尿素分解菌导学案

1、课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数一、筛选菌株1筛选微生物的原理：人为提供有利于 生长的条件（包括、温度、等），同时或其他种类微生物生长的培养基。2、 选择培养基：允许 的微生物生长，同时或其他种类微生物生长的培养基，称作选择培养基。3、 欲得到分离分解尿素的细菌可以用以 唯一氮源的培养基进行选择培养，因为该细菌可以产生 ，将尿素分解成，使培养基的PH，所以若作进一步的鉴定可向该培养基长加入0二、统计菌落数目1、 微生物活菌计数的常用方法是 ，其原理是：当样品的稀释度足够 时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约有多少活菌。利用

2、 公式： 进行计算。（ C 代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积， M代表稀释 倍数）2、 为了确保结果准确，一般选择菌落数在 的平板进行计数，每个稀释度下至少涂布 个平板，取菌落数的，且这三个平板的菌落数差异过大，3、用这种方法统计的菌落数往往比活菌的实际数目，因为，因此统计结果一般用数而不是活菌数来表示。4、 也是测定微生物数量的常用方 法。三、设置对照设置对照的主要目的是排除实验组中 对实验结果的影响，提高实验结果的0四、实验设计1土壤取样：细菌适宜在酸碱度接近 的土壤中生长，绝大多数细菌在距地表约 的土壤2、 样品稀释：测定土壤中细菌的数量，一般选

3、用 二、的稀释液进行平板培养； 测定放线菌的数量，一般选用、的稀释液进行平板培养；测定真菌的数量，一般选用、的稀释液进行平板培养。3、 微生物的培养与观察：细菌一般在 的温度下培养；放线菌一般在的温度下培 养;真菌一般在的温度下培养。4、 菌落的特征包括菌落的、和等方面。五、操作提示无菌操作：取土样的小铲子和盛土样的信封使用前都需要;应在取土样；在土壤稀释过程中，每一步都要在 操作。练习题1. 分离土壤中分解尿素的细菌 ，对培养基的要求是（）。加尿素不加尿素加琼脂不加琼脂 加葡萄糖 不加葡萄糖加硝酸盐 不加硝酸盐A. B.C.D.2. 下图为“土壤中分解尿素的细菌的分离和计数”实验中样品稀释示

4、意图。据图分析正确的是A. 3号试管中的菌落稀释倍数为103倍B. 4号中稀释液进行平板培养得到的菌落平均数恰为5号的10倍C. 5号试管的结果表明每克土壤中的菌株数为X10 9个D. 该实验方法统计得到的结果往往会比实际活菌数目要高3. 可以鉴定出分解尿素的细菌的方法是A 以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂B .以尿素为唯一氮源的培养基中加入二苯胺试剂C .以尿素为唯一氮源的培养基中加入苏丹川试剂D 以尿素为唯一氮源的培养基中加入双缩脲试剂4. 在农田土壤的表层自生固氮菌较多，用表层土制成的稀泥浆接种到特制的培养基上培养，可将自生固氮菌与其他细菌分开，对培养基的要求是加抗生素不加抗生素

5、加氮素不加氮素加葡萄糖不加葡萄糖37C恒温箱中培养2830C温度下培养A. B.C . D .5. 从土壤中分离以尿素为氮源的细菌，下列实验操作不正确的A. 将土壤用无菌水稀释，制备10510 使用 法可以获得如上图中的单个菌落，用该方法统计菌落数目时，最好选择菌落数在 间的平板进行计数。在某一稀释度下平板上的平均菌落数为50个，所用稀释液的体积为 ml，稀释倍数为101 2 3 4 5时，则每毫升样品中的菌落数 为。 土壤稀释液B. 将不同浓度的土壤稀释液涂布于不同平板上C. 用加入刚果红指示剂的选择培养基筛选分解尿素的细菌D. 从周围出现红色环带的菌落中挑取能够分泌脲酶的菌株6. 关于对分

6、解尿素的细菌进行分离、计数的实验叙述，错误的是A. 统计菌落数目时，当样品的稀释度足够高时，培养基表面的一个菌落，来源于样品 稀释液中的一个活菌。B. 统计菌落数目时，通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品大约含有多少活菌。C. 设置对照的目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的干扰D. 以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，通过检测培养基的pH的变化，还 不能准确鉴定培养基中的细菌就是能够分解尿素的那种。7. 下列关于从土壤中分离细菌的操作步骤中，正确的是()土壤取样称取10g 土壤取出加入盛有 90mL无菌水的锥形瓶中吸取进行平板涂布依次稀释至io1、io2、io3、io 采用固体平板

7、培养细菌时，要将培养皿 (正放或倒、io5、106、107稀释度A.tttB .ttt C .ttt D .ttt8. 下列能选择出分解尿素的细菌的培养基是()A.KHPO、NstHPO、MgSQB.KHPQ、NqHPO、MgSQC.KHPQ、NqHPO、MgSQD.KHPQ、NqHPO、MgSQ7H2。、葡萄糖、尿素、琼脂、水7H2。、葡萄糖、琼脂、水7“。、尿素、琼脂、水7“。、牛肉膏、蛋白胨、琼脂、水;9. 幽门螺杆菌简称 Hp,主要寄生在胃幽门、胃窦等附近的黏膜上，是人类至2i世纪初唯一的已知胃部细菌. Hp可产生高活性的尿素酶.(1) 制备幽门螺杆菌培养基时，需将培养基的pH调至性.培养皿进行灭菌的常用方法是 倒平板时要待平板冷凝后，将平板倒置，其主要原因是.(2) 图表示的是用 法接种培养后得到的结果图是在纯化过程中通过 法分离培养的结果，在培养基上接种时接种环需通过灼烧灭菌，完成图中划线操作,至少需要灼烧接种环 次.(3) 为检测某人体内是否感染了Hp,可让其服用14C标记的，定时收集呼出的气体，通过分析呼气中14C标记的CQ的含量即可判断该检测方法和卡尔文研究光合 作用的方法一样可称为 法.10. 尿素是一种重要的农业氮肥。但是，尿素CO (NH) 2并不能直接被农作物吸收。只有当土壤中的