论文中期考核

1、一、木质部内腐烂病菌生长扩展动态的研究1试验材料与方法1.1 抱子的制备苹果树腐烂病菌(Valsa mali)LXS080901菌株，于陕西省富 士苹果枝条上采集病组织，为青岛农业大学植物病害流行 实验室单胞子器分离保存于4 c冰箱中。用农杆菌介导转化法(ATMT)将携带潮霉素 B磷酸转移酶基因(hph)和绿色荧光 蛋白表达基因(gfp)转入腐烂病菌，获得转化子LXS080901-16。经离体和活体的接种试验，转化子 LXS080901-16和 LXS080901在苹果枝干上都能导致典型的腐烂病症状，二者 的致病性无差异，与田间自然发病症状没有差异。苹果树腐烂病菌 PDA培养基上活化后，用 0

2、.5cm打孔 器打取边缘新鲜菌丝，取20块置于大麦粒培养基中25 c黑暗培养15天左右即可产生大量分生胞子器。将产胞的大麦 粒放于1%琼脂保湿，2天后分生抱子器即可溢由黄色分生 抱子角。1.2 腐烂病菌在木质部内的扩展动态3月下旬在青岛农业大学胶州示范园选取3年生富士苹果的12枝条，距基部20cm处剪除枝条形成剪口，修剪当天接种。 用灭菌牙签挑取新鲜抱子角涂于木质部中央而不接触韧皮部， 用湿脱脂棉包裹，塑料膜包扎保湿，7天后揭除包扎膜。并标记。接种后每个月剪取6个接种枝条，并截切成 0.5cm茎段, 用PDA分离每个茎段内的腐烂病菌，并在荧光显微镜下观 察是否为接种病菌，以此推断腐烂病菌在苹果

3、枝条木质部 内的扩展速度。1.3 不同龄期剪口木质部接种腐烂病菌后的发病动态3月下旬在青岛农业大学胶州示范园选取3年生富士苹果1-2年生枝条，距基部 20cm处剪除枝条形成剪口。7天后,用灭菌牙签挑取新鲜分生抱子角涂于木质部中央，湿脱脂 棉包裹，塑料膜包扎保湿，7天后解除包扎膜，并标记。以后每个月接种一次，每次 20个枝条剪口。接种后每个月观 察记录接种剪口的发病情况，当剪口下方枝段由现长径超 过1cm的典型腐烂病斑时，记为发病。2结果与分析2.1 腐烂病菌在木质部内的扩展动态接种后，结果表明，5、6、7、8、9、10、11和次年6月 份月份腐烂病菌在木质部内的生长扩展到达的最远距离平 均值分

4、别为 1.2 , 2.5 , 3.6 , 3.7 , 3.8 , 4.0、4.3 和 12.3cm o病菌接种后的前3个月，腐烂病菌在木质部内生 长扩展速度较快，平均每月扩展1.2cm； 8、9、10月份病菌的扩展处停滞状态；11月份到次年6月份木质部内的菌 丝快速扩展。木质部的接种结果证实，苹果腐烂病菌能够 从苹果枝条的新鲜剪锯口侵入，而且能在木质部内扩展。2.2 不同龄期剪口木质部接种腐烂病菌后的发病动态、伤口龄期对腐烂病菌生长扩展的影响图表1伤口龄期对腐烂病菌生长扩展的影响春季夏季三、不同龄期枝条对腐烂病菌生长扩展的影响备注说明，非正文，实际使用可删除如下部分。本内容仅给予阅读编辑指点：

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