学海导航高考生物一轮总复习第34讲DNA和蛋白质技术及植物有效成分的提取名师优质课件新人教版选修1

1、第第34讲讲 DNA和蛋白质技术及植物有和蛋白质技术及植物有效成分的提取效成分的提取 考点一 DNA 和蛋白质技术 一、DNA的粗提取和鉴定 1 基本原理 2 DNA与蛋白质在NaCl 溶液中溶解度比较 3. 实验流程 【例1】下图示以鸡血为实验材料进行 DNA的粗提提取与鉴定的操作程序，请分析回答下列问题： (1) 步骤1 中，向鸡血细胞液中加入_并搅拌，可使鸡血细胞破裂。 (2) 步骤2 ：过滤后收集含有DNA的_。 (3) 步骤3 、4 的操作原理是_。 解析： (1) 步骤1 中需向鸡血细胞中加入蒸馏水，以促进细胞吸水涨破，释放DNA 。 (2) 由于DNA存在于滤液部分，故过滤后应收

2、集滤液。(3) 步骤3 为用2mol/L的NaCl 溶液溶解DNA，步骤4 为 用0.14mol/L的NaCl 溶液析出DNA。 答案： (1) 蒸馏水 (2) 滤液 (3) DNA在不同浓度的NaCl 溶液中溶解度不同，通过控制NaCl 溶液的浓度去除杂质 蒸馏水 0.14 步骤4 通过向溶液中加入_调节NaCl 溶液的物质的量浓度为_mol/L 时，DNA将会析出，过滤去除溶液中的杂质。 (4) 步骤7 ：向步骤6 过滤后的_中，加入等体积的冷却的_，静置2 3 min ，溶液中会出现_色丝状物，这就是粗提取的DNA 。 (5) 步骤7 ：DNA遇_试剂，沸水浴5min ，冷却后，溶液呈_

3、色。 解析： (4) 向溶解有DNA 的滤液中加入95% 的冷酒精溶液可进一步析出DNA 。 (5) DNA 遇二苯胺在加热情况下显蓝色。 答案： (4) 滤液 酒精 白 (5) 二苯胺 蓝 二、PCR 技术 1 PCR过程 (1) 变性： 当温度上升到90 以上时，双链DNA解旋为单链。 (2) 复性： 温度下降到50 左右，两种引物通过碱基互补配对与两条DNA单链结合。 (3) 延伸： 温度上升到72 左右，溶液中的四种脱氧核苷酸(A、T、C、G)在DNA聚合酶的作用下，根据碱基互补配对原则合成新的DNA双链。 2 PCR 扩增技术和DNA 复制的比较 3. 蛋白质的提取与分离 (1) 凝

4、胶色谱法： (2) 电泳法原理： 在一定pH 下，蛋白质分子的某些基因解离后带上正电或负电，在电场的作用下，带电分子会向着与所带电荷相反的电极移动。 由于分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子本身的大小、形状不同，使带电分子产生不同的迁移速率，从而实现样品中各种分子的分离。 4 DNA、PCR 、蛋白质的分离比较 考点二 植物有效成分的提取 一、几种物质的提取方法、原理及步骤 不同物质的提取是根据其理化性质的不同来进行的，因此在提取物质时，应先确定该物质的理化性质，然后再选择适宜的提取方法进行提取。 二、水中蒸馏、水上蒸馏和水气蒸馏的区别 1 这三种方法的基本原理相同，但原料放置位置不同。

5、(1) 水中蒸馏：原料放在蒸馏容器的水中，水要完全浸没原料。 (2) 水上蒸馏：容器中水的上方有筛板，原料放在筛板上，水量以沸腾时不浸湿原料为宜。 (3) 水气蒸馏：蒸馏容器下方有一排气孔，连接外源水蒸气，上方有筛板，上面放原料。 2 各自特点：水中蒸馏设备简单、成本低、易操作，而水上蒸馏和水气蒸馏时间短，出油率高。 水中蒸馏对于柑橘和柠檬等原料不适用，因为水中蒸馏会导致原料焦糊和有效成分水解。 三、用层析法鉴定时应注意的问题 1 选择干净的滤纸，为防止操作时滤纸的污染，应尽量避免用手直接接触滤纸，可以戴手套进行操作。 2 点样时应注意点样斑点不能太大 (直径应小于0.5 cm) ，如果用吹风

6、机吹干，温度不宜过高，否则斑点会变黄。 3 将点好样的滤纸卷成筒状，卷纸时注意滤纸两边不能互相接触。以免因毛细现象导致溶剂沿滤纸两边的移动加快，使溶剂前沿不齐，影响结果。 【例2 】如图为提取胡萝卜素的装置示意图，请据图回答下列问题： (1) _ 的作用是_。 (2) _ 内加入的萃取液一般是_ ，原料在加入前，一般要进行_ 、_ 处理。 (3) 该萃取过程采用的是水浴加热，其目的是_。 (4) 为了取得最佳萃取效果，萃取的时间应该_ 。 解析：图示装置为萃取装置，其中为冷凝管，其作用在于降温，以防止加热使有机溶剂挥发；是烧瓶，其内装有萃取剂；胡萝卜素的适宜萃取剂是石油醚；为防止有机溶剂明火加热时引起燃烧