成硼酸则获得“ TBE 缓冲液”（Tris/Borate/EDTA ）。这两种 缓冲液通常用于核酸电泳实验中。用途：有机合成中间体。在电泳缓冲液中同甘氨酸构成缓冲体系，

3、稳定电泳过程中的 PH 值。在凝胶中也起到稳定PH 的作用，只不过是 Tris-HCl 缓冲体系。Tris 缓冲液不仅被广泛用作核酸和蛋白质的溶剂，还有许多重要用途。Tris 被用于不同 pH 条件下的蛋白质晶体生长。Tris 缓冲液的低离子强度特点可用于线虫（C.elegans 核纤层蛋白 lamin ）的中间纤维的形成。Tris 也是蛋白质电泳缓冲液的主要成分之 一。此外，Tris 还是制备表面活性剂、硫化促进剂和一些药物的中间物。Tris 也被用作滴定标准物。常用Tris-HC冲液配制：Tri&HCI (0.05mol/L, 25匸)50ml0mol/L三轻甲基氨基甲烷(Tris

4、)落液与凶L盐酸涅匀启 加旃释至100mlpHx/mlpHx/ml71045 78 1026 27.2044782022.97.3043.4&3019,97 4042.08.4017.27.5040.30.5014.77.6038.58.6012.47.7036.68.7010.37.8034.58.808.57 9032.08 907.0帀疥子量=121.14：OJ mol/L溶液为12J14g/Lo Tris落液町从空气中吸收二氧化碳 (百度及其他网站所述)，使用时汪意将瓶盖严。配置不同浓度和不同PH值Tris-HCI缓冲液时，可以先B成一定PH值的05rwl/L缓冲液，再稀释到所

5、需浓度。1 M Tris-HCI ,组份浓度1 M Tris-HCI配制量1L配制方法：1. 称量 g Tris 置于 I L 烧杯中。2. 加入约 800 ml 的去离子水，充分搅拌溶解。3. 按下表加入浓 HCI 量调节所需要的 pH 值。pH 值浓 HCI约 70 ml约 60 ml约 42ml4.将溶液定容至 1 L。5.咼温咼压火菌后，室温保存。注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH 值，因为 Tris 溶液的 pH 值随温度的变化差异很大,温度每升高 1C,溶液的 pH 值大约降低个单位。M Tris-HCl组份浓度MTris-HCI配制量1 L配制方法1. 称量 g Tris 置于

6、 1 L 烧杯中。2. 加入约 800 ml 的去离子水，充分搅拌溶解。3. 用浓 HCI 调节 pH 值至。4. 将溶液定容至 1 L。5. 咼温咼压火菌后，室温保存。|注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH 值，因为 Tris 溶液的 pH 值随温度的变化差异很大,温度每升高 1C,溶液的 pH 值大约降低个单位。TE 即 Tris-EDTA buffer(10mM Tris , 1mM EDTA )。常用分子生物学试剂，用于DNA 勺溶解等。配制 1 0 xTE Buffer ,组份浓度：100 mM Tris-HCl , 10 mM EDTA配制量：1 L配制方法：1.量取下列溶液，置于 I L 烧杯中。1 M Tris-