5 1含生物碱类成分中药制剂的分析精编版

1、第五章第五章 中药制剂中各类化学成分分析中药制剂中各类化学成分分析 各类化学成分的理化性质各类化学成分的理化性质 各类成分供试液的提取纯化制备方法各类成分供试液的提取纯化制备方法 各类成分定性鉴别的原理方法各类成分定性鉴别的原理方法 各类成分定量测定的原理和方法各类成分定量测定的原理和方法 第一节第一节 生物碱生物碱alkaloidalkaloid类成分分析类成分分析 了解生物碱的理化性质了解生物碱的理化性质 熟悉中药制剂内熟悉中药制剂内Alk定性鉴别的原理方法定性鉴别的原理方法 掌握掌握AlkAlk的供试液的提取纯化制备方法、定的供试液的提取纯化制备方法、定量测定的原理和方法量测定的原理和方

2、法 一、概述（了解） 生物碱是中药中重要的有效成分之一。生物碱是中药中重要的有效成分之一。 多具复杂的环状结构，有显著的生理作用。多具复杂的环状结构，有显著的生理作用。 至少有豆科、防已科、毛茛科、夹竹桃科、茄科、至少有豆科、防已科、毛茛科、夹竹桃科、茄科、石蒜科石蒜科50多科，多科，120属以上植物中有生物碱存在。属以上植物中有生物碱存在。 以双子叶植物最多，其次单子叶植物，裸子植物。以双子叶植物最多，其次单子叶植物，裸子植物。以罂粟科等的植物分布较多。以罂粟科等的植物分布较多。 生物碱的种类很多生物碱的种类很多(见表见表1)，但具生理活性大多集，但具生理活性大多集中在异喹啉、吲哚、茛菪烷类

3、等衍生物。中在异喹啉、吲哚、茛菪烷类等衍生物。 多以盐的多以盐的形式存在于植物体内。形式存在于植物体内。 生物碱类型及其基本结构生物碱类型及其基本结构 序序号号 1、 2、 3、 4、 5、 6、 类型类型 吡咯类吡咯类 吡啶类吡啶类 喹啉类喹啉类 异喹啉类异喹啉类 吲哚类吲哚类 咪唑类咪唑类 基本结基本结构构 a b c d e f 植物药举例植物药举例 古豆、狗舌草古豆、狗舌草 毒芹、一叶秋、烟草毒芹、一叶秋、烟草 多鸡纳多鸡纳 黄连、罂粟、吐根、石蒜黄连、罂粟、吐根、石蒜 番木鳖、毒扁豆、萝芙木番木鳖、毒扁豆、萝芙木 毛果芸香毛果芸香 生物碱类型及其基本结构生物碱类型及其基本结构 6 7

4、 8 9 10 11 12 咪唑类咪唑类 喹唑酮类喹唑酮类 嘌啉类嘌啉类 甾体类甾体类 莨菪烷类莨菪烷类 无环类无环类 其他其他 f g h j k 毛果芸香毛果芸香 常山常山 茶叶茶叶 澳洲茄澳洲茄 颠茄、洋金花、古柯颠茄、洋金花、古柯 麻黄麻黄 乌头、秋水仙乌头、秋水仙 生物碱类型及其基本结构生物碱类型及其基本结构 NNHNNNNHNH a b c d e f ONHNRNNNHNCH3NOH g I j K 与中药化学差别与中药化学差别 (1)用量不同：分析一般样品量小。用量不同：分析一般样品量小。 (2)提取的原则不同：分析是保证待测组分提取的原则不同：分析是保证待测组分的最大回收。的

5、最大回收。 (3)分离目的不同：分析是尽量排除干扰，分离目的不同：分析是尽量排除干扰，净化待测组分。净化待测组分。 (4)定性目的不同定性目的不同 二、理化性质与提取分离二、理化性质与提取分离 1、物理性质、物理性质 一般无色结晶固体，少数为非结晶形粉未，一般无色结晶固体，少数为非结晶形粉未，少数有色。少数有色。 2、旋光性、旋光性 多具手性碳原子，所以多具有旋光性，且多具手性碳原子，所以多具有旋光性，且多为左旋。多为左旋。 二、理化性质与提取分离二、理化性质与提取分离 3、酸碱性：分子中含、酸碱性：分子中含N原子，多具有碱原子，多具有碱性。性。 ? 碱性：碱性： 胍季铵碱烷胺类胍季铵碱烷胺类

6、(脂叔胺碱脂叔胺碱)吡吡啶啶(芳叔胺碱芳叔胺碱)酰胺类。酰胺类。 321 Sp SpSp 二、理化性质与提取分离二、理化性质与提取分离 4、溶解性、溶解性 ?游离生物碱：极性较小，不溶或难溶于水游离生物碱：极性较小，不溶或难溶于水 ?能溶于乙醇、氯仿、丙酮、乙醚等有机溶媒中能溶于乙醇、氯仿、丙酮、乙醚等有机溶媒中 ?分析中常用氯仿、乙醚作为提取溶剂分析中常用氯仿、乙醚作为提取溶剂 ?生物碱的盐类：大多易溶于水及醇生物碱的盐类：大多易溶于水及醇 ?不溶于或难溶于苯、氯仿、乙醇等不溶于或难溶于苯、氯仿、乙醇等 ?该性质是相反的，可用来提取、分离、精制生物碱该性质是相反的，可用来提取、分离、精制生物

7、碱 ?但需注意：季胺碱、酰胺碱、和一些含极性基团较但需注意：季胺碱、酰胺碱、和一些含极性基团较多的多的AlkAlk则能溶于水则能溶于水 ?含酚羟基、和羧基的生物碱呈酸碱两性反应含酚羟基、和羧基的生物碱呈酸碱两性反应 二、理化性质与提取分离二、理化性质与提取分离 5、沉淀反应、沉淀反应 ?Alk在在H 水液或水液或H 稀醇稀醇(50）中，与）中，与 Alk试试剂生成难溶性剂生成难溶性 精制协助鉴定精制协助鉴定 ?但蛋白质、肽类、鞣质、嘌呤类，有的黄酮、香但蛋白质、肽类、鞣质、嘌呤类，有的黄酮、香豆素及查耳酮也可与某些豆素及查耳酮也可与某些 Alk试剂反应，实验中试剂反应，实验中需排除这些干扰。需

8、排除这些干扰。 ?含含Alk样品液纯化精制后，再进行实验。样品液纯化精制后，再进行实验。 二、理化性质与提取分离二、理化性质与提取分离 样品酸性提取液（? ?CHCl3? ?水提溶液） OH CHCl3提取液（季胺碱采用NaOH碱化，正丁醇萃取）水洗水洗 H 酸性水液酸性水液 Alk沉淀试剂沉淀试剂(3种种) H CHCl3液（或正丁醇液）产生沉淀： ? 阳性，可能有生物碱 无沉淀： ? 阴性，一般不含 生物碱二、理化性质与提取分离二、理化性质与提取分离 生物碱沉淀沉淀试剂大体可分为三类生物碱沉淀沉淀试剂大体可分为三类 (1)与与Alk生成不溶性盐类如：磷钼酸、硅钨生成不溶性盐类如：磷钼酸、硅

9、钨酸酸(Alkertrand)、磷钨酸；、磷钨酸； (2)与与Alk形成疏松的络盐如：碘碘化钾试形成疏松的络盐如：碘碘化钾试剂剂(Wagner)； (3)与与Alk的氮原子反应，生成不溶性加成物的氮原子反应，生成不溶性加成物如：碘化铋钾如：碘化铋钾(Dragendorff)、碘化汞钾试剂、碘化汞钾试剂(Mayer)。 ?二、理化性质与提取分离二、理化性质与提取分离 6、显色反应、显色反应 ?有些有些Alk与某些试剂呈颜色反应，可借以识别与某些试剂呈颜色反应，可借以识别Alk，但易杂质干扰，需净化后进行。但易杂质干扰，需净化后进行。 7、生物碱供试液的提取、生物碱供试液的提取 ? 主根据主根据A

10、lk的溶解度而定。的溶解度而定。 (1)有机溶剂提取有机溶剂提取 ?氨水湿润氨水湿润Alk游离，后用游离，后用CHCl3、(CH3CH2)2O提取提取 ?较稳定的生物碱盐类，可用碱性较强的较稳定的生物碱盐类，可用碱性较强的NaCO3、Ca(OH)、NaOH碱化碱化 ?本法缺点是不能提出水溶性生物碱本法缺点是不能提出水溶性生物碱 二、理化性质与提取分离二、理化性质与提取分离 (2)醇水溶媒提取醇水溶媒提取 ? 用中性甲醇、乙醇、酸性甲醇、乙醇、酸水用中性甲醇、乙醇、酸性甲醇、乙醇、酸水(如：如：0.11%)盐酸、硫酸、酒石酸等提取。盐酸、硫酸、酒石酸等提取。 ? 此法较简便，但提取出的杂质较多，

11、需进一此法较简便，但提取出的杂质较多，需进一步纯化处理。步纯化处理。 (3)混合溶媒提取混合溶媒提取 ?用不同极性的溶剂按不同比列混合，该法可用不同极性的溶剂按不同比列混合，该法可以较好地提取出待测组分。以较好地提取出待测组分。 ?如如 ： 百百 部部 、 粉粉 防防 已已 用用 乙乙 醚醚:氯氯 仿仿:乙乙醇醇:10%NH3OH(25：8：25：1)。 二、理化性质与提取分离二、理化性质与提取分离 (4) 水溶性水溶性Alk：可用：可用Alk沉淀试剂如雷氏盐沉淀试剂如雷氏盐(硫氰化铬硫氰化铬铵铵)、磷钨酸等生成不溶性的复盐而从水中析出、磷钨酸等生成不溶性的复盐而从水中析出 , ,沉沉淀溶于丙

12、酮，通过阳离子交换树脂，氢氧化铵洗淀溶于丙酮，通过阳离子交换树脂，氢氧化铵洗脱，可得游离生物碱脱，可得游离生物碱 (5)生物碱样品的提取方法生物碱样品的提取方法 ?常用的有：冷浸法、渗漉法、超声提取法、索氏常用的有：冷浸法、渗漉法、超声提取法、索氏提取法、热回流提取法等提取法、热回流提取法等 ?冷浸法与冷浸超声提取法操作简便、快捷，常用冷浸法与冷浸超声提取法操作简便、快捷，常用 ?必要时，要对上述方法作比较，以优选出最佳提必要时，要对上述方法作比较，以优选出最佳提取方法。取方法。 二、理化性质与提取分离二、理化性质与提取分离 8、生物碱样品预处理、生物碱样品预处理精制精制 (1)萃取法萃取法

13、酸碱萃取法酸碱萃取法经典法经典法 ? Alk离子对萃取法，依据离子对萃取原理离子对萃取法，依据离子对萃取原理 ? 生物碱在弱酸性介质生物碱在弱酸性介质阳离子阳离子+ +大分子大分子(离子对试剂离子对试剂) 复盐复盐（水溶性小，溶于有机溶剂）（水溶性小，溶于有机溶剂） 与水溶性杂质分离与水溶性杂质分离 ?若离子对试剂为有机染料，则该法还可用于生物碱的定量分若离子对试剂为有机染料，则该法还可用于生物碱的定量分析，如：小蘖碱可加入析，如：小蘖碱可加入 pH8.5pH8.5的四溴酚酞乙酯缓冲液，的四溴酚酞乙酯缓冲液， CHCH2 2ClCl2 2萃取，取萃取，取CHCH2 2ClCl2 2液比色测定。

14、液比色测定。 (2) (2)色谱法色谱法柱色谱、色谱小柱柱色谱、色谱小柱 三、定性鉴别三、定性鉴别 （一）一般理化鉴别（一）一般理化鉴别 常用鉴别有：常用鉴别有：Alk的沉淀反应、的沉淀反应、特殊显色反应、色谱鉴别等特殊显色反应、色谱鉴别等 l、Alk的沉淀反应的沉淀反应 ?三种以上试剂呈阳性反应。注意干扰三种以上试剂呈阳性反应。注意干扰 2 2、特殊显色反应、特殊显色反应 (1)(1)对二甲氨基苯甲醛试剂对二甲氨基苯甲醛试剂吲哚类显蓝吲哚类显蓝 (2)(2)小蘖碱小蘖碱盐酸过氧化氢试剂，呈红紫盐酸过氧化氢试剂，呈红紫 (3)Vitali(3)Vitali醇制醇制KOHKOH试剂，莨菪烷类呈紫

15、试剂，莨菪烷类呈紫 (4)Labat(4)Labat反应反应次亚甲二氧基反应次亚甲二氧基反应 (5)(5)双缩脲反应双缩脲反应麻黄碱呈紫色麻黄碱呈紫色 （二）色谱鉴别（二）色谱鉴别 方法：方法：TLC、PC、HPLC、GC等。多用等。多用TLC法。法。 中药名中药名 黄连、黄黄连、黄柏柏(小蘖小蘖碱碱) 麻黄麻黄 (麻黄碱麻黄碱) 元胡元胡 (延胡索延胡索乙素乙素) 乌头乌头(乌乌 头碱头碱) 展开剂展开剂 吸附吸附剂剂 正丁醇正丁醇:醋酸醋酸:水水(7:2:1) 硅胶硅胶G 氯仿氯仿:甲醇甲醇(4:1) 氯仿：甲醇：浓氨水氯仿：甲醇：浓氨水(20：硅胶硅胶 G 5：0.5)正丁醇：醋酸：水正

16、丁醇：醋酸：水 (4：1：1滴滴) 硅胶硅胶 乙醚：环已烷：甲醇乙醚：环已烷：甲醇(5：3：G或或 0.5) 硅胶硅胶H:已烷已烷:氯仿氯仿:甲甲 醇醇:二已烷二已烷(5:3:0.5:l) 碱性碱性乙醚：石油醚乙醚：石油醚(10:1 氧化氧化显色方法显色方法 改良碘化铋改良碘化铋钾试剂或紫钾试剂或紫外灯外灯365nm 0.5%茚三酮茚三酮 试剂试剂 改良碘化铋改良碘化铋钾试剂钾试剂 碘蒸气碘蒸气 四、含量测定方法四、含量测定方法 早期常用的有：酸碱滴定法、沉淀法、酸早期常用的有：酸碱滴定法、沉淀法、酸性染料比色法、雷氏盐比色法等性染料比色法、雷氏盐比色法等 ? 现用：分光光度法、现用：分光光度

17、法、TLC、HPLC、GC等等 （一）总生物碱含量测定（一）总生物碱含量测定 1 1、经典化学法经典化学法( (重量法、容量法重量法、容量法) ) (1)(1)重量法重量法 ?原理：原理：AlkAlk可与生物碱沉淀试剂定量反应生可与生物碱沉淀试剂定量反应生成沉淀，根据沉淀量可间接求出生物碱含成沉淀，根据沉淀量可间接求出生物碱含量。此法操作较繁，费时、且准确度较差量。此法操作较繁，费时、且准确度较差 ?四、含量测定方法四、含量测定方法 适用范围：适用范围： 凡碱性很弱多不宜用容量法或其他方法测凡碱性很弱多不宜用容量法或其他方法测定者定者 挥发性生物碱不宜用此法挥发性生物碱不宜用此法 ?例例 苦参

18、总碱测定：硅钨酸沉淀法苦参总碱测定：硅钨酸沉淀法 苦参片苦参片20%NaOH20%NaOH碱化碱化氯仿回流提取氯仿回流提取稀盐稀盐酸溶解酸溶解定容定容 10%10%硅钨酸沉淀硅钨酸沉淀 过滤沉过滤沉淀淀沉淀干燥称重，计算含量沉淀干燥称重，计算含量 ? 四、含量测定方法四、含量测定方法 (2)容量法容量法 ?分类：酸碱滴定、两相滴定、络合滴定、沉分类：酸碱滴定、两相滴定、络合滴定、沉淀容量法等淀容量法等 I、酸碱滴定原理、酸碱滴定原理 ?生物碱呈碱性，可用酸滴定；生物碱呈碱性，可用酸滴定；pH指示剂指示指示剂指示终点。终点。 ?生物碱盐，一般呈酸性生物碱盐，一般呈酸性(强酸弱碱盐强酸弱碱盐)，可

19、用强，可用强碱滴定。碱滴定。 ?因其终点在因其终点在70-90%乙醇中比在水中明显，故乙醇中比在水中明显，故可用标准碱的醇溶液滴定，以酚酞为指示剂可用标准碱的醇溶液滴定，以酚酞为指示剂四、含量测定方法四、含量测定方法 II、两相滴定原理、两相滴定原理 BH?In?1?BHIn离子离子 离子离子 分子分子 在水相与水不相溶的有机溶剂在水相与水不相溶的有机溶剂(氯仿应用最氯仿应用最多多)两相中进行滴定两相中进行滴定 注意选择：注意选择：合适的合适的PHPH，合适的酸性染料，合，合适的酸性染料，合适的有机溶剂，以适的有机溶剂，以PHPH最为重要。最为重要。 四、含量测定方法四、含量测定方法 a a、

20、两相酸碱滴定法：、两相酸碱滴定法： ?生物碱盐溶于水，加适量氯仿等有机溶剂，生物碱盐溶于水，加适量氯仿等有机溶剂，NaOH滴定，酚酞指示剂指示终点。滴定产生滴定，酚酞指示剂指示终点。滴定产生游离生物碱转溶有机溶剂，所以灵敏度比一般游离生物碱转溶有机溶剂，所以灵敏度比一般酸碱滴定好，又称为两相置换滴定酸碱滴定好，又称为两相置换滴定 b b、两相酸性染料滴定法：、两相酸性染料滴定法： ? 用酸性染料为滴定剂，在水与氯仿两相中滴用酸性染料为滴定剂，在水与氯仿两相中滴定生物碱，定生物碱，Alk阳离子与酸性染料阴离子缔合阳离子与酸性染料阴离子缔合进入氯仿（等有机溶剂），终点时，稍过量酸进入氯仿（等有机溶

21、剂），终点时，稍过量酸性染料使水层产生颜色指示终点。利用氯仿层性染料使水层产生颜色指示终点。利用氯仿层可比色定量。可比色定量。 四、含量测定方法四、含量测定方法 III、络合滴定原理、络合滴定原理 用过量的重金属生物碱沉淀试剂，使生物碱用过量的重金属生物碱沉淀试剂，使生物碱沉淀，将沉淀溶解，然后用络合剂滴定沉淀中沉淀，将沉淀溶解，然后用络合剂滴定沉淀中重金属重金属 先用过量重金属生物碱沉淀试剂，使生物碱先用过量重金属生物碱沉淀试剂，使生物碱沉淀，后用络合剂滴定溶液中剩余的过量重金沉淀，后用络合剂滴定溶液中剩余的过量重金属生物碱沉淀试剂，而间接定量。繁琐少用属生物碱沉淀试剂，而间接定量。繁琐少用

22、 、沉淀容量法、沉淀容量法 利用生物碱与生物碱沉淀试剂的反应，直接利用生物碱与生物碱沉淀试剂的反应，直接或间接定量或间接定量 2、光谱法定量、光谱法定量 （1）直接测定）直接测定 （2 2）比色法（可见分光光度法）比色法（可见分光光度法） 酸性染料比色法、雷氏盐比色法、苦味酸比酸性染料比色法、雷氏盐比色法、苦味酸比色法色法 （2 2）比色法（可见分光光度法）比色法（可见分光光度法） I 、酸性染料比色法、酸性染料比色法 ? 原理：与酸性染料滴定法相同原理：与酸性染料滴定法相同 ?本法关键：本法关键：pHpH值、酸性染料种类、有机溶剂值、酸性染料种类、有机溶剂 ?常用染料：甲基橙、溴麝香草酚蓝常

23、用染料：甲基橙、溴麝香草酚蓝BTBBTB、溴、溴甲酚绿、溴酚蓝、溴甲酚紫等甲酚绿、溴酚蓝、溴甲酚紫等 ?有机溶剂选择：依据离子对与有机相能否形有机溶剂选择：依据离子对与有机相能否形成氢键以及形成氢键能力的强弱成氢键以及形成氢键能力的强弱 ?常用有机溶剂：氯仿、二氯甲烷常用有机溶剂：氯仿、二氯甲烷 ?注意：微量水份可使有机相混浊，影响比色，注意：微量水份可使有机相混浊，影响比色，应先脱水后测定应先脱水后测定 （2 2）比色法（可见分光光度法）比色法（可见分光光度法） II 、雷氏盐比色法雷氏盐比色法 原理：原理：Alk与雷氏盐生成红色沉淀，此沉淀溶于丙酮，于与雷氏盐生成红色沉淀，此沉淀溶于丙酮，

24、于520-526nm波长处，选择最大吸收波长，测定吸收度。根据雷氏波长处，选择最大吸收波长，测定吸收度。根据雷氏盐丙酮液的盐丙酮液的为为106.5(单盐单盐)或或203.0(双盐双盐)。按下式计算样品生。按下式计算样品生成雷氏盐重量（成雷氏盐重量（W，g）。）。 W?A?M?V? 1000（2 2）比色法（可见分光光度法）比色法（可见分光光度法） 、异羟肟酸铁比色法、异羟肟酸铁比色法 酯键结构酯键结构碱性加热水解碱性加热水解羧基羧基+ +羟胺羟胺异羟肟酸异羟肟酸+Fe3+异羟肟酸铁异羟肟酸铁（紫红色化合物）（紫红色化合物） 如：乌头总生物碱的测定如：乌头总生物碱的测定 IV、其它比色法、其它比

25、色法 苦味酸比色法苦味酸比色法 方法：沉淀加碱解离，以有机溶剂提出生物碱，将苦味酸方法：沉淀加碱解离，以有机溶剂提出生物碱，将苦味酸的碱性水溶液进行比色的碱性水溶液进行比色 氯仿提取苦味酸生物碱盐，碱性缓冲液使盐解离，并将苦氯仿提取苦味酸生物碱盐，碱性缓冲液使盐解离，并将苦味酸提取而进行比色味酸提取而进行比色 氯仿提取苦味酸盐而直接进行比色。氯仿提取苦味酸盐而直接进行比色。 （二）单体生物碱的含量测定（二）单体生物碱的含量测定 主要有主要有HPLC、GC、TLC等等 1、TLC法法 ?对样品纯化程度要求不高。但一般点样误差对样品纯化程度要求不高。但一般点样误差大，定量时，首先作一标准曲线，考察

26、线性大，定量时，首先作一标准曲线，考察线性范围，确定定量方法范围，确定定量方法(内标内标/外标、一点法外标、一点法/二二点法点法)，均需同板标准品随行对照。同时要，均需同板标准品随行对照。同时要考察方法的稳定性、同板与异板的精密度考察方法的稳定性、同板与异板的精密度 ?2、HPLC法法 ?生物碱盐为离子型化合物生物碱盐为离子型化合物. .有离子交换、离有离子交换、离子对、正相子对、正相HPLC法。法。 ?生物碱为分子型化合物，生物碱为分子型化合物，可用反相、分配可用反相、分配HPLC法，应用较多。法，应用较多。 ?注意：在注意：在Alk分析中，反相柱硅胶表面仍残分析中，反相柱硅胶表面仍残留有游

27、离的硅醇羟基，呈弱酸性，会吸附碱性留有游离的硅醇羟基，呈弱酸性，会吸附碱性的生物碱使色谱峰拖尾的生物碱使色谱峰拖尾 克服措施：克服措施： I、固定相、固定相 ? 通常硅醇羟基被覆盖率越高，分离效果越通常硅醇羟基被覆盖率越高，分离效果越好。如用好。如用C8比比C18好。好。 2、HPLC法法 II、流动相、流动相 为减小为减小ALK在反相柱上的拖尾，可采取如下在反相柱上的拖尾，可采取如下措施：措施： a、加入有机胺类：、加入有机胺类： 常加入三乙胺或季胺碱盐。常加入三乙胺或季胺碱盐。 使流动相呈碱性，抑制或掩蔽游离硅醇羟基使流动相呈碱性，抑制或掩蔽游离硅醇羟基影响。影响。 b、在流动相中加入离子

28、对试剂：、在流动相中加入离子对试剂： 与与ALK类成分生成离子对掩蔽其碱性基使类成分生成离子对掩蔽其碱性基使之不能与固定相表面的硅醇基作用，使之不能与固定相表面的硅醇基作用，使ALK类成分易于出峰，且峰形好。类成分易于出峰，且峰形好。 2、HPLC法法 c、增加流动相的脂溶性、增加流动相的脂溶性 d、调整流动相的、调整流动相的pH值值 III、柱温、柱温 升高柱温升高柱温 、样品液的制备、样品液的制备 ?是定量分析工作是否成功的关键是定量分析工作是否成功的关键 ?两大类：溶剂萃取法、色谱分离法两大类：溶剂萃取法、色谱分离法 （二）单体生物碱的含量测定（二）单体生物碱的含量测定 3 3、 GCG

29、C法：法： 适于有挥发性，遇热不分解的生物碱类适于有挥发性，遇热不分解的生物碱类 ?如麻黄碱、苦参碱和颠茄类生物碱如麻黄碱、苦参碱和颠茄类生物碱 ?例：洁尔阴洗剂中苦参碱的测定例：洁尔阴洗剂中苦参碱的测定 4、其他测定方法、其他测定方法 五、应用实例五、应用实例 1、含小檗碱的中药制剂分析、含小檗碱的中药制剂分析 (1) 万氏牛黄清心丸万氏牛黄清心丸 TLC法鉴别盐酸小檗碱法鉴别盐酸小檗碱 UVUV法法/ /一阶导数光谱法测定盐酸小檗碱一阶导数光谱法测定盐酸小檗碱 (2) 安宫牛黄丸安宫牛黄丸 HPLC法测定盐酸小檗碱法测定盐酸小檗碱 (3) 香连丸香连丸 HPLC法法 五、应用实例五、应用实例 2、含麻黄碱的中药制剂分析、含麻黄碱的中药制剂分析 麻黄碱性质：麻黄碱性质： ?挥发性挥发性 ?碱性较强碱性较强 ?