第一章工具酶 ppt课件

1、n事侦查领域极为重要事侦查领域极为重要.n处随机性切割特异性切割2426bp处问题：以下关于限制性内切酶的表示方法中，正确的一项为哪一项Sau 3A I B. E. co R I C. hind III D. Sau 3A I问题：1.在序列5-CGAACATATGGAGT-3中含有一个6bp的II类限制性内切核酸酶的识别序列，该位点的序列能够是什么？2.下面几种序列中他以为哪一个哪些最有能够是II类酶的识别序列：GAATCG 、AAATTT、 GATATC、ACGGCA？ 为什么？3. 假设DNA由5种不同的碱基组成，那么一个识别4个碱基序列的限制性内切酶大约隔碱基对可进展一次切割 A. 1

2、25 B. 256 C. 425 D. 625 E. 10564. 假设DNA由5种不同的碱基组成，那么一个识别4碱基序列的限制内切酶大约可将1Mb的DNA切割成多少段？ A.125 B.320 C.625 D.1050 E.1600Eco RI 37 退火4-7 5G-C-T-C-T-G-C-A-OH P-G-G-A-G 33C-G-A-G-P OH-A-C-G-T-C-C-T-C 55G-C-T-C-T-G-C-A-G-G-A-G 33C-G-A-G-A-C-G-T-C-C-T-C 5Pst I 37 退火4-7 OHP5G-C-T-C-T-G-C-A G-G-A-G 33C-G-A-G

3、A-C-G-T-C-C-T-C 5 POHPvu II等产生的平头末端5G-C-T-C-A-G-C-T-G-G-A-G 33C-G-A-G-T-C-G-A-C-C-T-C 5Pvu II 37 5G-C-T-C-A-G-OH P-C-T-G-G-A-G 33C-G-A-G-T-C-P OH-G-A-C-C-T-C 5n 3-TCTAGA-5nn A.含5CGAA 3序列的黏性末端n B.含5CG 3序列的黏性末端n C. 含5AAGC 3序列的黏性末端n D. 平末端nE. 含5GC 3序列的黏性末端1 U 核酸内切酶的酶活性：在最正确反响条件下反响1 小时，完全水解1 g 规范DNA所需的酶

4、量大部分II 型核酸内切酶需求类似的反响条件： 待酶切的DNA样品 内切酶 反响缓冲液 温度37，12hr完成酶切，所需酶量由切割的DNA量决议限制酶作图限制酶作图(Restriction Mapping)根本原理根本原理1Kb Eco RI待检的待检的DNABam HI15Kb6Kb5Kb10Kb9KbEBBH H EH H H H E+BEB6KbEH 4KbEB 5KbBH 4.9kb1.53.40.71.01.22.00.20.51.21.02.0Eco RIBam HIEco RI+ Bam HI结论12.01.20.7B E BB结论21.2 2.00.7B E BB如何确定哪种结论正确？答：部分限制性酶切0.71.01.22.04.9Bam HI1.72.73.73.94.9 DNA衔接酶不可以衔接两条单链衔接酶不可以衔接两条单链DNA