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文档简介
1、2021/8/21石蜡切片制作-冲洗、脱水、包埋、切片2021/8/221、取材、取材 小鼠新鲜尸体上取脾、肌肉、肝等组织;2、固定、固定 将取出的材料投入预先配好的4中性甲醛固定 液,使细胞的蛋白质变性凝固,以防止细胞死后自溶 或细菌分解,从而保持细胞本来的形态结构;3、冲洗、冲洗 (本次实验本步骤省略)2021/8/234、脱水、脱水 将固定好的材料置于一般用由低浓度到高浓度的酒精脱水剂,逐渐脱去组织块中的水份:75%乙醇,过夜85%乙醇,1h95%乙醇,1h100%乙醇,30 min100%乙醇,30 min100%乙醇,30 min;5、透明、透明 再将组织块按以下程序置于透明:二甲苯
2、(酒精:二甲苯=1:1),30min二甲苯,30min二甲苯,30min; 6、浸蜡、浸蜡 将已透明的组织块置于已溶化的石蜡中浸蜡:石蜡(二甲苯:石蜡=1:1),30min石蜡,30min 石蜡,30min; 7、包埋、包埋 用加热的弯头镊子轻轻夹取已经过浸蜡的组织块,平正地置放于包埋底模的中央处,加入已溶化的石蜡,迅速放在冷台上,待包埋底模内的熔蜡凝固后,将一体的蜡块和包埋盒从包埋模具内取出,备用。2021/8/248、切片、切片 包埋好的蜡块用刀片修成规整的方形或长方形,夹在轮转式切片机的蜡块钳内,使蜡块切面与切片刀刃平行,旋紧。通常切片厚度为4-7m,切出一片接一片的蜡带,用毛笔轻托轻放
3、在纸上;切取可供使用的蜡片,置与温水内展片。9、贴片与烤片、贴片与烤片 采用水捞片法将展好的蜡片置于载玻片上,打开烤 箱,设定60,烤片2小时,备用。 2021/8/25石蜡包埋的注意事项1.作为包埋组织使用的石蜡不仅由于气候的不同需要加以选择,而且与组织的硬度也有密切关系,过硬的组织最好用硬度较高的石蜡包埋,反之,软组织则应以硬度较低的石蜡包埋。其熔点一般要求再60左右。 2.包埋用石蜡加温不可过高,以保持其不凝固为度,温度过高容易将组织烫坏,使得组织变硬,变脆,并发生卷曲,收缩变形而不利于切片,甚至影响诊断。另外注意埋蜡的温度和组织本身的温度,两者是否合适,温度不一致常可造成组织与周围石蜡脱裂的现象,而达不到包埋的作用。3. 包埋应注意组织病变面放在下面,并尽可能使组织放平,在不损伤组织的情况下可用镊子轻压。4.囊壁和消化道等组织包埋时更应注意组织方位,应将组织块直立拉平,不要卷曲。5.相同组织如包埋于一个蜡块时,除包平外,还要注意方向的一致,以利切片。6.多块组织和碎组织包埋于一个蜡块内时,组织的排列一定要密挤靠拢,以求成直线或方块行,这样有利于切片。7.石蜡包埋后,不宜冷凝过慢,特别是室温较高时,石蜡凝固后应立即投入冷水中加速冷却可增加石蜡密度,韧性和硬度。但冷凝过速也会因为内外温差过大造成蜡块裂损。2021/8/26写一份完整的石蜡切
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