6-诊断试剂质量评估

1、2010 年全国年全国HIV 抗体诊断试抗体诊断试剂临床质量评估报告剂临床质量评估报告湛江市疾病预防控制中心HIV确证实验室，梁光电话：3637930邮箱：1n评估依据n全国艾滋病检测技术规范n组织实施n中国疾病预防控制中心n实施单位职责n制定的全国HIV 抗体诊断试剂临床质量评估程序（NCAIDS-029-2010） n组织实施试剂评估工作n抽取试剂n进行公正性监督 2参评试剂参评试剂3参评试剂的选择原则参评试剂的选择原则n经国家食品药品监督管理局注册批准、在国内市场销售的HIV 抗体筛查试剂n酶联试剂、化学发光试剂和快速试剂n用于采供血筛查的试剂要求批批检合格4试剂抽取试剂抽取n从市场随机

2、抽取试剂，结果共获得30 种 （见附表1-3）n8 种进口试剂由国内代理商赠送n1 种国产试剂委托省CDC 从现场调取n21 种国产试剂委托2 家第三方机构分别购买，每家机构各买1 套，最后以抽签的方式从2 套中选出一套n所有试剂均按规定的条件运输和贮存，收齐后移交给参比实验室。 5678参评试剂的种类参评试剂的种类n用于HIV 抗体检测的酶联试剂和化学发光试剂共12 种n11 种酶联试剂：10 种国产、1 种进口，原理均为双抗原夹心酶联免疫法，即第三代试剂n1 种化学发光法试剂：国产，原理为双抗原夹心化学发光免疫分析法n用于HIV 抗原抗体检测的试剂共6 种n4 种酶联试剂：均为第四代试剂，

3、国产、进口各2 种n2 种化学发光法试剂：国产、进口各1 种 9参评试剂的种类参评试剂的种类n用于HIV 抗体检测的快速试剂共有12 种n8 种国产、4 种进口n10 种原理为免疫层析法、1 种为明胶凝集法、1 种为免疫渗滤法10血清盘构成血清盘构成11n用于HIV 抗体检测的酶联试剂（第三代）和化学发光试剂评估血清盘由454 份血清/血浆样品组成,包括168 份阳性、286 份阴性。来源如下： 血清盘构成血清盘构成121、参比实验室410 份，包括145 份阳性、265 份阴性。n样品预期结果的判断依据如下：采用常规的HIV 抗体筛查-确证试验程序检测，这410 份样品中有156 份筛查试验

4、呈阳性反应，经WB 试验确证，其中145 份为HIV 抗体阳性、10 份为阴性、1 份为不确定。n对WB 试验结果不确定样品的受检者进行随访检测，证实为HIV 抗体阴性。n对265 份HIV 抗体阴性样品再进行HIV-1 P24 抗原和核酸检测，结果全部为阴性。 血清盘构成血清盘构成132、HIV 抗体国家参考品(批号20081201，购自中国药品生物制品检定所)44 份n20 份阳性（含2 份HIV-2 型阳性）、n20 份阴性n4 份最低检出限样品（3 份阳性、1 份阴性）。 血清盘构成血清盘构成14n用于HIV 抗原抗体检测的酶联试剂（第四代）和化学发光试剂评估血清盘 由450 份血清/

5、血浆样品组成,包括157 份阳性、286 份阴性及7份HIV-1 P24 抗原灵敏度检测样品。来源如下： 血清盘构成血清盘构成15 1、参比实验室410份，同上。 2、HIV-1 P24 抗原国家参考品40 份。n10 份阳性（含2 份HIV-2 型阳性）、20 份阴性n10 份线性及灵敏度参考品（L1L10,抗原浓度依次为20、10、5、2.5、1.25、0.625、0.313、0.156、0.0781、0 U/ml）。按说明书要求，L1 和L2 需为阳性，L10 需为阴性，因此这3 份样品纳入敏感性、特异性和功效率的计算；其余7 份（L3L9）仅用于比较抗原检测的灵敏度。 血清盘构成血清盘

6、构成16n 用于HIV 抗体检测的快速试剂评估血清盘由452 份血清/血浆样品构成，包括166 份阳性、286 份阴性。来源如下：血清盘构成血清盘构成171、参比实验室410 份，同上。2、HIV 抗体（胶体金类）国家参考品（批号20081202，购自中国药品生物制品检定所）42 份，包括20 份阳性（含2 份HIV-2 型阳性）、20 份阴性及2 份最低检出限样品（阳性、阴性各1 份）。血清盘构成血清盘构成18评估方法评估方法19样品检测样品检测 n由具有艾滋病检测资质的技术人员在参比实验室集中完成实验。n针对每种试剂，严格按照其操作说明书规定的程序检测相应血清盘中的所有样品。n酶联试剂和化

7、学发光试剂的检测采用6 个人合作的方式进行流水线操作。n每种快速试剂的检测采用2 人合作、一起判读结果的方式进行，如果2 人的判读结果不一致，再请第3 人判读，结果按3 取2 的原则判定。n所有参加实验的技术人员不知道样品的预期结果、不参与数据分析。20数据分析数据分析 n由2 个人分别独立汇总检测数据、进行统计分析，通过比较2 人的结果来避免出错。n根据样品的预期结果，按以下公式计算各参评试剂的敏感性、特异性和功效率：n敏感性=真阳性/（真阳性+假阴性）100%n特异性=真阴性/（真阴性+假阳性）100%n功效率=（真阳性+真阴性）/（真阳性+假阳性+真阴性+假阴性）100%21评估结果评估

8、结果 22评估结果评估结果一、用于HIV 抗体检测的酶联试剂（第三代）和化学发光试剂评估结果见附表4。 23n在12 种试剂中，有9 种的敏感性达到了100%，其余3 种在97.0299.40%之间n其中1 种试剂漏检5 份样品（1 份来自参比实验室、4 份来自国家参考品）；n另外2 种试剂各漏检1 份样品（都来自国家参考品，分别为灵敏度样品和HIV-2 型阳性样品）。n有1 种试剂的特异性为100%，其余11 种在97.5599.65%之间。n出现假阳性反应的样品大部分来自参比实验室、1 份来自国家参考品。这些试剂的功效率在98.4699.78%之间。 评估结果评估结果24二、用于HIV 抗

9、原抗体检测的酶联试剂（第四代）和化学发光试剂评估结果见附表5。 评估结果评估结果25n在6 种HIV 抗原抗体检测试剂中，有3 种试剂的敏感性达到了100%，其余3 种在98.0999.36%之间。n出现漏检的样品全部来自国家参考品，而来自参比实验室的样品无一漏检。n北京科美东雅、北京科卫、北京万泰、德国罗氏、法国伯乐、荷兰生物梅里埃检测线性及灵敏度样品（L1-10）时呈阳性结果的最低HIV-1 P24抗原浓度分别为0.156、20、5、5、1.25、10 U/ml。n有1 种试剂的特异性为100%，其余5 种在97.9098.95%之间。n出现假阳性反应的样品大部分来自参比实验室、1 份来自

10、国家参考品。n有1 种试剂的功效率为100%，其余5 种在98.6599.10%之间。评估结果评估结果26三、用于HIV 抗体检测的快速试剂评估结果见附表6。 评估结果评估结果27n在12 种快速试剂中，有6 种试剂的敏感性为100%，其余6 种在96.9999.40%之间。n出现漏检的样品全部来自参比实验室，而来自国家参考品的样品无一漏检。n有2 种试剂的特异性为100%，其余10 种在96.1599.65%之间。n出现假阳性反应的样品大部分来自参比实验室、1 份来自国家参考品。n这些试剂的功效率在97.5799.56%之间。 评估结果评估结果28结果分析与讨论结果分析与讨论 29n本次评估

11、发现各类试剂的敏感性、特异性和功效率整体水平比较好，没有出现前两次评估发现个别快速试剂敏感性很低的情况。n提示各类试剂的整体质量进一步提升（见附表79）。 结果分析与讨论结果分析与讨论30313233n根据评估血清盘中所含国家参考品的种类不同，3 类试剂之间的综合评估结果没有可比性。n如果只分析血清盘中来自参比实验室410 份样品（含145 份阳性、265 份阴性）的检测结果，可以发现3 类试剂之间的差异。n6 种用于HIV 抗原抗体检测的酶联试剂（第四代）和化学发光试剂无一出现漏检。结果分析与讨论结果分析与讨论34结果分析与讨论结果分析与讨论n12 种用于HIV 抗体检测的酶联试剂（第三代）

12、和化学发光试剂中，只有1 种出现了1 份样品漏检。n12 种HIV 抗体检测快速试剂中有50%（6/12）出现了漏检，漏检样品数15 份。n提示部分快速试剂的敏感性低于酶联试剂和化学发光试剂。35n用于HIV 抗原抗体检测试剂的酶联试剂（第四代）和化学发光试剂评估血清盘中首次纳入了HIV-1 P24 抗原国家参考品，对参评试剂的抗原检测灵敏度进行了比较。n北京科美东雅、北京科卫、北京万泰、德国罗氏、法国伯乐、荷兰生物梅里埃检测线性及灵敏度样品时呈阳性结果的最低HIV-1 P24 抗原浓度分别为0.156、20、5、5、1.25、10 U/ml。 结果分析与讨论结果分析与讨论36n为了更好地考察HIV 抗原抗体检测试剂的实际应用效果，血清盘中最好能包括适量窗口期感染者样品，但这样的样品极难获得。n我国已在部分省市的血液筛查中试点采用核酸检测方法，有可能会筛查出一些窗口期感染者血样，如果能将这样的报废血样用于制备试剂评估血清盘，将给试剂评估工作提供有力支持。结果分析与讨论结果分析与讨论37n目前从采供血机构获取报废血样还存在