正交试验法优选复方丹参片提取工艺

1、优选复方丹参薄膜衣片提取工艺及制剂生产工艺稳定性考察尚海宾 （河南创新药业有限公司，河南安阳456150） 摘要 目的：以制成口服复方丹参薄膜衣片每片重0.8g大片，减少服用数量为目标，对丹参提取工艺进行优选，同时对其制剂生产工艺进行稳定性考察。方法：采用L9(3)4正交试验优选提取工艺，选择溶剂（乙醇/水）用量为考察因素，以每片含量丹参酮A、丹酚酸 B为考察指标。结果：优选提取工艺为：第一次提取时间90分钟、95%乙醇用6倍量，第二次提取时间90分钟、50%乙醇用6倍量，第三次提取时间120分钟、提取水用8倍量。结论：优选的提取工艺及制剂生产工艺稳定，可用于实际生产。关键词 复方丹参薄膜衣大

2、片；正交试验；提取工艺；制剂生产工艺；稳定性考察。 Optimizing compound salvia miltiorrhiza film-coated tablet extraction technology and production process stabilityShangHaiBin（Henan innovation pharmaceutical co., LTD., henan anyang 456150）abstract objective: to make an oral compound salvia miltiorrhiza film-coated tablet ea

3、ch piece weighs 0.8 g, reduce the amount of taking as the goal, for optimizing the extraction technology of salvia miltiorrhiza, and stability study on its preparation process. Methods: using L9 (3) 4 orthogonal test optimization extraction process, choose the dosage of solvent (ethanol/water) to ex

4、amine factors, with every piece of content of tanshinone , Dan phenolic acid B as examining index. Results: optimum extraction process for the first time, extracting time 90 minutes, 6 times 95% ethanol by volume, the second time 90 minutes, 6 times with 50% ethanol, extracting time 120 minutes for

5、the third time, extracting water quantity with 8 times. Conclusion: the optimal extraction process and the preparation process is stable and can be used in practical production. key words compound danshen film blockbusters; The orthogonal experiment. Extraction process; Preparation process; Stabilit

6、y test.0引言复方丹参片是中国药典2010版一部收载的品种，由丹参、三七、冰片3 味中药组成。具有活血化瘀,理气止痛。用于气滞血瘀所致的胸痹，症见胸闷、心前区刺痛；冠心病心绞痛见上述证候者1的中药制剂。该品种为半浸膏片, 即丹参浸膏与三七细粉混合,干燥后粉碎成细粉制粒，与颗粒干燥后加入研细冰片混匀压片，包薄膜衣而成。因本次工艺研究为复方丹参薄膜衣大片，同时丹参酮A对热敏感, 其损失随加热温度升高和加热时间延长而增加2，易造成丹参酮A、丹酚酸 B含量不符合质量标准，加大了制剂生产控制难度。故采用正交试验法对其提取工艺进行优选、对其制剂生产工艺进行稳定性考察，为该制剂的顺利生产提供依据。1

7、实验材料1.1 设备：SF-75型锤击式粉碎机（上海科太粉碎设备厂）、WCSJ20型万能粗碎机（常熟市信诚中药设备厂）、1793型索氏提取器（上海越磁电子科技有限公司）、R-210/R-215旋转蒸发仪、SHB-III型循环水式多用真空泵（郑州世纪双科实验仪器有限公司）、HH-Z型数显水浴锅、电加热套（巩义英峪高科仪器厂）、TD-100多功能微型提取浓缩机组（瑞安天众医药化工机械有限公司）、CHW-5型槽型混合机（江阴市祥达机械制造有限公司）、YK-90型摇摆式颗粒机（上海乔枫实业有限公司）、CT(CT-C)型热风循环烘箱 （常州力马干燥工程有限公司 ）、XYP-7小型旋转式压片机（广州雷迈机

8、械设备有限公司）、labcoating实验型高效包衣机(深圳市信宜特科技有限公司)、JWI-700W计重电子台秤(上海毕胜实业有限公司）、1/1000电子天平（上海沪粤明科学仪器有限公司）、岛津LC2010AC型高效液相色谱仪（上海纳诺实业有限公司）、300ml带刻度玻璃烧杯（河南三顺教学仪器有限公司）、60mm研钵（河南三顺教学仪器有限公司）、药典筛（上海宝蓝实验仪器制造有限公司）、电热恒温干燥箱（江西兴业机械制造有限公司）。1.2.2 原辅料原料：丹参、三七、冰片等药材购自安徽省亳州市药材总公司中药材公司,辅料乳糖购自山东聊城安信药用辅料有限公司，药用乙醇购自新乡市先丰医药新材料有限公司，

9、浅红色醇溶包衣粉购自安徽山河辅料公司经公司检验符合质量标准。 2 方法与结果 2.1提取工艺因素水平确定已知因素：提取次数、提取时间、溶剂（乙醇/水）浓度，选择溶剂（乙醇/水）用量作为影响因素，每个因素设3个水平，L9(34)正交试验因素设计见表1按处方比例称取原药材丹参450g粗碎成粒径5mm12mm颗粒，按设计的正交试验先浸泡2h再进行提取。提取液分别水浴真空减压浓缩，取三七药材粗碎成粒径5mm12mm颗粒，再用粉碎成100目细粉备用。浸膏干燥温度<60，先水提取浸膏加入三七细粉141g干燥后粉碎成100目细粉；再50%乙醇提取浸膏加入浸膏细粉，干燥后粉碎成100目细粉；最后95%乙

10、醇提取浸膏加入浸膏细粉，干燥后粉碎成100目细粉，测定丹参酮A、丹酚酸B每片含量。 表1 元胡止痛片提取工艺正交试验因素水平 因素 A 第一次提取 B 第二次提取 C第三次提取 水平 95%乙醇用量（倍） 50%乙醇用量（倍） 水用量（倍） 1 4 5 6 2 5 6 7 3 6 7 8 2.2 实验方法与结果 采用L9(34)正交表安排试验，以粉碎后浸膏混合粉每片含量为考察指标。试验安排及结果见表 2，丹参酮A方差分析结果见表 3，丹酚酸B方差分析结果见表 4。表2 元胡止痛片提取工艺正交试验安排及结果 A B C D 试验结果试验号 95%乙醇用量 50%乙醇用量 水用量 空白 丹参酮A含

11、量 丹酚酸B含量 mg/片 mg/片 1 1 1 1 1 0.82 18.2 2 1 2 2 2 0.85 18.6 3 1 3 3 3 0.87 19.0 4 2 1 2 3 0.92 20.3 5 2 2 3 1 0.96 21.0 6 2 3 1 2 0.93 20.2 7 3 1 3 2 1.16 21.4 8 3 2 1 3 1.20 21.2 9 3 3 2 1 1.24 21.6 丹参酮A含量K11 0.847 0.967 0.983 1.007K12 0.937 1.003 1.003 0.980K13 1.200 1.013 0.997 0.997 R1 0.353 0.04

12、6 0.020 0.027丹酚酸B含量K21 18.660 19.967 19.867 20.267K22 20.500 20.267 20.167 20.067K23 21.400 20.267 20.467 20.167 R2 2.800 0.300 0.600 0.200表3 丹参酮A方差分析 方差来源 SS f MS F P A 0.202 2 0.101 185.776 0.005 B 0.004 2 0.002 3.327 0.231 C 0.001 2 0.000 0.571 0.636 误差 0.001 2 0.001 F 0.05(1，1)=161 表4 丹酚酸B方差分析 方

13、差来源 SS f MS F P A 12.260 2 6.130 204.333 0.005 B 0.180 2 0.090 3.000 0.250 C 0.540 2 0.270 9.000 0.100 误差 0.060 2 0.030 F 0.05(1，1)=1612.3结果分析方差分析结果表明，各因素水平间无显著性差异，丹参酮A影响最大的因素为A，因素主次顺序为 A>B>C；丹酚酸B影响最大的因素为A，因素主次顺序为 A>C>B。综合考虑最佳提取工艺为A3B2C3，即：第一次提取95%乙醇用6倍量、第二次提取50%乙醇用6倍量、第三次提取水用8倍量。 2.4 验证

14、试验 2.4.1 最佳提取工艺及制剂生产工艺验证2.4.1.1提取浓缩按以上最佳提取工艺，制备3批次（批量3330片）复方丹参薄膜衣片。取丹参药材4500g粗碎成粒径5mm12mm颗粒，置多功能微型提取浓缩机组，提取3次，减压浓缩。提取前加入乙醇先浸泡2h再进行提取。第一次提取时间90分钟、95%乙醇用6倍量，单独浓缩至适量放入洁净不锈钢容器，及时冷藏储存备用；第二次提取时间90分钟、50%乙醇用6倍量，单独浓缩至适量放入洁净不锈钢容器，第三次提取时间120分钟、提取水用8倍量，单独浓缩至适量放入洁净不锈钢容器。2.4.1.2浸膏干燥取三七药材粗碎成粒径5mm12mm颗粒，再粉碎成100目细粉

15、。先水提取浸膏加入三七细粉1410g混合，控制干燥温度50-60，干燥后粉碎成100目细粉；再加入50%乙醇提取浸膏混合，控制干燥温度50-60，干燥后粉碎成100目细粉；最后加入95%乙醇提取浸膏混合，控制干燥温度50-60，干燥后粉碎成100目细粉。 2.4.1.3制粒取浸膏粉、乳糖适量(加至2700g)混合,混合时间10min，混合机转速24r/min，加入80%乙醇适量制软材，摇摆式颗粒机14目制粒、颗粒置热风循环烘箱，干燥温度50-60；14目整粒，取冰片80g置研钵研至粉末状细粉与颗粒和硬脂酸镁适量，等量递增加入颗粒混匀，每批次取样检测颗粒丹参酮A 丹酚酸B含量。检测结果见表5。2

16、.4.1.4压片采用ZP37A旋转式压片机，异性冲模具，压力：5KN-10KN，转速：18r/min，片重：0.8g/片，每批次取样检测每片丹参酮A 丹酚酸B含量。检测结果见表5。2.4.1.5包衣采用实验型高效包衣机，10%包衣液浓度（70%乙醇：浅红色包衣粉配制），设定进气温度为75-85；出风温度为60-75；喷雾压缩空气（压力0.4mpa-0.45mpa），包衣机转速为8r/min；控制包衣喷浆压力为0.3mpa-0.35mpa，蠕动泵调节喷浆流量为100g/min；片床温度控制为50包薄膜衣。每批次取样检测每片丹参酮A 丹酚酸B含量。检测结果见表5。 2.4.2 检测结果对颗粒、素片

17、和薄膜衣片每片丹参酮A、丹酚酸B含量进行检测，证明提取工艺及制剂生产工艺的实用性。2.4.2.1合格标准含量测定：丹参酮A每片不少于0.60mg，丹酚酸B每片不少于15.0mg，2.4.2.2检测结果对比：检测结果对比:制剂生产3批次，每批取样1次进行检测，以确认其重现性，结果见表5。表5 含量测定检测结果 颗粒含量 素片含量 薄膜衣片含量 试验号 丹参酮A 丹酚酸B 丹参酮A 丹酚酸B 丹参酮A 丹酚酸B mg/片 mg/片 mg/片 mg/片 mg/片 mg/片 1 1.32 25.2 1.36 25.0 1.28 25.4 2 1.28 25.6 1.30 24.6 1.34 25.2

18、3 1.34 24.8 1.34 24.8 1.32 24.6 结论：通过检测结果得出：颗粒、素片、薄膜衣片丹参酮A、丹酚酸B每片含量均符合质量标准，表明优选的提取工艺及制剂生产工艺可行。3.稳定性考察包衣片3批次，包装后各取20瓶，每瓶60片，采用电热恒温干燥箱，进行加速实验，在（温度45湿度75%）条件下，进行有效期24个月稳定性考察3。3.1 合格标准含量测定：丹参酮A每片不少于0.60mg，丹酚酸B每片不少于15.0mg，3.2 检测结果对比：每批取样1次进行检测，以确认其重现性，结果见表6。表6 薄膜衣片加速试验对比检测结果 试验1号含量测定 试验2号含量测定 试验3号含量测定 时间 丹参酮A 丹酚酸B 丹参酮A 丹酚酸B 丹参酮A 丹酚酸B （月） mg/片 mg/片 mg/片 mg/ mg/片 mg/片 0 1.32 25.2 1.36 25.4 1.30 24.8 1 1.28 25.0 1.30 25.0 1.24 24.8 2 1.30 24.6 1.32 24.8 1.32 25.0 3 1.34 24.8 1.26 25.0 1.26 24.6 6 1.32 25.0 1.28 24.4 1.28 25.0 12 1.26 25.2 1.24 24.6 1.30 24.8 18 1.30 24.2 1.30