高效液相色谱思考题与练习题

1、思考题与练习题1 .高效液相色谱是如何实现高效、快速、灵敏的解：气相色谱理论和技术上的成就为液相色谱的发展创造条件，从它的高效、高速和高灵敏度得到启发，采用5-10 pm微粒固定相以提高柱效，采用高压泵加快液体流动相的流速；设计高灵敏度、死体积小的紫外、荧光等检测器，提高检测灵敏度，克服经 典液相色谱的缺点，从而达到高效、快速、灵敏。2 .简述液相色谱中引起色谱峰扩展的主要因素，如何减少谱带扩张，提高柱效解：液相色谱中引起色谱峰扩展的主要因素为涡流扩散、流动相传质、停留流动相传质及柱外效应。在液相色谱中要减少谱带扩张，提高柱效，要减少填料颗粒直径，减小填料孔穴深度，提高装填的均匀性，采用低黏度

2、溶剂作流动相，流速尽可能低，同时要尽可能 采用死体积较小的进样器、检测器、接头和传输管线等。3 .色谱柱A柱长为15cm,载体粒度为5 dmi另一B柱长为30cm,载体粒度为10 dmi两柱的柱效相等吗解：l=L/dp.lA=15/=30000lB= 30/=30000A柱的折合柱长为 30000, B柱的折合柱长也为 30000,表明组分在两根柱内从柱入口到 出口都经过30000个载体颗粒，两柱的柱效相等。4 .流动相为什么要脱气常用的脱气方法有拿几种解：流动相中溶解气体存在以下几个方面的害处(1)气泡进入检测器，引起光吸收或电信号的变化，基线突然跳动，干扰检测；(2)溶解在溶剂中的气体进入

3、色谱柱时，可能与流动相或固定相发生化学反应；(3)溶解气体还会引起某些样品的氧化降解，对分离和分析结果带来误差。因此，使用前必须进行脱气处理。常用的脱气法有以下几种：(1)加热脱气法；(2)抽吸脱气法(3)吹氨脱气法；(4)超声波振荡脱气法。5 .在液相色谱中。常用作固定相，又可用作键合相基体的物质是A.分子筛 B.硅胶 C.氧化铝 D.活性炭解：B硅胶要形成化学键合固定相，所用的基质材料应有某种化学反应活性，在四种固体固定相中只有硅胶含有硅醇基，是能进行键合的活性官能团。6 .在150X2mm硅胶柱流动相为己烷/甲醇(150:2 ),紫外检测器色谱条件下分离丙烯酰胺，判断以下组分的出峰次序，

4、为什么0A_ IID_ IIA.一二-二-1 B.一H C解：在给定的色谱条件下，组分 B先出峰，组分A后出峰。以硅胶为固定相，己烷/甲醇(150:2 )为流动相，该体系为正相色谱，样品的极性 A>B在正相色谱体系极性小的组分先出峰，极性大的组分后出峰，所以出峰次序为 B先出，A后出。7 .在硅胶柱上，用甲苯为流动相，某组分的保留时间为 30min,如果改用四氯化碳或乙醛为流动相，试指出选用哪中溶剂能减少该组分的保留时间为什么解:该体系为正向色谱体系。在该体系中流动相的极性增大保留值减少。流动相甲苯、四氯化碳及乙醛的溶剂强度参数分别是、，因此选用溶剂强度参数大于甲苯的乙醒，可缩短该化合物

5、的保留时间。8.为什么体积排阻色谱中任何组分的分配系数必须符合0WKW1如果K>1说明什么问题解：因为组分的分配系数为 K=Cs/Cm,Cs与Cm#别为组分在固定相和流动相中的浓度，当分子直径大于孔径时，此时Cm=0jK=0.当分子直径小于固定相孔径时，组分向空隙内流动相扩散，达到平衡时，一半组分在空隙内，一半组分在空隙外，此时K=，若分子直 径介于以上两种极限情况之间,K 一定介于0与1之间，可见体积排阻色谱中，任何祖父呢的分配系数为0WKW 1,如果K>1说明此时的分离方式已不是纯粹的体积排阻色谱，其分离过程受到其他作用力（如吸附）的支配.9.为了测定邻氨基苯酚中微量杂质苯胺，

6、现有下列固定相：硅胶,ODS键合相，流动相有：水-甲醇，异丙醛-己烷，应选用哪种固定相，流动相为什么解：邻氨基苯酚中微量杂质苯胺测定 ，为了良好分离,应让苯胺先出峰，由于苯胺的 极性小于邻氨基苯酚，因此应采用正相色谱法，选用硅胶为固定相，异丙醛-己烷为流动 相.10.在OD璇合相固定相,甲醇-水为流动相时试判断四种苯并二氮杂苯的出现峰顺序.为什3.4.解：色谱条件为反相键合相色谱体系，在反相色谱体系中极性大的组分k小,首先出峰，按四种苯并二氮杂苯的结构，出峰顺序为4-3-2-1.自测题1.在GC和LC中，影响柱选择性的不同的因素是A.固定相的种类； B.柱温；C.流动相的种类；C D.分配比。

7、2.在液相色谱中，范氏方程中的哪一项对柱效能的影响可以忽略不计A.涡流扩散项；B.分子扩散项；C.固定相传质阻力项；D.流动相中的传质阻力。3.在液相色谱中，某组分的保留值大小实际反映了哪些部分的分子间作用力A.组分与流动相；B.组分与固定相；C.组分与流动相和固定相；D.组分与组分。4.在液-固色谱法中，以硅胶为固定相，对以下四组分，最后流出色谱柱的组分可能是° A.苯酚；0B.苯胺； C C.邻羟基苯胺；0 D.对羟基苯胺。5 .在液-固色谱法中，以硅胶为固定相，对以下四组分，最后流出色谱柱的组分可能是口 A.苯酚；B.苯胺； C.邻羟基苯胺；C D.对羟基苯胺。6 .用液相色谱

8、法分离长链饱和烷烧的混合物，应采用下述哪一种检测器A.紫外吸收检测器；B.示差折光检测器；C.荧光检测器；D.电化学检测器。7 .液-液色谱法中的反相液相色谱法，其固定相、流动相和分离化合物的性质分别为：A.非极性、极性和非极性；8 .极性、非极性和非极性；C.极性、非极性和极性；D.非极性、极性和离子化合物。8 .若在一个1m长的色谱柱上测得两组分的分离度为，若要使它们完全分离，则柱长（m）至少应为：rrr八rA.0.5 ;*B.2 ;1C.5;1D. 9。9 .在液相色谱中，梯度洗脱最宜于分离：A.几何异构体；B.沸点相近，官能团相同的试样；C.沸点相差大的试样；D.分配比变化范围宽的试样。10 .液-液色谱法中的反相液相色谱法，其固定相、流动相和分离化合物的性质分别为:口 A