2.1实验室培养解析

1、专题 2 微生物的培养与应用2.1 微生物的实验室培养一、选择题 12X41 . 在培养基的配制过程中，具体有如下步骤，其正确顺序为()溶化 调 pH 加棉塞包扎 分装称量A B C D 【答案】 B【解析】上述步骤中，培养基的配制顺序为称量-溶化-调pHH分装-加棉塞-包扎，B正确。2 下列有关倒平板操作的叙述，错误的是()A 将灭过菌的培养皿放在火焰旁的桌面上B 使打开的锥形瓶瓶口迅速通过火焰C 将培养皿打开，培养皿盖倒放在桌面上D 等待平板冷却凝固后需要倒过来放置【答案】C【解析】整个倒平板过程要防止外来杂菌的入侵，因此灭过菌的培养皿应放在火焰旁，A 正确；打开的锥形瓶瓶口应迅速通过火焰

2、， B 正确；培养皿应打开一条稍大于瓶口的缝隙，而不能将培养皿盖完全打开， C错误；平板冷却凝固后需要倒过来放置， D 正确。3 下列关于制备牛肉膏蛋白胨培养基的叙述，错误的是()A 培养基应先调 pH 再进行灭菌B 培养基应先灭菌再分装到培养皿C 熔化琼脂时要不断用玻璃棒搅拌D 使用高压蒸汽灭菌锅时直接将灭菌锅密封加热【答案】D【解析】把灭菌锅内的水加热煮沸，将其中原有的冷空气彻底排出后，将锅密闭，继续加热使锅内气压逐步上升。4 .下列有关平板划线接种法的操作错误的是()A 将接种环放在火焰上灼烧B 将已冷却的接种环伸入菌液中蘸取一环菌液C 沾取菌液和划线要在火焰旁进行D 接种环划线要将最后

3、一区的划线与第一区的划线相连【答案】DC 正确；每次划线之前都需灼烧灭菌，划【解析】为了避免杂菌污染，沾取菌液和划线要在火焰旁进行，线操作结束仍需灼烧接种环，A正确；灼烧接种环之后，要冷却后才能伸入菌液，以免温度太高，杀死菌种，B正确；在平板划线时不要将最后一区的划线与第一区相连，D错误。5 .如图为纯化大肠杆菌的一个操作环节，下列相关叙述中，错误的是 （）A .该操作步骤是接种，方法是平板划线法B.除第一次划线外，以后的每一次划线的起点是上一次划线的末端C.图中细菌密度最小的是 5处D.每次划线前要用酒精灯灼烧接种环，接着进行下次划线【答案】D【解析】 每次划线前都要灼烧接种环灭菌，然后等其

4、冷却后进行下次划线，D错误。6。稀释涂布平板法是微生物培养中的一种常用白接种方法。下列相关叙述错误的是（）A .操作中需要将菌液进行一系列的浓度梯度稀释B.需将不同稀释度的菌液分别涂布到固体培养基表面C.不同浓度的菌液均可在培养基表面形成单个菌落D.操作过程中对培养基和涂布器等均需进行严格灭菌处理【答案】C【解析】 若菌液浓度过大，形成的菌落连在一起，得不到单个的菌落，C错误。7 .下图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图，据图分析不正确的是（）8A 获得图A 效果的接种方法是稀释涂布平板法B 获得图B 效果的接种方法是平板划线法C 若在纯化土壤细菌时菌液浓度过高，培养基上的菌

5、落可能会连成一片D 在接种前要对培养基进行消毒处理【答案】D【解析】在接种前要对培养基进行高压蒸汽灭菌处理，D 错误。8 将接种后的培养基和一个未接种的培养基都放入37 恒温箱的目的是()A 对比观察培养基有没有被微生物利用B 对比分析培养基是否被杂菌污染C 没必要放入未接种的培养基D 为了下次接种时再使用【答案】B【解析】对未接种的培养基进行培养，起到对照作用，可确定培养基是否被杂菌污染，B 正确。9 利用稀释涂布平板法纯化的大肠杆菌，经培养后发现培养基上出现了多种菌落，不可能的原因是()A 培养基制备过程中被杂菌污染B 接种过程中，无菌操作不符合要求C 系列稀释时，无菌操作不符合要求D 大

6、肠杆菌的种类不同【答案】D【解析】大肠杆菌培养基中出现了多种菌落，说明污染了杂菌，杂菌可能来自培养基，也可能是因为操作过程中无菌操作不符合要求， A 、 B 、 C 正确；大肠杆菌就是一种类型的细菌，因此不会导致培养基上出现多种菌落， D 错误。10 .为了保持菌种的纯净需要进行菌种的保藏，下列有关叙述不正确的是()A 对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法B 临时保藏的菌种一般是接种到试管的斜面培养基上C .临时保藏菌种容易被污染或产生变异D 对于需要长期保存的菌种，可以采用低温4 保藏的方法【答案】 D【解析】低温4 保藏属于临时保藏的方法， 而对于需要长期保存的菌种， 需放在 20

7、的冷冻箱中保存，D 错误。11做 “微生物的分离与培养”实验时，下列叙述正确的是()A 高压灭菌加热结束时，打开放气阀使压力表指针回到零后，开启锅盖B 倒平板时，应将打开的皿盖放到一边，以免培养基溅到皿盖上C 为了防止污染，接种环经火焰后应趁热快速挑取菌落D.用记号笔标记培养皿中菌落时，应标记在皿底上【答案】D【解析】 高压灭菌加热结束，等待压力表指针回到零后，才能开启锅盖，不能打开放气阀使压力表指针回到零，A错误；倒平板过程中培养皿的皿盖打开一个稍大于瓶口的缝隙即可，B错误；接种环火焰上灼烧后,待冷却后才可以快速挑取菌落，C错误；用记号笔标记培养皿中菌落时，应标记在皿底上，D正确。12.下图

8、是实验室使用某种接种方法在培养基上培养某种微生物的结果，相关说法错误的是（）A .该图最可能是用稀释涂布平板法进行接种的B.在操作时，为防止杂菌污染，需进行严格的消毒和灭菌C.恒温培养箱中培养时需要将平板倒置D.该接种方法常用于微生物的分离纯化【答案】 A【解析】 培养基上微生物的分布有疏有密，应为平板划线法接种，该接种方法常用于微生物的分离纯化，A错误，D正确；在操作时，为防止杂菌污染，应对培养基和接种针等进行灭菌，对操作空间、衣着和手进行消毒，B正确；恒温培养箱中培养时需要将平板倒置，防止冷凝水滴在培养基上，C正确。二、非选择题 6X2=1213 .科学家发现家蝇体内存在一种抗菌活性蛋白，

9、这种蛋白质具有极强的抗菌能力，受到研究者重视。（1）可用金黄色葡萄球菌来检验该蛋白质的抗菌特性。抗菌实验中所用培养基中的牛肉膏和蛋白月东主要为细菌生长提供 和。（2）分别在加入和未加入该抗菌蛋白的培养基中接种等量菌液。培养一定时间后，比较两种培养基中菌落的,确定该蛋白质的抗菌效果。（3）细菌培养常用的接种方法有 和。实验结束后，对使用过的培养基应进行处理。【答案】（1）碳源氮源 （2）数量和大小 （3）平板划线法 稀释涂布平板法灭菌【解析】（1）牛肉膏和蛋白月东都是天然培养基成分，含有丰富的蛋白质、糖类等营养成分，可以为微生物的生长提供碳源和氮源以及生长因子。（2）通过对比加入和未加入该抗菌蛋

10、白的培养基中细菌菌落的数量和大小，确定该蛋白质的抗菌效果。(3)在培养细菌时，往往采用平板划线法和稀释涂布平板法进行接种；操作过程中用完的培养基都要进行灭 菌处理，以防止污染环境和对人造成感染。14 .下表是培养某微生物的培养基的配方，请回答下列问题：15X2=30试齐牛肉膏蛋白月东NaCl琼脂加水定容至MS5 g10 g5 g20 g1000 mL(1)培养基的类型很多，但培养基中一般都含有水、碳源、 和无机盐。上述培养基配方中能充当碳 源的成分是。培养基配制完成以后，一般还要调节pH并对培养基进行 处理。(2)微生物在生长过程中对各种成分的需要量不同，配制培养基时各成分要有合适的。在烧杯中

11、加入琼脂加热时要不停地 ,防止。(3)将配制好的培养基分装到试管中，加棉塞后，若干个试管一捆，包上牛皮纸并用皮筋勒紧放入中灭菌，压力为 kPa,温度为,时间为 。灭菌完毕拔掉电源，待锅内压力自然降到 0时，将试管取出。如果棉塞上沾有培养基，此试管应 。(4)使用高压蒸汽灭菌锅时应注意，先向锅内倒入 。把锅内水加热煮沸并将其中原有冷空气彻底排 出后，将锅密闭。(5)从一支试管向另一支试管接种时应注意，接种环要在酒精灯 (填 内”或 外”焰灭菌，并且待接种 环 后沾取菌种，试管口不能离开酒精灯火焰附近。将接种的试管在适温下培养，长成菌落后放入C冰箱中保藏。【答案】(1)氮源 蛋白月东和牛肉膏灭菌

12、(2)比例 搅拌 琼脂糊底引起烧杯破裂(3)高压蒸汽灭菌锅 100 121c 1530 min 废弃 (4)适量水 (5)外 冷却 4【解析】(1)培养基中一般都含有水、无机盐、碳源、氮源。培养基配制完成后要调pH和灭菌。牛肉膏、蛋白陈中含碳元素，可作为有机碳源。(2)在配制培养基时营养要协调，按所培养微生物对各种成分的需求确定其成分及比例；在加入琼脂后，要 不断搅拌，防止琼脂糊底而导致烧杯破裂。(3)培养基的灭菌应用高压蒸汽灭菌锅，在压力为 100 kPa、温度为121c条件下，灭菌1530 min。若棉塞 上沾有培养基，易被杂菌污染，应废弃。(4)高压蒸汽灭菌锅操作步骤为先向锅内倒入水，加

13、热煮沸，将冷空气排出，将锅密闭，继续加热使锅内气 压和温度上升到需要的程度。(5)酒精灯外焰温度高，灭菌效果好。灼烧后待冷却再沾取菌种，否则会烫死菌种造成实验失败。15 .下图甲、乙是微生物接种常用的两种方法，请回答相关问题：1X10=10(1) 图甲是利用 法进行微生物接种，图乙是利用 法进行微生物接种。这两种方法所用的接种工具分别是和；对这两种接种工具进行灭菌和消毒的方法依次是和酒精消毒。(2) 平板划线时，为保证微生物的数目随划线次数的增加而逐步减少，每次划线都要从 开始，平板划线结束后，最后一次划的线不能与第一次划的线 。(3) 接种操作为什么一定要在火焰附近进行？ 。(4) 下图是接种后培养的效果图解，其接种方法是(填 “图甲 ”或 “图乙 ”) 。(5) 假 设 用 图 乙 所 示 方 法 接 种 培 养 结 束 后 ， 发 现 培 养 基 上 菌 落 连 成 一 片 ， 可 能 的 原 因 是 什 么 ？【答案】 (1)平板划线 稀释涂布平板接种环 涂布器 灼烧灭菌(2) 上一次划线的末端相连(或相接、相交、交叉等)(3) 火焰附近存在着无菌区域(4) 图乙(5) 稀释倍数不够，菌液的浓度太高