05章土壤中磷的测定

1、第五章 土壤中磷的测定主要内容：概述土壤全磷的测定土壤速效磷的测定土壤无机磷形态的分级测定土壤有机磷的别离测定要求：了解土壤全磷测定的国家标准方法。了解钼兰比色法和钼黄比色法测定土壤有效磷两种方法各自的优缺点。掌握用0.5mol.L-1NaHCO3法测定土壤速效磷的测定条件、原理、操作步骤及注意事项。了解土壤无机磷的分级测定方法5-15-1概述磷在植物大量营养元素中占有重要地位，然而，与其它大量营养元素相比，土壤磷的含量相对较低，分布变异也比拟大。土壤中的含磷化合物有许多种，其中大局部磷的组分和确切形态还不十分清楚，而且，各种形态磷之间的转化过程错综复杂，因此，尽管磷的研究工作很多，但仍有许多

2、问题需要解决。一、土壤中磷的含量、形态1.土壤中磷的含量我国土壤中全磷含量一般为：0.2 1.1 g ?kg-1以P, g ?kg-1表示。0.10 0.15 %以P2O5，%表示土壤全磷含量受土壤母质、成土作用、耕作施肥等的影响很大。我国南方酸性土全磷的含量较低， 一般 0.56 g ?kg-1； 北方石灰性土壤的全磷含量较高。黄土母质全磷含量较高。粘土中磷的含量高与砂土。有机质丰富的土壤含磷较多。磷在土壤剖面上的分布，耕作层含磷量高于底土层。2.土壤中磷的形态5 2土壤磷分为有机和无机磷两种形态。1有机磷有机形态的磷含量较低，约占全磷的2050 %,而且变幅比拟大。土壤有机磷的组成和结构很

3、复杂，大局部有机磷以高分子的形态存在，有效性不高。有机磷在土壤中的存在方式包括吸附态和以磷脂键结合态两种，分布于各有机质组分中。包括与土壤腐殖质局部结合的、动植物残体中的、以及活的土壤生物体内存在的磷又 称：生物磷或生物量磷。其中，新鲜有机质中的磷和生物磷是易分解态磷，其它含磷有 机化合物的生物有效性主要取决于其空间分布。2无机磷在大多数土壤中，磷以无机形态为主，主要以正磷酸盐的形式存在，焦磷酸盐的数 量很少。土壤无机磷可分为：水溶性磷，吸附态磷，钙、铁、铝等的磷酸盐，闭蓄态磷。矿物态磷包括闭蓄态磷无机磷|吸附态磷包括专性吸附和非专性吸附【水溶性磷矿物态磷包括含磷的原生矿物、次生矿物及其它含磷

4、化合物。矿物态磷还包括闭蓄态磷，是指被更难溶解的非晶态的铁、铝、钙等胶膜包被的磷酸盐或者其 他含磷化合物。酸性土壤特别是酸性红壤中，由于大量游离氧化铁的存在， 很大一局部磷酸铁被氧化铁薄膜包裹成闭蓄态磷，使磷的有效性大大降低。吸附态磷以专性吸附配位吸附为主，还有非专性吸附阴离子交换吸附。水溶性磷土壤溶液中磷含量很低，主要以正磷酸盐的形式存在。由于正磷酸是三元酸，随着氢离子逐步解离形成三种不同形式的磷酸根：H2PO4-、HPO42-、PO43-。 这三种磷酸根的浓度与土壤pH有关。在正常土壤pH值范围内，溶液中以H2PO4-和HPO42-为主，在pH 3 7之间以H2PO4为主，在pH 7 11

5、之间以HPO42-为主，而H3PO4只在土壤pH11时出现。土壤无机磷存在的形态受土壤pH的影响很大：酸性土壤以磷酸铁、铝盐为主；石灰性土壤以磷酸钙盐为主，且随钙磷比的增加，磷的溶解度和有效性降低 中性土壤中磷酸铁、铝、钙盐的比例相当1 : 1 : 1。二、土壤中磷的测定工程和测定方法1.土壤全磷量土壤全磷量是指土壤中各种形态磷的总和。土壤全磷的测定要求把无机磷全部溶解，把有机磷氧化成无机磷，转化为适合于比色方法的可溶性物质。(一般用比色的方法测定溶液中的磷。)2.土壤有效磷含量由于土壤中的磷大局部以难溶性的化合物存在，难以被作物吸收利用，所以， 即使是全磷含量较高的土壤中，也不一定有足够的有

6、效磷来满足当季作物的生长需要。所以，与全磷量相比，土壤有效磷量更能反映土壤的供磷能力。为了定量地确定土壤中对植物有效的那局部磷的数量，多年来有不少的研究者摸索了许多的方法，其本意是：模拟植物吸收，以定量估计化学形态上对植物有效的磷。常用的方法包括：Olsen -P法(0.5 mol?匚1NaHCO3, pH=8.5)Bray -Kurtz干法(0.03 mol?L-1NH4F -0.025 mol?L1HCl)双酸法，即Mehlich T法(0.05 mol?匚1HCl -0.025 mol?L1H2SO4)阴离子交换树脂法同位素交换法在不同土壤上适用的方法不同。即使是目前使用广泛的适用于石灰

7、性土壤、中性和微酸性土壤有效磷测定的Olsen干法，所测定土壤磷的组分也不十分清楚，一般认为，这 一局部磷包括水溶态磷和易转化态的无机磷等，有人甚至认为还包括一局部易水解的有 机磷和一小局部生物磷。3.土壤无机磷的分级测定土壤无机磷的形态历来为土壤学者所注意，因为如果我们能确知土壤中磷的化学形态，那么将可比拟容易地知道土壤中磷的各种性质及其对植物营养的关系。虽然在这方面作了不少努力和研究，但难度很大。对无机磷如此，对有机磷尤其如此。由于鉴定土壤含磷矿物比拟困难，人们通常采用化学方法将无机磷分组。土壤无机磷分组的主要做法是：使用不同的浸提剂分步浸提，以区分不同组分的磷。(1)目前常用的土壤无机磷

8、分组方法是根据张守敬和Jackson于1957年提出，后经多个研究者修改后的方法。根据这种方法，土壤磷分为磷酸钙镁化合物、磷酸铁铝化合物和闭蓄态的磷。实际上，各组分中或多或少都有一些其它组分的磷混杂在一起，包括有机磷化合物。该分组方法适用于酸性和中性土壤，以及水稻土，不适用于石灰性土壤。2我国学者蒋柏藩和顾益初于1990年提出了石灰性土壤无机磷分级的测定方法，将石灰性土壤上的CaP进一步分为三级：Ca2-P C%P和Caio干，仍然保存闭蓄态磷的概念。5 44.土壤有机磷含量及分组土壤有机磷含量的测定方法主要有两类：灼烧后再用酸浸提；用酸和碱屡次浸提。由于这两种方法都是间接的方法，不够准确，因

9、此至今有机磷的测定仍然是研究土壤有机磷化合物转化过程的一个突出问题。随着核磁共振技术的应用，对土壤有机磷的研究将会有所突破。土壤有机磷的测定方法还不成熟，土壤有机磷的分组方法也不完善。Bowman andCole提出有机磷的分级：活性有机磷、中度活性有机磷、中稳性有机磷、高稳性有机磷。5 5 5-2 土壤全磷的测定土壤全磷的测定要求把土壤中各种形态的磷都转化成可溶性的无机磷，因此，土壤 全磷的测定包括两个步骤：一、土壤样品的分解1.目的(方法选择的依据)：(1)使有机磷氧化成无机磷；(2)使矿物质分解，释放出难溶性磷。2 .方法：碱熔融：N&CO3熔融法、NaOH碱熔法, 强酸消煮：H

10、C1O4- H2SO4消煮法、HF - HC1O4消煮法干灰化法：高温灼烧后再用酸浸提(1)碱熔融法原理：用NaOH熔融土壤样品与用NmCO3熔融土壤样品的原理是一样的。即：增加盐基成 分，促进硅酸盐的分解，以利于各种元素的溶解。NaOH熔点(321C)比Na2CO3(853C)低，可以在较低的温度下分解土样，缩短熔化所需要的时间。方法评价：样品分解完全，一般作为标准方法。Na2CO3熔融法需要昂贵的柏金地竭，操作较繁、费时，但样品分解完全，是全磷测 定时分解土样的标准方法。NaOH碱熔法可在银或锲地竭中分解土壤全磷或全钾，样品 分解比拟完全，操作简便，已列为国家标准。(2) HCIO4-H2

11、SO4消煮法原理：r高氯酸：分解样品；抑制硅和铁对磷的比色测定的干扰、浓硫酸：提高消化温度；防止溶液蒸干用高氯酸(HC1O4)分解样品，因为HC1O4既是一种强酸，又是一种强氧化剂，能 氧化有机质，分解矿物质，而且HC1O4的脱水作用很强，有助于胶状硅的脱水，并能与Fe3+络合，在磷的比色测定中抑制了硅和铁的干扰。H2SO4除提高消化温度外，还可以防56止溶液蒸干，以利于消化作用的顺利进行。HC1O4中2SO4消煮法对一般的土壤样品的分解率达97%98%，但对红壤性土壤样品的分解率只有95%左右。 方法评价：是目前应用最普遍的方法，操作简便，虽然不及熔融法样品分解完全，但分解率已到达了土壤全磷

12、分析的要求。二、溶液中磷的测定1.方法：1比色法：钼蓝比色法：适用于磷含量较低时，比钒钼黄比色法更灵敏。钒钼黄比色法：适用于磷含量中等时。2容量法：适用于磷含量较高时。3重量法：适用于磷含量较高时。2.根本原理：首先：正磷酸+铝酸一- 磷铝杂多酸然后：一-过量钱钥酸钱 -磷钥酸钱黄色沉淀 或：-参加偏锐酸钱-磷锐铝杂多酸黄色或：一-参加复原剂-“铝蓝蓝色一定酸度下，溶液中的正磷酸与钼酸络合生成磷钼杂多酸。在磷浓度较高，且有过量铵盐钼酸铵存在的条件下，磷钼杂多酸与铵盐作用， 生成黄色的沉淀，即磷钼酸铵。这就是重量法和容量法测定磷的根底。在含磷量中等时，加钼酸铵不产生沉淀，溶液略呈黄色，吸光度很低

13、，参加偏钒酸钱，生成磷锐铝杂多酸，具有较高的吸光度，且黄色稳定，可在波长400490nm比色这是钒钼黄比色法测定磷的依据。灵敏度与波长有关，浓度高，选较长的波长。用于肥料和植物分析。但在磷含量较低的情况下，一般都用更灵敏的钼蓝比色法，根本原理如下。3.钼蓝比色法1原理：一定酸度下，溶液中的正磷酸与钼酸络合生成磷钼杂多酸。在复原剂的作用下，磷容量法、重量法钼黄比色法5 7铝杂多酸中的一局部Mo6+离子被复原为Mo5+离子，生成一种叫做“铝蓝的蓝色物质Mo6+黄色尸Mo5+蓝色。蓝色的深浅与溶液中磷酸溶液的浓度成正比，在700 nm处 比色测定。2影响蓝色产生的速度、强度、稳定性等的因素，主要有：

14、1复原剂种类的选择：最早常用的复原剂有：氯化亚锡SnCl2 、亚硫酸氢钠等无机复原剂；后来人们在还原剂的选择上作了很多改良，采用了一些有机复原剂，例如： 抗坏血酸 维生素C，Vc 、硫酸联氨、1, 2, 4-胺基萘酚磺酸。目前，使用最普遍的是钼锑抗混合指示剂，也就是：钼酸铵酒石酸氧锑钾抗坏血酸其中，抗坏血酸作为复原剂 。几种复原剂的比拟：复原剂中，氯化亚锡的灵敏度最高，显色快，但颜色不稳定。土壤速效磷的速测方法仍然多用氯化亚锡作复原剂。抗坏血酸复原剂是目前应用最广泛的一种复原剂，它的主要优点是：生成的颜色稳定，干扰离子的影响小，适用范围较广，但显色慢，需要加温。三价锑的存在大大加速了抗坏血酸的

15、复原反响，在室温下也能显色，这是因为：睇Sb与磷铝酸反响生成磷睇铝三元杂多酸，抗坏血酸在室温下就能迅速将磷锑钼三元杂多酸复原为蓝色的络合物。2适宜的试剂浓度尤其是酸度：钼蓝显色是在适宜的试剂浓度下进行的，不同方法所要求的适宜试剂浓度不同。钼酸铵浓度和复原剂的用量要适宜，使一定浓度的磷产生最深、最稳定的颜色；磷钼杂多酸是在一定的酸度下形成的，过酸或酸度缺乏都会影响结果，因而在用钼蓝比色法测定磷的时候，酸度的控制最为重要。教材PP.73表5-1列出了三种铝蓝法的工作范围和各种试剂在比色液中的最终浓度。这三种方法中，SnCl2中2SO4体系最灵敏。特别关注一下铝睇抗体系：显色酸度0.35 0.55m

16、ol?L-1，H+；钼酸铵浓度1.0 g?L-1；复原剂的用量：抗坏血酸浓度0.81.5 g?匚1;洒石酸氧睇钾浓度0.0240.05g?匚1。铝睇抗体系是目前使用最普遍的，原因是：灵敏度较高，接近SnCl2中2SO4体系；显色最稳定，显色的温度范围最宽；受干扰离子的影响也小。更重要的是，复原剂与钼酸铵配成了一种钼锑抗混合溶液，也就是：钼酸铵酒石酸氧锑钾抗坏血酸硫酸混合溶液，一次参加，简单方便。 干扰离子：A. Si的干扰与磷酸H3P04一样，种酸H3ASO4和硅酸H4SiO4都能与铝酸结合生成杂多酸。5 8干扰的防止：硅Si的干扰可以用调节酸度的方法来消除，因为磷铝酸在较高的酸度下形成0.4

17、0.6 mol?L-1，H+ ，而硅钼酸在较低的酸度下形成0.10.24 mol?L-1，H+B. As的干扰干扰的防止：神As在土壤中的含量通常情况下非常低，而且神铝酸的复原速度比磷钼酸要低得多，所以，虽然砷的干扰比拟难克服，但一般不会影响土壤磷的测定结果。如果土壤中含有较多的砷，比方在使用了农药砒霜的情况下，可在加钼酸铵试剂之前先将砷复原成亚砷酸，从而消除砷的干扰。C. Fe2 3+的干扰影响溶液的氧化复原势，抑制蓝色的生成。在用氯化锡SnCl2作复原剂时，溶液中的Fe3+含量不能超过20mg?kg1。干扰的防止：选用抗坏血酸作为复原剂，因为抗坏血酸能与Fe3+络合，保持溶液的氧化复原势，

18、溶液中的Fe3+含量即使超过了400mg?kg1,也仍然不会对磷的测定产生干扰。三、土壤全磷的测定方法之一 一一HC104- H2SO4消煮等目睇抗比色法1.原理在浓硫酸H2SO4存在的条件下，用高氯酸HC104分解样品，使土壤中的磷转化成可溶性的磷酸盐，溶液中磷的测定采用钼锑抗比色法。溶液中磷与钼酸铵作用，生成磷钼杂多酸，在一定酸度下，被抗坏血酸复原成钼蓝，蓝色深浅与磷的浓度成正比，睇Sb的存在加速了复原过程。作用：钼酸铵 与磷酸反响；酒石酸氧锑钾 加快了反响三价锑；抗坏血酸 复原剂；硫酸 提供所需的酸度。注意：先配置钼锑混合液，临用前再参加抗坏血酸。现配现用，有效期24小时；贮存于棕色试剂

19、瓶中，最好放在冰箱中保存。2试剂12, 6-二硝基酚或2, 4-二硝基酚指示剂：变色点约为pH=3; pH3黄色。2钼锑抗试剂：含有：钼酸铵NH46Mo7024?4H2010 g?L-1；酒石酸氧锑钾KSb0C4H4060.5 g?L-1;抗坏血酸C6H805，Vc15 g?L-1;硫酸5.5 mol?L-1, H+5 93.操作步骤（ 1） 消化：称样过100目筛0.5000 g f加少量水润湿加浓硫酸8 ml f摇匀加7072%高氯酸10滴摇匀-管口加一个小漏斗，加热消煮至溶液开始转白后，继续消煮20min-定容50 ml-静置过夜取上清液或枯燥的定量滤纸过滤。同时做空白试验（ 2） 溶液

20、中磷的测定：-移取滤液210 ml f加水至约30 ml -加二硝基酚指示剂2滴调节溶液酸碱度至pH3 f加铝睇抗试剂5 ml f定容50 ml f半小时后880nm比色（ 3） 绘制标准曲线0、0.1、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 mgP?L-14.考前须知1溶液酸碱度的调节：滴加4 mol?L-1NaOH直至溶液刚刚变成黄色，再滴加2 mol?L-11/2 H2SO41滴，使溶液的黄色恰好褪去，此时，pH 3，因为消煮液的酸度很大，需要比拟多的碱去中和溶液的酸度，这里不用NH40H调节酸度，因为溶液中NH40H浓度如果超过10g?_-1,就会使钥 蓝色迅速消退。2过滤时应该用无磷

21、滤纸，国产标有蓝色带定量滤纸。四、土壤全磷的测定之二NaOH熔融 和睇抗比色法GB8937S81 .原理土壤样品与氢氧化钠熔融，使土壤中含磷矿物及有机磷化合物全部转化为可溶性的正磷酸盐，用水和稀硫酸溶解熔块，在规定条件下样品溶液与钼锑抗显色剂反响，生成磷钼蓝，用分光光度法定量测定。2 .操作步骤 参考课本PP.77,略5-3 土壤速效磷的测定一、 概述土壤有效磷：土壤中能被当季作物吸收利用磷量。土壤磷的有效性：土壤磷能被植物吸收利用的程度。涉及到土壤磷供给的强度因素土壤溶液中磷的浓度、容量因素土壤固相中磷的量、供给速度等方面。磷位：=1/2pCa + pH2P。4,表示土壤吸持磷的能力，或固相

22、磷进入溶液的难易。它 是用能量的观5 10点来表示土壤的供磷强度。磷位越高，土壤吸持磷的能力越高，磷对植物的有效性越低。到目前为止，还无法真正测定土壤有效磷的数量。通常所谓的土壤有效磷只是指用某一特定方法所测出的土壤中的磷量。只有当测出的磷量与植物生长状况具有显著相关的情况下，这种测定才具有实际意义。因此，土壤有效磷并不是指土壤中某一特定形态的磷，也不是指土壤中“真正有效磷的“绝对含量，它只是一个相对指标，应用不同方法在同一土壤上可以得到不同的有效磷数量。它可以相对地说明土壤的供磷水平，可以作为判断是否需要施用磷肥一个指标。土壤有效磷的测定方法：（1）生物方法：最可靠。（2）化学速测方法：应用

23、最普遍，快速简便。也就是，用提取剂提取土壤中的有效磷。（3）同位素方法：标准方法。（4）阴离子交换树脂方法：类似植物吸收磷方法选择的依据：现有的测定土壤有效磷的方法虽然有一定的理论依据，但仍带有很大的“经验性因此，选择方法的根本依据是各种方法在实践中的表现，即：测定结果和植物生长状况的相关性。二、土壤有效磷的化学浸提方法：1.根据浸提剂的种类不同，主要有以下方法：1水作为浸提剂理论根据：植物从土壤中吸收的磷主要是H2P。4主要来自于土壤溶液，水溶性磷是土壤磷的强度因素，因而测定土壤水溶性盐，可根本反映有效磷的状况。缺点： 不易获得澄清的滤液；缓冲能力弱，提取液pH容易改变，影响测定结果；提取能

24、力弱，对于有效磷低的土壤，测定有困难。因此，用水作浸提剂的方法一般较少使用。5 11适用范围：仅适用于砂性土壤，因为砂性土壤中的磷以水溶性磷为主。2饱和以CO2的水作为提取剂理论根据：植物根分泌CO2,根部周围溶液的pH约为5。适用范围：石灰性土壤，因为石灰性土壤中磷的溶解度随着水溶液中CO2浓度的增加而增加。3有机酸溶液作为提取剂理论根据：与饱和以CO2的水相似，植物根系分泌有机酸，其溶解能力相当于饱和以CO2的水。西欧国家使用较多，常用的有：柠檬酸、乳酸、醋酸等。4无机酸溶液作为提取剂理论根据：采用无机酸溶液作为提取剂，主要是从分析方法的方便来考虑的。当然，它需要经过检验，证明与植物吸收磷

25、有一定的相关性后，才可以使用。一般采用缓冲溶液，常用的有：HOAc - NaOAc溶液，pH4.810.001 mol?L1H2SO4-NH42SO4,pH 30.025 mol?L1HCl 0.03 mol?L1NH4F0.05 mol?1HCl 0.025 mol?L11/2 H2SO4适用范围：不适用于石灰性土壤，主要用于酸性土壤。5碱溶液作为提取剂目前使用得最多最广的是：0.5 mol?11NaHCO3pH8.5溶液。理论根据：pH8.5时，Ca2+、Al3+、Fe3+等离子的活度低，有利于磷的提取；溶液中的OH-、HCO3-、CO32-等阴离子都能够置换H2P。4。适用范围：主要用于

26、中性和石灰性土壤，也可以用于酸性土壤。2.影响有效磷提取的因素，主要有：1提取剂的种类选择5 12各种提取剂中的阴离子从土壤颗粒上置换磷酸根的能力不同：F-柠檬酸HCO3-CH3COO-SO42-Cl-。提取液的浓度、pH等都会影响到提取的磷的多少。2水土比常用：5 : 1，7 : 1，20 : 1水土比越大，提取的磷越多，因为增加了磷的溶解，减少了磷的再固定。但不是越大越好，因为：水土比越大，土壤中的局部非有效的有机磷会溶解，提取出的磷与植物吸收之间的相关性越差。3振荡时间常用：1，5，30分钟。震荡时间越长，提取的磷越多。但不是时间越长越好。4温度提取和显色过程受温度的影响比拟大，一般要控

27、制在室温2025。冬天测得的土壤有效磷含量与夏天测得的结果不同。所以，在比拟多个样品间的有效磷含量时，要特别注意控制提取和测定条件的一致。总之，提取液的浓度越高，水土比越大，振荡时间越长，浸提出来的磷越多。但是，并不是提取液的浓度越高，水土比越大，振荡时间越长，就越好，因为：化 学速测方法提取的磷只是土壤有效磷的一局部，并不要求能够提取出全部的有效磷，只 要求提取出来的那局部磷与植物吸收的磷之间有很好的相关性。另一方面，提取过程当中，要控制土壤中非有效磷的溶解，这也要求提取液的水土 比不能太大，振荡时间不能太长。所以，有效磷含量只是一个相对指标，应用不同方法在同一土壤上可以得到不同的 有效磷数

28、量，只有用同一方法在相同条件下测得的结果，才具有可比性。在报告有效磷 的测定结果时，要注明所用的测定方法。教材PP.81表5-2列出了测定土壤有效磷的三种常用方法的浸提剂、水土比、 振荡时间等。0.5mol?L-1NaHCO3(pH8.5)0.025 mol?L-1HCl -0.03mol?L-1NH4F0.05 mol?L-1HCl 0.025 mol?L-1(1/2 H2SO4)三、中性和石灰性土壤速效磷的测定可供参考：中性和石灰性土壤风化程度中等的酸性土壤高度风化的酸性土壤5 13-0.5 mol?匚1pH 8.5 NaHCO3法Olsen法石灰性土壤中的磷主要以Ca干的形式存在，由于存

29、在大量的游离的碳酸钙，因而不 能用酸溶液来提取，一般用碱性的碳酸盐溶液来提取。1 .方法原理：游离CaCO3溶解度降低，溶液中Ca2+浓度降低CO32-的同离子效应；J降低溶液中Ca2+、Fe3+和Al3+的活性pH8.5;置换吸附态磷由于存在OH-、HCO3-、CO32-等阴离子。由于碳酸根的同离子效应，碱性的碳酸盐溶液降低了碳酸盐的溶解，也就降低了溶液中钙离子的浓度，这样就有利于Ca干的提取。中性土壤中CaP Al干、Fe干都占有一定 的比例。由于碳酸盐溶液降低了铝离子和铁离子的活性，这样就有利于AlP和Fe干的提取。止匕外，碳酸氢钠碱溶液中存在着OH-、HCO3-、CO32-等阴离子，这

30、样就有利于吸附态磷的置换。因此，0.5 mol?L-1pH 8.5 NaHCO3法不仅适用于石灰性土壤，也适用于中 性和酸性土壤速效磷的提取，是目前使用最多最广的一种方法。溶液中磷用铝睇抗比色法测定。2 .操作步骤：1浸提称样过20目筛2.500 g一 参加提取剂0.5 mol?L1NaHCO3pH 8.5溶液50 ml一加一勺无磷活性炭一恒温2025C振荡30 min一无磷滤纸过滤同时做空白试验2比色测定：移取滤液x ml于150 ml三角瓶中 一补加提取剂10-x ml一 加水35ml一加铝睇抗试剂5ml一此时溶液总体积为10+35+5 = 50 ml,不需定容一 摇匀至无气泡 一显色30

31、 min一 波长700 nm比色3绘制标准曲线：0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5 mgP?匚13 .考前须知：1有关无磷活性炭的几个问题：土壤浸提液中有色物质比照色有影响，可参加活性炭吸附有色物质及其它悬浮物，以消除干扰5 142活性炭本身对PO43-也有一定的吸附作用，当活性炭颗粒的外表被溶液中同时存在 大量的HCO3-离子饱和了以后，就抑制了活性炭对PO43的吸附作用，因此，力口入量 不能太多，一股在0.3g左右。3活性炭常含有磷，应在样品分析前做空白试验，检验是否有磷存在。无磷活性炭的处理方法见教材PP.83：盐酸浸泡-屡次洗涤-0.5 mol?匚1NaHCO3浸泡-抽气过 滤

32、，屡次淋洗-直至检查无磷。2温度：浸提及显色过程受温度的影响很大，应控制在室温25，最好保持恒温，尤其是对于分批屡次样品的测定，更要保证提取和测定过程温度的一致，这样才有可比性。3测定时所用的容器：在滤液中参加水和钼锑抗试剂时，会产生很多的气泡，这是因为钼锑抗试剂为酸性，会使滤液中的提取剂NaHCO3发生水解，产生大量的CO2气体。如果选用瓶口较小的容量瓶，在向滤液中参加钼锑抗试剂时就要特别仔细，动作要慢，并要缓慢地摇动容量瓶，否那么，很容易造成气泡的外溢，使试剂产生损失，引起测定误差。所以，可以改用三角瓶来克服这个缺点。但是，三角瓶不能定容，可以采用准确参加滤液、水、钼锑抗试剂，使总体积为5

33、0ml的方法来解决这个问题。4显色液的酸度钼蓝法要求控制显色液的酸度为0.35 0.55 mol?L-1H+ 。在全磷的测定时，需要对消煮液进行酸碱度的调节，而在本法中，省略了调节滤液酸碱度这一步骤。这是因为，本法中最后显色液的酸度为，0.45 mol?L-1H+ ，仍然在适宜的酸度范围内。5土壤速效磷等级低中高土壤速效磷Ng P ? kg10四、酸性土壤速效磷的测定方法1 .方法 0.03 mol?匚1NH4F 0.025 mol?匚1HCl法Bray I法0.03 mol?匚1NH4F 0.1 mol?L-1HCl法Bray II法Bray I法适用于风化程度中等的酸性土壤Bray II法

34、适用于风化程度较高的强酸性土壤1方法原理：NH4F -HCl主要提取酸溶性磷和吸附态磷，包括大局部的磷酸钙和一局部磷酸铝 和磷酸铁。因为5 15在酸性溶液中，一方面，氟离子F-能与Fe3+和Al3+形成络合物，促 进了磷酸铁和磷酸铝的溶解；另一方面，稀酸也可溶解局部磷。化学反响式：3 NH4F + 3 HF + A1PO4 fNH43A1F6+ H3PO43 NH4F + 3 HF + FePQ - NH43FeF6+ H3PO4这种方法适用于酸性土壤，而不适用于石灰性土壤。因为：提取剂中的酸在水土比不大时很容易被石灰中和；另外，有可能形成CaF2,导致磷的再沉淀或再吸附，使结果偏低。溶液中磷

35、与钼酸铵作用，生成磷钼杂多酸，在一定酸度下，被氯化亚锡SnCl2复原成钼蓝，蓝色深浅与磷的浓度成正比。2操作步骤简要：浸提 称样1.000g f参加提取剂7 ml f振荡1 min f无磷滤纸过滤测定 取滤液2 ml-加水6 ml f加铝酸钱试剂2 ml f摇匀 加SnCl21滴 显色515 min -波长700 nm比色3考前须知：A.复原剂氯化亚锡容易变质，配成甘油溶液，因为氯化亚锡甘油溶液远比水溶液要稳定，贮存于棕色瓶中，使用前要检查是否失效。B.因为显色液体积比拟小，所以待测液和试剂都要准确参加，尤其是钼酸铵试剂，否那么，改变溶液的酸度，影响比色。C.用SnCl2作复原剂的钼蓝比色法，

36、钼蓝的颜色不够稳定，在515 min内颜色最为稳定，故在此时间内比色。D.显色过程中氟化物可能会产生干扰，可以加硼酸，和氟离子形成络合物以防止干扰，但在大多数情况下，无此必要，除非对于少数酸性砂土。2 .方法二0.05 mol?L-1HCl -0.025 mol?L-11/2 H2SO4双酸法适用于高度风化的、固磷能力较强的酸性土壤。1方法原理：利用双酸溶解土壤中的Al干、Fe干以及局部活性较高的Ca lP。提取液中的磷用铝 蓝比色法测定。2操作步骤简要 ：5 16浸提 称样5.00厂参加提取剂25 mlf振荡5 minf无磷滤纸过滤测定 取滤液1 mlf加工作液24 mlf显色30 min-

37、波长700 nm比色五、同位素方法1 .同位素稀释法测定“A值方法原理： 土壤中施入一定量的标记32P的过磷酸钙，进行盆钵试验，分析植物样品中全磷含量和放射性强度，即可求得植物从肥料中吸收的磷b和植物体内总磷量a+b。假定 土壤中有效磷含量为A,由肥料施入土壤的有效磷为B,那么，y : 100-y = B : A,从 而求得“A值。A = 100-y B / y其中，y = b/a+b b植物从肥料吸收而来的磷，从植物样品放射性强度求得。a+b植物样品总磷含量，从化学分析求得。2 .同位素方法测定“E值略六、阴离子交换树脂法：1.方法原理：通过阴离子交换树脂中阴离子和土壤中的吸附磷酸根相交换，

38、从而使磷从土壤固相不断释放。经过一段时间后，用氯化钠将吸附在树脂上的磷置换下来进行测定。土壤P +树脂Cl =土壤Cl +树脂P树脂P + NaCl =树脂Cl +溶液P所用的树脂为：强盐基型、C饱和的阴离子交换树脂。土壤固相外表的磷与溶液中的磷之间的交换作用有快有慢，快交换作用的磷为土壤速效磷，慢交换作用的磷为缓效磷。可利用交换作用的速度将土壤磷进行分级，同时可以说明土壤磷的供给强度、容量、释放速率等因素。所以，本方法还可以用来测定土壤磷的缓冲能力，研究土壤磷的解吸或释放规律。2.操作步骤略七、电超滤法：略5-4 土壤无机磷形态的分级测定土壤无机磷形态的分级方法，主要是：利用不同化学浸提剂的

39、特性，将土壤中各种形态的无机磷酸盐加以逐级别离。这种分组方法存在一些问题：（ 1） 由于土壤的非均质性，浸提过程中释放的磷可能被其它组分所吸附，或者与阳离5 17子反响形成难溶性的含磷化合物；（ 2） 肥料磷与土壤反响的中间产物有很多，而且其溶解性能还不清楚。实际上，各组分中或多或少都有一些其它组分的磷混杂在一起，包括有机磷化合物。一、酸性、中性土壤无机磷形态的分级测定经Peterson and Core澹改的Jackson- Chang分级方法目前国外常用的土壤无机磷分组方法是根据美籍华人张守敬和他的导师Jackson于1957年提出的方法。后来虽然经过不少研究者修改，但方法框架根本不变。这

40、种方法将土壤磷分为磷酸钙镁化合物、磷酸铁铝化合物和闭蓄态的磷。浸提顺序如下：-1 mol?L-1NH4C1浸提水溶性磷浸出局部主要为水溶性磷，包括断键的和结合松弛的磷。除新施磷肥的土壤外，在一般自然土壤中，这局部磷量很少，这一级浸出液中的磷通常不必测定。0.5mol?L1NH4F浸提Al干与铝结合的磷酸盐浸提剂在pH8.2的条件下，F-与A产形成配合物，与Fe3+的配合能力很弱，这样 使得Al干根本上可以与Fe干别离。 -0.1mol?L1NaOH浸提Fe干与铁结合的磷酸盐由于Fe干与NaOH的水解反响，使得Fe干中的磷酸根转化而释放。 -0.3mol?L1柠檬酸钠-连二亚硫酸钠-0.5mol

41、?L1NaOH浸提OP闭蓄态磷酸盐这局部磷是被氧化铁胶膜所包蔽的磷酸盐，利用连二亚硫酸钠强烈的复原作用，使包蔽的氧化铁复原成亚铁，继而被柠檬酸根络合，使氧化亚铁包裹不断剥离，从而浸提出全部闭蓄态磷-0.5mol?L1H2SO4浸提Ca-P与钙结合的磷酸盐以上Al干、Fe干和OP的浸提都是在碱性条件下进行的， 基性的Ca干几乎不 被溶解。在0.5mol?L_1H2SO4这一强酸性溶液中，Ca干绝大局部被提取出来。这个方法一个重大的缺点是在用NH4F溶液浸提时，可能会因产生CaF2而导致磷的 沉淀或吸附，从而使Al-P偏低，Fe-P偏高。所以，它不适用于石灰性土壤。对Al-P、Fe-P也难以到达清楚分组的目的，所以，有些方法把Al-P、Fe-P作为一组而不再区分。但在酸性土壤上，此法仍不失为一个良好的方法，已成为酸性和中性土壤无机磷形分级测定的主要方