医院监测检验方法ppt课件

1、 对重点部门的室内空气、物体外表及医护人员手外表的消对重点部门的室内空气、物体外表及医护人员手外表的消毒情况的监测毒情况的监测 对运用中消毒液及灭菌剂的监测对运用中消毒液及灭菌剂的监测 对内镜消毒效果的监测对内镜消毒效果的监测 对各种灭菌器灭菌效果的生物监测对各种灭菌器灭菌效果的生物监测 对医院污水的监测对医院污水的监测 GB15982-2019 环境类别环境类别范范 围围标标 准准空气空气cfu/ccfu/cm m3 3物体表面物体表面cfu/cmcfu/cm2 2医护人员手医护人员手cfu/cmcfu/cm2 2类类层流洁净手术室、层流洁净病房层流洁净手术室、层流洁净病房1055类类 普通

2、手术室、产房、婴儿室、普通手术室、产房、婴儿室、早产儿室、普通保护性隔离室、早产儿室、普通保护性隔离室、供应室无菌区、烧伤病房、重供应室无菌区、烧伤病房、重症监护病房症监护病房20055类类 儿科病房、妇产科检查室、注儿科病房、妇产科检查室、注射室、换药室、治疗室、供应射室、换药室、治疗室、供应室清洁区、急诊室、化验室、室清洁区、急诊室、化验室、各类普通病房和房间各类普通病房和房间5001010类类传染病科及病房传染病科及病房-1515 不得检出致病微生物，包括：乙型溶血链球菌、不得检出致病微生物，包括：乙型溶血链球菌、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌等金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌等 要求在母婴同室、早产

3、儿室、婴儿室、新生儿要求在母婴同室、早产儿室、婴儿室、新生儿 室及儿科病房的物体外表及医护人员手上不得室及儿科病房的物体外表及医护人员手上不得 检出沙门氏菌。检出沙门氏菌。 采样时间：选择消毒处置后与进展医疗活动之采样时间：选择消毒处置后与进展医疗活动之前期间采样前期间采样 采样高度：与地面垂直高度采样高度：与地面垂直高度80150cm 80150cm 布点方法：室内面积布点方法：室内面积30m230m2，设一条对角线上，设一条对角线上取取3 3点，即中心一点、两端各距墙点，即中心一点、两端各距墙1m1m处各取一点；处各取一点；室内面积室内面积30m230m2，设东、西、南、北中，设东、西、南

4、、北中5 5点，其点，其中东、西、南、北点均距墙中东、西、南、北点均距墙1m1m。 3 3采样方法：用采样方法：用9cm9cm直径普通营养琼脂平板在采直径普通营养琼脂平板在采样点暴露样点暴露5min5min。 细菌菌落总数检查：将采样好的平板放置于 37培育箱培育后，进展数落计数。 结果计算： 50000平均菌落数cfu/平皿 空气细菌菌落总数cfu/m3= 平板面积cm2平板暴露时间min 采样时间：选择消毒处置后采样时间：选择消毒处置后4h4h内进展采样。内进展采样。 采样面积：被采外表采样面积：被采外表100cm2100cm2，取全部外表；，取全部外表；被采外表被采外表100cm2100

5、cm2。 采样方法：用采样方法：用5 55cm25cm2的规范灭菌规格板，放的规范灭菌规格板，放在被检物体外表，用浸有无菌生理盐水采样液在被检物体外表，用浸有无菌生理盐水采样液的棉拭子的棉拭子1 1支，在规格板内横竖往返各涂抹支，在规格板内横竖往返各涂抹5 5次，次，并随之转动棉拭子，延续采样并随之转动棉拭子，延续采样1414个规格板面个规格板面积，剪去手接触部分，将棉拭子装有积，剪去手接触部分，将棉拭子装有10ml10ml采样采样液的试管中，门把手等小型物体那么采用棉拭液的试管中，门把手等小型物体那么采用棉拭子直接涂抹物体的方法采样。子直接涂抹物体的方法采样。 细菌菌落总数检查：将含有棉拭子

6、的采样液细菌菌落总数检查：将含有棉拭子的采样液充分混匀并进展适当稀释后，取充分混匀并进展适当稀释后，取1ml1ml采样液接采样液接种于无菌平皿中，平行接种两个平皿，然后种于无菌平皿中，平行接种两个平皿，然后倒入营养琼脂倒入营养琼脂1520ml1520ml，待凝固后将平板放置，待凝固后将平板放置于于3737培育箱培育，进展数落计数。培育箱培育，进展数落计数。 结果计算： 平皿上菌落的平均数采样液稀释倍数 物体外表细菌菌落总数cfu/m2= 采样面积cm2 采样时间：在接触病人、从事医疗活动前进展采样。 采样面积：采双手，一只手涂擦面积约30cm2，采样面积按平方厘米计算。 采样方法：被检人五指并

7、拢，将浸有无菌生理盐水采样液的棉拭子一支在双手曲面从指根到指端来回涂擦各两次，并随之转动采样棉拭子，剪去手接触部位，将棉拭子放入装有10ml采样液的试管内送检。 细菌菌落总数检查：将含有棉拭子的采样液充分混匀并进展适当稀释后，取1ml采样液接种于无菌平皿中，平行接种两个平皿，然后倒入营养琼脂1520ml，待凝固后将平板放置于37培育箱培育，进展数落计数。 结果计算： 平皿上菌落的平均数采样液稀释倍数 手外表细菌菌落总数cfu/m2= 302 1 1、检验根据：、检验根据：GB15982-2019GB15982-2019 2 2、卫生规范：要求细菌菌落总数应、卫生规范：要求细菌菌落总数应100c

8、fu/mL100cfu/mL，同样不得检出致病菌。同样不得检出致病菌。 此外，在卫生厅印发的此外，在卫生厅印发的 中还提出运用中还提出运用中的消毒剂及灭菌剂应监测其有效成份含量，使中的消毒剂及灭菌剂应监测其有效成份含量，使其符合运用的规范。其符合运用的规范。 采样时间：采取改换前运用中的消毒剂与无菌器采样时间：采取改换前运用中的消毒剂与无菌器械保管液械保管液 采样量及方法：在无菌条件下，用无菌吸管汲取采样量及方法：在无菌条件下，用无菌吸管汲取1mL1mL被检样液，参与被检样液，参与9mL9mL含中和剂的稀释液中。含中和剂的稀释液中。 根据所采的样液不同，应在采样液中参与相应的根据所采的样液不同

9、，应在采样液中参与相应的中和剂，以中和被检样液的残效作用中和剂，以中和被检样液的残效作用 对于醇类与酚类消毒剂，稀释液用普通营养肉汤对于醇类与酚类消毒剂，稀释液用普通营养肉汤 对于含氯、含碘消毒剂、过氧化物消毒，需在肉对于含氯、含碘消毒剂、过氧化物消毒，需在肉汤中参与汤中参与0.1%0.1%硫代硫酸钠硫代硫酸钠 对于洗必泰、季铵盐类消毒剂，需在肉汤中参与对于洗必泰、季铵盐类消毒剂，需在肉汤中参与3%3%W/VW/V吐温吐温8080和和0.3%0.3%卵磷脂卵磷脂 对于醛类消毒剂，需在肉汤中参与对于醛类消毒剂，需在肉汤中参与0.3%0.3%甘氨酸甘氨酸 对于含有外表活性剂的各种复方消毒剂，需在肉

10、对于含有外表活性剂的各种复方消毒剂，需在肉汤中参与汤中参与3%3%W/VW/V吐温吐温8080 细菌菌落总数检查：将采样液充分混匀并进展适细菌菌落总数检查：将采样液充分混匀并进展适当稀释后，取当稀释后，取1mL1mL采样液接种于无菌平皿中，平行采样液接种于无菌平皿中，平行接种两个平皿，然后倒入营养琼脂接种两个平皿，然后倒入营养琼脂1520ml1520ml，待凝，待凝固后将平板放置于固后将平板放置于3737培育箱培育，进展数落计培育箱培育，进展数落计数。数。 结果分析：平板上有菌生长，证明被检样液有残结果分析：平板上有菌生长，证明被检样液有残存活菌，假设每个平板菌落数在存活菌，假设每个平板菌落数

11、在1010个以下，仍可个以下，仍可用于消毒处置但不能用于灭菌，假设第每个用于消毒处置但不能用于灭菌，假设第每个平板菌落数超越平板菌落数超越1010个，阐明每毫升被检样液含菌个，阐明每毫升被检样液含菌量已超越量已超越100100个，即不宜运用。个，即不宜运用。 有效成份含量：有效成份含量： 根据卫生部根据卫生部 20192019年版中的年版中的2.22.2消毒消毒产品理化检验技术规范进展产品理化检验技术规范进展 有效氯含量测定有效氯含量测定 2.2.1.2.12.2.1.2.1 有效碘含量测定有效碘含量测定 2.2.1.2.22.2.1.2.2 过氧乙酸含量测定过氧乙酸含量测定 2.2.1.2.

12、32.2.1.2.3 戊二醛含量测定戊二醛含量测定 2.2.1.2.92.2.1.2.9 需求指出的是，运用中消毒剂及无菌器械保管液需求指出的是，运用中消毒剂及无菌器械保管液的有效成份含量均较低，因此，滴定液的浓度要的有效成份含量均较低，因此，滴定液的浓度要适当降低。适当降低。 主要根据：内镜清洗消毒技术操作规范主要根据：内镜清洗消毒技术操作规范20192019年年版第五章版第五章 卫生规范：卫生规范： 消毒后的内镜合格规范为：细菌总数消毒后的内镜合格规范为：细菌总数20cfu/20cfu/件，件，不能检出致病菌；不能检出致病菌； 灭菌后的内镜合格规范为：无菌检测合格。灭菌后的内镜合格规范为：

13、无菌检测合格。 采样方法：监测采样部位为内镜的内腔面。用无采样方法：监测采样部位为内镜的内腔面。用无菌注射器抽取菌注射器抽取10ml10ml含相应中和剂的缓冲液，从待含相应中和剂的缓冲液，从待检内镜活检口注入，用检内镜活检口注入，用15ml15ml无菌试管从活检出口无菌试管从活检出口搜集，及时送检，搜集，及时送检，2 2小时内检测。小时内检测。 菌落计数：将送检液用旋涡器充分震荡，取菌落计数：将送检液用旋涡器充分震荡，取0.5ml0.5ml， 加加 入入2 2只直径只直径90mm90mm无菌平皿，每个平皿分别参与曾经熔化无菌平皿，每个平皿分别参与曾经熔化的的45484548营养琼脂营养琼脂15

14、ml18ml15ml18ml，边倾注边摇匀，待琼脂，边倾注边摇匀，待琼脂 凝固，于凝固，于3535培育培育4848小时后计数。小时后计数。 结果判别：菌落数结果判别：菌落数/ /镜镜=2=2个平皿菌落数平均值个平皿菌落数平均值2020。 致病菌检测：将送检液用旋涡器充分震荡，取致病菌检测：将送检液用旋涡器充分震荡，取0.2ml0.2ml分别分别接种接种90mm90mm血平皿、中国兰平皿和血平皿、中国兰平皿和SSSS平皿，均匀涂布，平皿，均匀涂布，3535培育培育4848小时，察看有无致病菌生长。小时，察看有无致病菌生长。 需求检测的致病菌主要有： 溶血链球菌 绿脓杆菌 金黄色葡萄球菌 沙门氏菌

15、 根据：根据：GB/T 4789.11-2019 GB/T 4789.11-2019 食品卫生微生物学检验食品卫生微生物学检验 溶血性链球菌检验溶血性链球菌检验检检 样样葡萄糖肉汤葡萄糖肉汤血平板血平板血平板分纯培育血平板分纯培育链激酶实验链激酶实验杆菌肽敏感实验杆菌肽敏感实验察看溶血察看溶血革兰氏染色革兰氏染色报报 告告361 24h 36136124h24h 根据：根据：GB7918.4-87GB7918.4-87 化装品微生物规范检验方法化装品微生物规范检验方法 绿绿 脓脓 杆杆 菌菌增增 菌菌 培培 养养分分 离离 培培 养养染染 色色 镜镜 检检氧化酶实验氧化酶实验绿脓菌素实验绿脓菌

16、素实验硝酸盐复原产气实验硝酸盐复原产气实验明胶液化实验明胶液化实验4242生长实验生长实验 报报 告告3737培育培育1824h 1824h 3737培育培育1824h 1824h 根据：GB7918.5-87 化装品微生物规范检验方法 金黄色葡萄球菌增增 菌菌分分 离离染色镜检染色镜检甘露醇发酵实验甘露醇发酵实验血浆凝固酶实验血浆凝固酶实验报报 告告37 1824h 37 1824h 37 2448h 37 2448h 沙门氏菌：按国标要求，对于母婴同室、沙门氏菌：按国标要求，对于母婴同室、早产儿室、新生儿及儿科病房物外表和医早产儿室、新生儿及儿科病房物外表和医护人员手上，不得检出沙门氏菌。

17、检验方护人员手上，不得检出沙门氏菌。检验方法主要参照法主要参照GB4789.4-2019 GB4789.4-2019 食品平安国家食品平安国家规范规范 食品微生物学检验食品微生物学检验 沙门氏菌检验沙门氏菌检验 1 1、检验根据：、检验根据： WS/T310.3-2021WS/T310.3-2021 GB15981-2019GB15981-2019 、消毒技术规范消毒技术规范 规范中要求，对灭菌质量采用物理监测法、化学规范中要求，对灭菌质量采用物理监测法、化学监测法和生物监测法进展。监测法和生物监测法进展。 压力蒸汽灭菌压力蒸汽灭菌 物理监测法：每次灭菌应延续监测并记录灭菌时物理监测法：每次灭

18、菌应延续监测并记录灭菌时的温度、压力、时间等灭菌参数。温度动摇范围的温度、压力、时间等灭菌参数。温度动摇范围在在33以内，时间满足最低灭菌时间的要求，同以内，时间满足最低灭菌时间的要求，同时应记录一切临界点的时间、温度与压力值，结时应记录一切临界点的时间、温度与压力值，结果应符合灭菌的要求。果应符合灭菌的要求。 压力蒸汽灭菌压力蒸汽灭菌 化学监测法：应进展包外、包内化学指示物监测。化学监测法：应进展包外、包内化学指示物监测。详细要求为灭菌包包外应有化学指示物、高度危详细要求为灭菌包包外应有化学指示物、高度危险性物品包内应放置包内化学指示物，置于最难险性物品包内应放置包内化学指示物，置于最难灭菌

19、部位。假设透过包装资料可直接察看包内化灭菌部位。假设透过包装资料可直接察看包内化学指示物的颜色变化，那么不用放置包外化学指学指示物的颜色变化，那么不用放置包外化学指示物。经过察看化学指示物颜色的变化，断定能示物。经过察看化学指示物颜色的变化，断定能否到达灭菌合格要求；采用快速压力蒸汽灭菌程否到达灭菌合格要求；采用快速压力蒸汽灭菌程序时，应直接将一片包内化学指示物置于待灭菌序时，应直接将一片包内化学指示物置于待灭菌物品旁边进展化学监测。物品旁边进展化学监测。 压力蒸汽灭菌压力蒸汽灭菌 生物监测法：应每周监测一次；紧急情况下，可生物监测法：应每周监测一次；紧急情况下，可在生物在生物PCDPCD中加

20、用中加用5 5类化学指示物；新的包装资料类化学指示物；新的包装资料和方法进展灭菌时应进展生物监测和方法进展灭菌时应进展生物监测 B-DB-D实验：预真空压力蒸汽灭菌器应每日开场灭菌实验：预真空压力蒸汽灭菌器应每日开场灭菌运转前进展运转前进展B-DB-D测试，测试合格后，方可运用。测试，测试合格后，方可运用。 干热灭菌干热灭菌 物理监测法：每灭菌批次应进展物理监测。将多物理监测法：每灭菌批次应进展物理监测。将多点温度检测仪的多个探头分别放于灭菌器各层内、点温度检测仪的多个探头分别放于灭菌器各层内、中、外各点，关好柜门，引出导线，由记录仪中中、外各点，关好柜门，引出导线，由记录仪中察看温度上升与继

21、续时间。温度在设定时间内均察看温度上升与继续时间。温度在设定时间内均到达预置温度，那么物理监测合格。到达预置温度，那么物理监测合格。 干热灭菌干热灭菌 化学监测法：每一灭菌包外应运用包外化学指示化学监测法：每一灭菌包外应运用包外化学指示物，每一灭菌包内应运用包内化学指示物，并置物，每一灭菌包内应运用包内化学指示物，并置于最难灭菌的部位。对于未打包的物品，应运用于最难灭菌的部位。对于未打包的物品，应运用一个或多个包内化学指示物，放在待灭菌物品附一个或多个包内化学指示物，放在待灭菌物品附近进展监测。经过一个灭菌周期后取出，据其颜近进展监测。经过一个灭菌周期后取出，据其颜色的改动判别能否到达灭菌要求

22、。色的改动判别能否到达灭菌要求。 生物监测法：应每周监测一次生物监测法：应每周监测一次 环氧乙烷灭菌的监测环氧乙烷灭菌的监测 物理监测法：每次应延续监测并记录灭菌时的温物理监测法：每次应延续监测并记录灭菌时的温度、压力和时间等灭菌参数。灭菌参数符合灭菌度、压力和时间等灭菌参数。灭菌参数符合灭菌器的运用阐明或操作手册的要求。器的运用阐明或操作手册的要求。 化学监测法：每个灭菌物品包外应运用包外化学化学监测法：每个灭菌物品包外应运用包外化学指示物，作为灭菌过程的标志；每包内最难灭菌指示物，作为灭菌过程的标志；每包内最难灭菌位置放置包内化学指示物，经过察看其颜色变化位置放置包内化学指示物，经过察看其

23、颜色变化断定能否到达灭菌合格要求。断定能否到达灭菌合格要求。 生物监测法：每灭菌批次应进展生物监测。生物监测法：每灭菌批次应进展生物监测。 过氧化氢等离子灭菌、低温甲醛蒸汽灭菌监测过氧化氢等离子灭菌、低温甲醛蒸汽灭菌监测 物理监测法：每次灭菌应延续监测并详细记录灭物理监测法：每次灭菌应延续监测并详细记录灭菌过各的参数，灭菌参数符合灭菌器的运用阐明菌过各的参数，灭菌参数符合灭菌器的运用阐明或操作手册的要求。或操作手册的要求。 化学监测法：每个灭菌物品包外应运用包外化学化学监测法：每个灭菌物品包外应运用包外化学指示物，作为灭菌过程的标志；每包内最难灭菌指示物，作为灭菌过程的标志；每包内最难灭菌位置

24、放置包内化学指示物，经过察看其颜色变化，位置放置包内化学指示物，经过察看其颜色变化，断定能否到达灭菌合格要求。断定能否到达灭菌合格要求。 生物监测法：过氧化氢等离子灭菌应每天至少进生物监测法：过氧化氢等离子灭菌应每天至少进展一次生物监测；低温甲醛蒸汽灭菌应每周监测展一次生物监测；低温甲醛蒸汽灭菌应每周监测一次。一次。 在进展医院监测时，对于各种灭菌器的灭菌效果在进展医院监测时，对于各种灭菌器的灭菌效果监测应采用生物监测的方法。按监测应采用生物监测的方法。按 的规定，将指示菌株制成规范生物测试包或生物的规定，将指示菌株制成规范生物测试包或生物PCDPCD，或运用一次性规范生物测试包，对灭菌器内，

25、或运用一次性规范生物测试包，对灭菌器内的灭菌质量进展生物监测。规范生物监测包置于的灭菌质量进展生物监测。规范生物监测包置于灭菌器排气口的上方或厂家建议的灭菌器内最难灭菌器排气口的上方或厂家建议的灭菌器内最难灭菌的部位，并设阳性对照及阴性对照。灭菌的部位，并设阳性对照及阴性对照。 指示菌株：嗜热脂肪杆菌芽胞指示菌株：嗜热脂肪杆菌芽胞ATCC 7953ATCC 7953或或SSIK SSIK 3131菌片含量为菌片含量为5.05.0105cfu/105cfu/片片5.05.0106cfu/106cfu/片。片。D121D121值值1.3min1.9min1.3min1.9min，KTKT值为值为1

26、9min19min，STST值值3.9min3.9min。 培育基：溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培育基。培育基：溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培育基。 规范实验包：由规范实验包：由1616条条41cm41cm66cm66cm的全棉手术巾制的全棉手术巾制成。将每条手术巾的长边折成成。将每条手术巾的长边折成3 3层，短边折成层，短边折成2 2层，层，然后叠放，制成然后叠放，制成23cm23cm23cm23cm15cm15cm大小的测试包。大小的测试包。 检测方法：将两个嗜热脂肪杆菌芽胞菌片分别装检测方法：将两个嗜热脂肪杆菌芽胞菌片分别装入灭菌小纸袋内，置于规范实验包中心部位。经入灭菌小纸袋内，置于规范实验包中心

27、部位。经一个灭菌周期后，在无菌条件下，取出规范包中一个灭菌周期后，在无菌条件下，取出规范包中的指示菌片，投入溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培育的指示菌片，投入溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培育基中，经基中，经565611培育培育7 7天自含式生物指示物天自含式生物指示物按产品阐明书执行察看培育结果。按产品阐明书执行察看培育结果。 结果断定：阳性对照组培育阳性，阴性对照组培结果断定：阳性对照组培育阳性，阴性对照组培育阴性，实验组培育阴性，断定为灭菌合格；阳育阴性，实验组培育阴性，断定为灭菌合格；阳性对照组培育阳性，阴性对照组培育阴性，实验性对照组培育阳性，阴性对照组培育阴性，实验组培育阳性，断定为灭菌不合格；同

28、时应进一步组培育阳性，断定为灭菌不合格；同时应进一步鉴定实验组阳性的细菌能否为指示菌或是污染菌鉴定实验组阳性的细菌能否为指示菌或是污染菌所致。所致。 指示菌株：枯草杆菌黑色变种芽胞指示菌株：枯草杆菌黑色变种芽胞ATCC 9372ATCC 9372，菌片，菌片含量为含量为5.05.0105cfu/105cfu/片片5.05.0106cfu/106cfu/片。片。D160D160值值1.3min1.9min1.3min1.9min，KTKT值为值为19min19min，STST值值3.9min3.9min。 检测方法：将枯草杆菌黑色变种芽胞菌片分别装入灭菌检测方法：将枯草杆菌黑色变种芽胞菌片分别装

29、入灭菌中试管内中试管内1 1片片/ /管。灭菌器与每层门把手对角线内、管。灭菌器与每层门把手对角线内、外角处放置外角处放置2 2个含菌片的试管，试管帽置于试管旁，关好个含菌片的试管，试管帽置于试管旁，关好柜门，经一个灭菌周期后，待温度降至柜门，经一个灭菌周期后，待温度降至8080时，加盖试时，加盖试管帽后取出试管。在无菌条件下，参与普通营养肉汤培管帽后取出试管。在无菌条件下，参与普通营养肉汤培育培育基育培育基(5ml/(5ml/管管) )，363611培育培育48h48h，察看初步结果，察看初步结果，无菌生长管继续培育至第无菌生长管继续培育至第7 7日。日。 结果断定：阳性对照组培育阳性，阴性

30、对照组培结果断定：阳性对照组培育阳性，阴性对照组培育阴性，假设每个指示菌片接种的肉汤管均廓清，育阴性，假设每个指示菌片接种的肉汤管均廓清，断定为灭菌合格；阳性对照组培育阳性，阴性对断定为灭菌合格；阳性对照组培育阳性，阴性对照组培育阴性，而指示菌片之一接种的肉汤管混照组培育阴性，而指示菌片之一接种的肉汤管混浊，判为不合格；对难以断定的肉汤管，取浊，判为不合格；对难以断定的肉汤管，取0.1ml0.1ml接种于营养琼脂平板，用灭菌接种于营养琼脂平板，用灭菌L L棒或接种环涂匀，棒或接种环涂匀，置置363611培育培育48h48h，察看菌落形状，并做涂片，察看菌落形状，并做涂片染色镜检，判别能否有指示

31、菌生长，假设有指示染色镜检，判别能否有指示菌生长，假设有指示菌生长，判为灭菌不合格；假设无指示菌生长，菌生长，判为灭菌不合格；假设无指示菌生长，判为灭菌合格。判为灭菌合格。 指示菌株：枯草杆菌黑色变种芽胞ATCC 9372，菌片含量为5.0105cfu/片5.0106cfu/片。在环氧乙烷剂量为600mg/L300mg/L，作用温度为542，相对湿度为60%10%条件下，其杀灭90%微生物的D值为2.6min5.8min，KT值为58min，ST值7.8min。 常规生物测试包的制备：取一个常规生物测试包的制备：取一个20ml20ml无菌注射器，无菌注射器，去掉针头，拔出针栓，将生物指示剂放入

32、针筒内，去掉针头，拔出针栓，将生物指示剂放入针筒内，带孔的塑料帽应朝向针头处，再将注射器的针栓带孔的塑料帽应朝向针头处，再将注射器的针栓插回针筒，不要踫到生物指示物，之后用一条全插回针筒，不要踫到生物指示物，之后用一条全棉小毛巾两层包裹，置于纸塑包装袋中，封装。棉小毛巾两层包裹，置于纸塑包装袋中，封装。 检测方法：常规生物测试包放在灭菌器最难灭菌的部位，即整个装载灭菌包的中心部位。灭菌周期完成后，应立刻将生物指示物从被灭菌物品中取出，接种于含有复方中和剂的0.5%的葡萄糖肉汤培育基中，361培育7天。 结果断定：阳性对照组培育阳性，阴性对照组培育阴性，实验组培育阴性，断定为灭菌合格；阳性对照组

33、培育阳性，阴性对照组培育阴性，实验组培育阳性，断定为灭菌不合格；同时应进一步鉴定实验组阳性的细菌能否为指示菌或是污染菌所致。 主要根据：主要根据： GB18466-2019GB18466-2019 2 2、卫生规范要求：、卫生规范要求： 规范中规定，医疗机构门诊、病房、手术室、各规范中规定，医疗机构门诊、病房、手术室、各类检验室、病了解剖室、放射室、洗衣房、太平类检验室、病了解剖室、放射室、洗衣房、太平间等处排出的诊疗、生活及粪便污水。当医疗机间等处排出的诊疗、生活及粪便污水。当医疗机构其他污水与上述污水混合排出时一概视为医疗构其他污水与上述污水混合排出时一概视为医疗机构污水。规范规定了污水中

34、多项污染物排放限机构污水。规范规定了污水中多项污染物排放限值，我们主要监测的目的是：粪大肠菌群及总余值，我们主要监测的目的是：粪大肠菌群及总余氯；其合格规范如下：氯；其合格规范如下： 2 2、卫生规范要求：、卫生规范要求： 对于传染病、结核病医疗机构：对于传染病、结核病医疗机构： 粪大肠菌群数粪大肠菌群数100 MPN/L 100 MPN/L ；总余氯；总余氯0.5 mg/L0.5 mg/L 2.22.2对于综合医疗机构和其他医疗机构：对于综合医疗机构和其他医疗机构： 粪大肠菌群数粪大肠菌群数500 MPN/L 500 MPN/L ；总余氯；总余氯0.5mg/L0.5mg/L 采样方法采样方法

35、 用采水器或其他灭菌容器采取污水样至少用采水器或其他灭菌容器采取污水样至少200mL200mL，放入灭菌瓶内，假设是经加氯处置的污水，需加放入灭菌瓶内，假设是经加氯处置的污水，需加1.51.5硫代硫酸钠溶液中和余氯。硫代硫酸钠溶液中和余氯。 另外应取一瓶另外应取一瓶不加中和剂的污水，用于总余氯的检测。不加中和剂的污水，用于总余氯的检测。 粪大肠菌群的检验程序：粪大肠菌群的检验程序： 样品处置：确定样品的量，粪大肠菌群数量相对样品处置：确定样品的量，粪大肠菌群数量相对较少的接种量普通为较少的接种量普通为1010、1 1、0.1ml0.1ml；数量较多的；数量较多的接种量为接种量为1 1、0.10

36、.1、0.01ml0.01ml或或0.10.1、0.010.01、0.001ml0.001ml等。接种量小于等。接种量小于1ml1ml时，水样应制成稀释样品后供时，水样应制成稀释样品后供发酵实验运用。发酵实验运用。 发酵实验：将样品接种于乳糖胆盐培育液的试管发酵实验：将样品接种于乳糖胆盐培育液的试管中内有小倒管，中内有小倒管，4444培育培育24h24h。污水取三个接。污水取三个接种量，每个接种量的样品分别接种于种量，每个接种量的样品分别接种于5 5个试管内，个试管内，共共1515支试管。接种方法如下：支试管。接种方法如下： 接种量为接种量为10ml10ml时，汲取时，汲取10ml10ml样品接种于样品接种于5ml5ml