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文档简介

1、综合设计实验1矿质元素对植物的作用红色的问题见后附照片1、本次实验名称?分为哪两局部?诱导产生NR增强其活性2、NR有何特性?何谓诱导酶?NR为诱导酶,不供给硝酸根之前,不会产生.诱导酶3、针对上述特性实验中采取何举措? “真空渗入法在步骤中何处表达?举措:提前一天用硝酸盐叶面喷施,增强活性表达:反响时,将三角瓶放在真空枯燥器中,用真空泵抽气放气,直至叶片 沉入瓶底4、实验中N所起作用?诱导产生NR增强其活性5、何谓磺胺比色法?亚硝态氮在酸性溶液中与对氨基苯磺酸形成重氮盐,再与a-蔡胺定量生成红色偶氮化合物,在520nm有最大吸收峰.6、NR活力以什么表示?步骤中何处有关键作用?用产生的亚硝态

2、氮的量表示.关键作用就是 21页的考前须知.7、标准曲线操作顺序如何?两人如何配合?制备标准溶液、制备显色液、绘制标准曲线.要默契地配和,一人在做实验 的同时,另一人要负责记录.8、为何标准溶液用NaNO§液不用NaN标准溶液浓度是多少?由于硝酸复原酶活性可由产生亚硝态氮的量表示,而不是用NO3表示,所以用NaNO2g示.标准溶液浓度是1微克每毫升.9、标准溶液和谁在什么条件下显色多久?比色波长是多少?在硝酸复原酶活性的测定实验中,三角瓶 30度下置于黑暗处恒温箱、水浴 锅等保温30min,在520nm波长下比色;硝态氮含量测定实验中,常温下放置 20min,再参加8%NaoHS7取

3、9.5ml ,摇匀冷却至室温,在 410nm波长下比色 10、如何获得标准曲线或回归方程?通过使用标准溶液得到的实验数据,确立好横竖坐标运用电脑软件制作.11、取样应注意什么?第一、仪器不能混用,严格根据组别及标签按要求使用;第二、材料叶片要用湿纱布擦拭干净,用蒸储水冲洗,滤纸或干纱布吸干12、植物材料如何净化?采回来的材料叶片要用湿纱布擦拭干净,用蒸储水冲洗,滤纸或干纱布吸干.13、叶圆片如何获得,需要多少个叶圆片?14、如何保证叶片等重?为何要等重?每份重量是多少?15、两个三角瓶中为何一个参加 F20,另一个加KNQ16、三角瓶中为何放入PH7.5缓冲液?17、为何要用真空泵抽气?使用中

4、应注意什么?真空泵抽气影响N02的浸出量. 预防液态水进入泵腔18、 抽气时有何现象发生?抽气到何时何种程度为止?1由于反复抽气放气,溶液可渗入叶组织取代叶片空气, 叶片便沉于溶液底部,酶促反响可以相对完全的进行.2抽气到叶片沉淀19、 抽气后三角瓶置于何处?什么条件?多长时间?显色反响在黑暗处恒温箱、水浴锅等进行 30分钟20、三角瓶取出后显色反响在何容器中进行?为何先加磺胺,后加苯胺?21、上述溶液显色反响时间多长?波长?空白?30min , 520nm 空白组一样22、假设三角瓶取出后显色反响不马上进行,对实验结果有无影响?更高还是更低?有影响,更高还是更低我也不知道,我个人觉得更低23

5、、请演算板书NR活性计算公式硝酸复原酶活性gg-1 - h-1 = N02-含量-N02-含量X 10/W/X t24、NR活性计算公式中t为多少?公式中X 1比何用意?0.5h ;因取反响液的十分之一做后面实验,恩大概就这意思吧25、如何获彳导NO、NO-含量?26、NO-测定中,与其反响的物质为什么?试剂中酸的作用?27、该反响产物有无颜色?如何才能显色?应参加何物?28、该曲线操作为何与前述不同?区别在哪?比色波长为多少?29、实验材料如何处理?称重多少?处理:将材料用湿纱布擦拭干净,用蒸储水冲洗,滤纸吸干.称取:酶活性测定称取0.3-0.5,硝态氮含量测定准确称取2g30、用何试剂在何

6、处多少摄氏度下提取?管口如何处理?酶活性测定:0.1mol/L,ph7.5磷酸缓冲液在30度水浴硝态氮含量测定:无机离子在沸水浴中处理,管口用玻璃泡封口31、提取结束为何要冷却?定容至多少?如何保证不损失?由于要在室温下进行实验,定容至25ml容量瓶,反复冲洗几次保证不损失332、取样品液多少?与何试剂(多少)反响?取样品液0.1ml,与5%K杨酸一硫酸溶液0.4ml反响,再与9.5ml8%氢氧化 钠反响33、多长时间后参加多少8%NaOH液?取样参加水杨酸硫酸后,静止20分钟参加34、该测定空白为什么?波长为多少?进行比照,410波长35、请演算NG-N含量计算公式.氮含量=C*V/W36、

7、上述计算公式其中C, V W分别代表什么?硝态氮含量(mg g-1FW) = (C x V)/WC为标准方程计算得NO3 N浓度(ug ml)V为提取样品液总量(ml);W为样品鲜重(g).37、以上公式中C如何获得?C为标准方程计算得NO3 N浓度(ug ml)综合设计实验2植物利用光能的生理根底1、叶绿素在红光区和蓝光区都有吸收峰,能否用蓝光区的吸收峰波长进行叶绿素的定量分析?为什么?不能,由于叶绿素a和叶绿素b在百分之96乙醇中最大洗手峰的波长不同, 用分光光度计测定各种叶绿体色素的含量时,对分光光度计的波长精确度要求较 高,如果波长与原吸收峰波长相差1nm那么叶绿素a的测定误差为百分之

8、二,叶 绿素b为百分之十九,因此,在使用前必须严格种植不同叶绿素的最大吸收峰波 长.2、选择80%丙酮提取叶绿体色素时,叶绿素 a、叶绿素b和类胡萝卜素的 吸收峰值分别是多少纳米?663nm,645nm,470nm3、选择96%乙醇提取叶绿体色素时,叶绿素 a、叶绿素b和类胡萝卜素的 吸收峰值分别是多少纳米?665nm,649nm,470nm4、选择不同试剂提取叶绿体色素时,叶绿体色素计算公式有无不同?请板 书用96%乙醇提取时的三个公式.答案在26页实验结果处5、提取干材料中叶绿体色素一定要用 96%乙醇80%丙酮,而新鲜材料 可以用无水乙醇无水丙酮提取,为什么?混合液浸提法提取叶绿体色素6

9、、叶绿体色素提取有那几种方法,实验教学中直选用其中哪一种?为什 么?水浴提取法提取叶绿体色素.应选用水浴提取法提取叶绿体色素,由于研磨 法研磨过程中丙酮的挥发,研磨后转移匀浆时容易出现误差,而混合液浸提法需 要时间充足或样品太多7、叶绿体色素提取及测定为什么要在弱光下进行?该提取液含有哪几种色 素?01短.叶绿素和类胡萝卜素8、叶绿体色素定量分析应称取多少植物样品,由什么因素决定?0.20.5g由叶绿体色素提取方法决定,研磨法提取叶绿体色素样品为0.2-0.5g ,混合液浸提法提取叶绿体色素样品为 0.1-0.2g ,水浴提取法提取 叶绿体色素样品为0.2-0.5g9、植物样品放入试管后需参加

10、 96%乙醇多少毫升,在何温度下水浴多长时 问?15ml然后放入7080摄氏度的水浴锅中浸提,直至叶片成黄白色10、定容前植物样品应到达何种程度?定容至多少毫升?研磨至组织变白.定容至25毫升11、提取时参加96%乙醇的量能否改变?提取时间及浸提次数作何调整?12、叶绿体色素定量分析为何不需制作标准曲线,比色时空白对照为何 物?答:1. ?2 、如果提取液为80殉酮,采用80殉酮为空白.如果用96%勺乙醇提取, 那么用96%的乙醇为空白13、用于叶绿体色素别离与定量分析所用的提取液相比拟,谁的浓度更高?叶绿体色素别离所用的提取液浓度更高叶绿色素提取液须用丙酮溶液适当稀释后才可作理化性质观察14

11、、本实验中短时间内如何制备别离所需色素溶液?用23g新鲜叶片,以80%5酮或95%S醇研磨提取过滤于三角瓶中备 用15、如何将叶绿体色素溶液涂抹至长滤纸条,用何工具?涂在哪一侧? 用毛细管吸取浓的叶绿体色素提取液涂抹在滤纸条一侧长边16、别离过程中涂抹叶绿体色素的次数为多少次?每次均要保证什么?2030次,要保证涂抹均匀且要风干后涂,色素要多涂抹几次,风干会再涂 抹第二次,细、匀、直、滚.涂抹的色素要适量,量多易发生拖尾,量少色素带 看不清.17、长滤纸条风干后如何与圆形滤纸结合?应注意什么?长滤纸条风干后卷成纸捻插入圆形滤纸的小孔中,使之与圆形滤纸齐平.应 注意纸捻不能突出,圆形滤纸在中央打

12、的小圆孔,其周围必须整洁,否那么别离的 色素不是一个同心圆18、上述物件应放入何处,其中盛有何种液体,它由哪几种有机物根据何 种比例配制?插有纸捻的圆形滤纸平放在康维皿上,其中盛有推动剂,按石油醴:丙酮:苯=10:2:1比例配制19、随着时间推移,圆形滤纸上会出现什么变化?何时应将圆形滤纸取出自然风干?会出现被别离的各种色素同心圆环;当推动剂扩散至康维皿边沿时20、何谓分配系数,上述别离过程中流动相、固定相分别指什么?分配系数:在平衡状态下组分在固定相与流动相中的浓度之比;固定相:与长滤纸条结合的96%醇;流动相:各叶绿体色素21、请板书chla与KOHS应方程式.叶绿素a+KOH母醇+皂化叶

13、绿素22、请表达上述皂化反响过程,简单介绍操作过程.反响过程P23倒数第二段前两句叶绿素是一种双竣酸叶绿酸与甲醇和 叶绿醇形成的复杂酯.在碱的作用下,发生皂化反响,生成醇甲醇与叶绿醇 和叶绿素的盐皂化叶绿素操作过程p27 5,皂化反响23、上述反响发生后为何要先参加 3毫升苯再参加1毫升水?它们各自起 何作用?苯是有机溶剂,溶解类胡萝卜素和叶黄素,水溶解反响生成的盐皂化叶绿 素24、反响结束后上、下两层分别为何溶液,各自含有哪些物质?上层是笨溶液,溶有黄色的胡萝卜素和叶黄素;下层是稀的乙醇溶液,溶 有皂化叶绿素a和皂化叶绿素b25、何谓叶绿素荧光现象?如何观察叶绿素荧光现象?叶绿素荧光现象产

14、生的原因是什么?叶绿素吸收光量子转变成激发态的叶绿素分子, 很不稳定,当其回到基态时可发出荧光的现象将浓的叶绿体色素提取液放在试管内,在直射光下观察色素溶液在透射光下及反 射光下的颜色.原因:1对着光源观察叶绿素提取液时,看到的是叶绿素的吸收光谱.由于叶 绿素提取液吸收的绿光局部最少,故用肉眼观察到的为绿色透射光.2背光源观察叶绿素提取液时,看到的是叶绿素分子受激发后所产生的发射光谱.当叶绿素分子吸收光子后,就由最稳定的、能量最低的基态提升到一个不稳定的、 高能 量的激发态.由于激发态不稳定,因此发射光波 此光波即为荧光,消失能量, 迅速由激发态回到基态.26、为什么叶绿体色素提取液能观察到荧

15、光现象而植株上的叶片看不到荧 光?荧光现象:是指叶绿素在透射光下为绿色,而在反射光下为红色的现象,这 红光就是叶绿素受光激发后发射的荧光.叶绿素溶液的荧光可达吸收光的10%生 右.而鲜叶的荧光程度较低,指占其吸收光的 0.11%左右.27、为什么叶绿素容易发生取代反响?在弱酸作用下,叶绿素分子中的镁被氢离子取代生成褐色的去镁叶绿素, 后者遇乙酸铜那么形成蓝绿色的铜代叶绿素.28、取代反响中参加30%醋酸后,由何种离子取代叶绿素中何物? 参加醋酸后,氢离子取代镁离子,形成去镁叶绿素.29、取代反响中进一步参加醋酸铜粉末后,是何种离子取代之前那种离 子?去镁叶绿素易与铜离子结合,形成铜代叶绿素30

16、、反响中参加醋酸铜粉末后需作何处理,参加醋酸铜粉末的量需不需要 限制?微热,木习习坑曰:你说需要不需要呢它既然问了,必须限制啊,多了多 浪费综合设计实验3矿质元素对植物的作用1、脯氨酸在何条件下与何种物质生成稳定的红色缩合物?脯氨酸在酸性条件下与印三酮反响生成稳定的红色缩合物.00002、上述红色缩合物为何要用甲苯萃取?比色波长是多少nnrP由于在测定液中含有某些也能与印三酮发生反响的成分,这些成分的反响产物也同样可以吸收520nm光,如果不用甲苯萃取,会导致 ODfi偏高,用甲苯萃 取,这些成分的反响产物不溶于甲苯, 所以可以降低实验误差.并且甲苯对生成 稳定的红色缩合物可以充分溶解3、脯氨

17、酸标准溶液浓度为多少?用前稀释多少倍,浓度为多少? 100ug每毫升,用前稀释10倍,为10ug每毫升.4、标准曲线制作中各管参加冰乙酸、酸性西三酮分别为多少ml?分别为2ml和3ml5、上述显色液应在多少C水浴多长时间?如何处理后用甲苯萃取?100摄氏度40min,冷却6、脯氨酸提取叶片重量如何确定?处理与对照需等重么? 天平称取,不需要7、用何种试剂提取植物材料中脯氨酸?多少C水浴多长时间?3%勺磺酸水杨酸溶液,100摄氏度10min8、脯氨酸提取液有无颜色?如何令其显色?无,加西三酮9、该显色剂如何配制,如何保证其充分显色?称取1.25g甫三酮溶于30mL冰乙酸和20mL6M磷酸溶液中,

18、搅拌加热低于70C溶解,冷却后置棕色瓶中沸水浴加热40min10、脯氨酸含量计算公式 V和A分别为多少ml?V 为 5ml A 为 2ml11、可溶性糖在何条件下生成糠醛或羟甲基糠醛化合物? 沸水浴12、上述产物与何种物质作用形成蓝绿色络合物糠醛衍生物?在何波长比色?慈酮试剂 625nm13、葡萄糖标准液为何浓度?标准曲线制作过程稀释至何系列浓度?200 微克每毫升;0100微克每毫升14、上述稀释后系列浓度葡萄糖标准液各取多少 ml,与多少ml、何种物质反响 显色?一毫升;加5mllc酮试剂15、显色过程需要在多少C水浴多长时间?沸水;10min16、为什么要将显色时间限制在一定范围以内?由

19、于意酮与可溶性糖反响的呈色强度随时间变化,故必须在反响后立即在同 一时间内比色17、可溶性糖提取液定容后为何要过滤?否那么对反响有何不良影响?以防有残渣 不能准确测出可溶性糖的含量 由于细胞壁中的纤维素、半纤维 素等与慈酮试剂发生反响.增加了测定误差.18、过滤后提取液1ml与5mllc酮试剂反响过程应注意哪些问题?由于意酮与可溶性糖反响的呈色强度随时间变化,故必须在反响后立即在同 一时间内比色.烧杯保持枯燥,充分搅拌缓慢参加 5ml浓硫酸 浓硫酸遇水会产 生大量的热19、慈酮试剂如何配制、如何保存?100mg经过纯化的慈酮溶于100ml硫酸溶液76ml相对密度1.84的浓硫酸加24ml水贮藏在棕色瓶中20、可溶性糖含量计算结果为何单位?ug 每 ml21、应用慈酮法测得的可溶性糖包括哪些?戊糖与已糖,所有寡糖类和多糖类,其中包括淀粉、纤维素等22、何谓电导率?为何逆境胁迫能使溶液电导率值增大?电导率是以数字表示的溶液传导电流的水平.植物组织受到逆境伤害时,由 于膜的功能受损或结构破坏透性增大,细胞内各种水溶性物质不同程度的外渗, 将植物组织浸入无离子水中,水的电导率将因电解质的外渗而加大,伤害愈重, 外渗愈多,电导率的增加也愈大P55实验根本原理23、电导率测定对水和容器有何要求?应该如何保证?要求水清澈、流

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