常用缓冲溶液配制方法

1、常用缓冲溶液的配制方法1.甘氨酸-盐酸缓冲液(0.05mol/L)X毫升0.2 mol/L甘氨酸+Y毫升0.2 mol/L HCI，再加水稀释至200毫升pHXYpHXY2.05044.03.05011.42.45032.43.2508.22.65024.23.4506.42.85016.83.6505.0甘氨酸分子量=75.07 , 0.2 mol/L甘氨酸溶液含15.01克/升。2.邻苯二甲酸-盐酸缓冲液(0.05 mol/L)X0.2 mol/L邻苯二甲酸氢钾+ 0.2 mol/L HCl，再加水稀释到20毫升pH(20 C )XYpH(20 C)XY2.254.0703.251.470

2、2.453.9603.450.9902.653.2953.650.5972.852.6423.850.2633.052.022邻苯二甲酸氢钾分子量=204.23, 0.2 mol/L邻苯二甲酸氢溶液含40.85克/升3.磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液pH0.2 mol/LNa2HPO4(#)0.1mol/L柠檬酸(#)pH0.2 mol/LNa2HPO4(#)0.1 mol/L柠檬酸(#)2.20.4010.605.210.729.282.41.2418.765.411.158.852.62.1817.825.611.608.402.83.1716.835.812.097.913.04.1115.8

3、96.012.637.373.24.9415.066.213.226.783.45.7014.306.413.856.153.66.4413.566.614.555.453.87.1012.906.815.454.554.07.7112.297.016.473.534.28.2811.727.217.392.614.48.8211.187.418.171.834.69.3510.657.618.731.274.89.8610.147.819.150.855.010.309.708.019.450.55Na2HPO4分子量=14.98 , 0.2 mol/L溶液为28.40克/升。Na2HPO4

4、- 2H2O分子量=178.05, 0.2 mol/L溶液含35.01克/升。C4H2O7 H2O分子量=210.14, 0.1 mol/L溶液为21.01克/升。4.柠檬酸-氢氧化钠-盐酸缓冲液pH钠离子浓度（mol/L）柠檬酸（克）C6H8O7 H2O氢氧化钠（克）NaOH 97%盐酸（量升）HCl（浓）最终体积（升）2.20.2021084160103.10.2021083116103.30.2021083106104.30.202108345105.30.3524514468105.80.45285186105106.50.3826615612610 使用时可以每升中加入1克克酚，若最

5、后pH值有变化，再用少量50%氢氧化钠溶液或浓盐酸调节，冰箱保存。5.柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液（0.1 mol/L）pH0.1 mol/L柠檬酸(#)0.1 mol/L柠檬酸钠(#)pH0.1 mol/L柠檬酸(#)0.1 mol/L柠檬酸钠(#)3.018.61.45.08.211.83.217.22.85.27.312.73.416.04.05.46.413.63.614.95.15.65.514.53.814.06.05.84.715.34.013.16.96.03.816.24.212.37.76.22.817.24.411.48.66.42.018.04.610.39.76.61.41

6、8.64.89.210.8柠檬酸C6H8O7 -H2O：分子量210.14, 0.1 mol/L溶液为21.01克/升。柠檬酸钠Na3C6H5O7- 2H2O：分子量294.12, 0.1 mol/L溶液为29.41克/毫升。6.乙酸-乙酸钠缓冲液（0.2 mol/L）pH(18 C )0.2 mol/LNaAc心)0.3 mol/LHAc()pH(18 C)0.2 mol/LNaAc日)0.3 mol/LHAc()2.60.759.254.85.904.103.81.208.805.07.003.004.01.808.205.27.902.104.22.657.355.48.601.404.

7、43.706.305.69.100.904.64.905.105.89.400.60Na2Ac 3H2O分子量=136.09, 0.2 mol/L溶液为27.22克/升。Na2HPO42H2O分子量=178.05 , 0.2 mol/L溶液为85.61克/升。Na2HPO412H2O分子量=358.14, 0.2 mol/L溶液为71.628克/升。NaH2PO42H2O分子量=156.01 , 0.2 mol/L溶液为31.202克/升。磷酸盐是生物化学研究中使用最广泛的一种缓冲剂，由于它们是二级解离，有二个pKa值， 所以用它们配制的缓冲液，pH范围最宽：NaH2PO4 :pKal = 2

8、.12, pKa2 = 7.21; Na2HPO4：pKa1 = 7.21,pKa2=12.32配酸性缓冲液：用NaH2PO4,pH = 14,配中性缓冲液：用混合的两种磷酸盐，pH = 68,配碱性缓冲液：用Na2HPO4,pH = 1012。用钾盐比钠盐好，因为低温时钠盐难溶，钾盐易溶，但若配制SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳的缓冲液时，只能用磷酸钠而不能用磷酸钾，因为SDS(十二烷基硫酸钠)会与钾盐生成难溶的十二烷基硫酸钾。磷酸盐缓冲液的优点为： 容易配制成各种浓度的缓冲液；适用的pH范围宽；pH受温度的影响小；缓冲液稀释后pH变化小，如稀释10倍后pH的变化小于0.1。其缺点为：易与常见的钙

9、Ca2+离子、镁Mg2+离子以及重金属离子缔合生成沉淀;会抑制某些生物化学过程，如对某些酶的催化作用会产生某种程度的抑制作用。(2)磷酸氢二钠-磷酸二氢钾缓冲液(1/15 mol/L)pHmol/L/15Na2HPO4日)mol/L/15KH2PO4()pHmol/L/15Na2HPO4()mol/L/15KH2PO4()4.920.109.907.177.003.005.290.509.507.388.002.005.911.009.007.739.001.007.磷酸盐缓冲液(1)磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液(0.2)pH0.2 mol/LNa2HPO4心)0.2 mol/LNaH2PO4

10、()5.88.092.05.910.090.06.012.387.76.115.085.06.218.581.56.322.577.56.426.573.56.531.568.56.637.562.56.743.556.56.849.551.06.955.045.0pH0.2 mol/LNa2HPO4日)0.2 mol/LNaH2PO4()7.061.039.07.167.033.07.272.028.07.377.023.07.481.019.07.584.016.07.687.013.07.789.510.57.891.58.57.993.07.08.094.75.36.242.008.0

11、08.049.500.506.473.007.008.349.750.256.644.006.008.679.900.106.816.985.006.005.004.008.1810.000Na2HPO42H2O分子量=178.05 , 1/15M溶液为11.876克/升。KH2PO4分子量=136.09, 1/15M溶液为9.078克/升。8.磷酸二氢钾-氢氧化钠缓冲液(0.05M)X毫升0.2M K2PO4+ Y毫升0.2N NaOH加水稀释至29毫升pH(20 C)X ()Y (#)pH(20 C)X(计)Y (#)5.850.3727.052.9636.050.5707.253.500

12、6.250.8607.453.9506.451.2607.654.2806.651.7807.854.5206.852.3658.054.6809.巴比妥钠-盐酸缓冲液(18C)pH0.04M巴比妥钠溶液0.2V盐酸pH0.04M巴比妥钠溶液(毫升)0.2N盐酸(毫升)6.810018.48.41005.217.010017.88.61003.827.210016.78.81002.527.410015.39.01001.657.610013.49.21001.137.810011.479.41000.708.01009.399.61000.358.21007.21100巴比妥钠盐分子量=20

13、6.18;0.04M溶液为8.25克/升10. Tris-盐酸缓冲液(0.05M , 25C)50毫升0.1M三羟甲基氨基甲烷(Tris)溶液与X毫升0.1N盐酸混匀后，加水稀释至100毫升。pHX(裕)pHX()7.1045.78.1026.27.2044.78.2022.97.3043.48.3019.97.4042.08.4017.27.5040.38.5014.77.6038.58.6012.47.7036.68.7010.37.8034.58.808.57.908.0032.029.28.907.0三羟甲基氨基甲烷(Tris) HOCH2 CH2OHCHOCH2 NH2分子量=121

14、.14;0.1M溶液为12.114克/升。Tris溶液可从空气中吸收二氧化碳，使用时注意将瓶盖严。11.硼酸-硼砂缓冲液（0.2M硼酸根）pH0.05M硼砂(#)0.2M硼酸(#)pH0.05M硼砂(#)0.2M硼酸(#)7.41.09.08.23.56.57.61.58.58.44.55.57.82.08.08.76.04.08.03.07.09.08.02.0硼砂Na2B4O710H2O,分子量=381.37;0.05M溶液（=0.2M硼酸根）含19.07克/升。硼酸H3BO3,分子量=61.83,0.2M溶液为12.37克/升。硼砂易失去结晶水，必须在带塞的瓶中保存。12.甘氨酸-氢氧化

15、钠缓冲液（0.05M）X毫升0.2M甘氨酸+Y毫升0.2NnaOH加水稀释至200毫升pHXYpHXY8.6504.09.65022.48.8506.09.85027.29.0508.810.05032.09.25012.010.45038.69.45016.810.65045.5甘氨酸分子量=75.07;0.2M溶液含15.01克/升。13.硼砂-氢氧化钠缓冲液（0.05M硼酸根）X毫升0.05M硼砂+Y毫升0.2NNaOH加水稀释至200毫升pHXYpHXY9.3506.09.85034.09.45011.010.05043.09.65023.010.15046.0硼砂Na2B4O710H

16、2O,分子量=381.43;0.05M溶液为19.07克/升。14.碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液（0.1M）Ca2+、Mg2+存在时不得使用pH0.1MNa2CO3(日*)0.1MN2HCO3(日*)20C37 C9.168.77199.409.12289.519.40379.789.50469.909.725510.149.906410.2810.087310.5310.288210.8310.5791Na2CO2l0H2O分子量=286.2;0.1M溶液为28.62克/升。N2HCO3分子量=84.0;0.1M溶液为8.40克/升。15.“PBS缓冲液pH7.67.47.27.0H2O10001

17、0001000100mlNaCl8.58.58.58.5gNa2HPO42.22.22.22.2gNaH2PO40.10.20.30.4gpH标准缓冲溶液Standard pH Buffer Solutions名称(Name)配制(Compounding way)不同温度时的pH值(pH in different temperatures)0C5C10C15 C20C25 C30 C35 C40 C草酸盐标准缓冲溶液cKH3(C2Q)2 2H2O为0.05mol/L。称取12.71g四草酸钾KH3(C2Q)22H2O溶 于无二氧化碳的水 中，稀释至1000ml1.671.671.671.671

18、.681.681.691.691.69不同温度时的pH值(pH in different temperatures)45 C50 C55 C60 C70 C80 C90 C95 C-1.701.711.721.721.741.771.791.81-酒石酸 盐标准 缓冲溶 液在25C时，用无二 氧化碳的水溶解外 消旋的酒石酸氢钾(KHC4H4C6),并剧烈 振摇至成饱和溶液不同温度时的pH值(pH in different temperatures)0C5C10C15 C20C25 C30 C35 C40 C-3.563.553.553.55不同温度时的pH值(pH in different t

19、emperatures)45 C50 C55 C60 C70 C80 C90 C95 C-3.553.553.553.563.583.613.653.67-苯二甲酸氢盐标准缓冲溶液c(C6HCOHCOK)为0.05mol/L,称取于(115.0士5.0) C干 燥23h的邻苯二 甲酸氢钾(KHCHLQ) 10.21g， 溶于无CO的蒸彳留水，并稀释至1000ml(注：可用于酸度计 校准)不同温度时的pH值(pH in different temperatures)0 C5C10C15 C20C25 C30 C35 C40 C4.004.004.004.004.004.014.014.024.0

20、4不同温度时的pH值(pH in different temperatures)45 C50 C55 C60 C70 C80 C90 C95 C-4.054.064.084.094.134.164.214.23-磷酸盐标准缓冲溶液分别称取在(115.0士5.0)C干燥2 3h的磷酸氢二钠(N&HPO) (3 . 53士0.01)g和磷酸二 氢钾(KHPQ) (3 . 39士0.01)g,溶于预 先煮沸过15不同温度时的pH值(pH in different temperatures)0 C5C10C15 C20C25 C30 C35 C40 C6.986.956.926.906.886

21、.866.856.846.84不同温度时的pH值(pH in different temperatures)45 C50 C55 C60 C70 C80 C90 C95 C-30min并迅速冷却的蒸偕水中，并稀释至1000ml(注：可用于酸度计校准)6.836.836.836.846.856.866.886.89-硼酸盐标准缓冲溶液c(Na2BQ I0H2O)称 取硼砂(N&B4。10H2。)(3 .80 0 . 01)g(注意：不能烘！)，溶于预先煮沸过1530min并迅速 冷却的蒸偕水中，并 稀释至1000ml。置 聚乙烯塑料瓶中密 闭保存。存放时要防 止空气中的CO2的进 入(注

22、：可用于酸度计校准)不同温度时的pH值(pH in different temperatures)0C5C10C15 C20C25 C30 C35 C40 C9.469.409.339.279.229.189.149.109.06不同温度时的pH值(pH in different temperatures)45 C50 C55 C60 C70 C80 C90 C95 C-9.049.018.998.968.928.898.858.83-氢氧化 钙标准 缓冲溶 液在25 C,用无二氧 化碳的蒸偕水制备 氢氧化钙的饱和溶 液。氢氧化钙溶液的 浓度c1/2Ca(OH)2应在(0.04000.0412

23、) mol/L。氢 氧化钙溶液的浓度 可以酚红为指示剂， 用盐酸标准溶液c(HCl)=0.1mol/L滴定测出。存放时要 防止空气中的二氧化碳的进入。出现混 浊应弃去重新配制不同温度时的pH值(pH in different temperatures)0C5C10C15 C20C25 C30 C35 C40 C13.4213.2113.0012.8112.6312.4512.3012.1411.98不同温度时的pH值(pH in different temperatures)45 C50 C55 C60 C70 C80 C90 C95 C-11.8411.7111.5711.45-注：为保证pH值的准确度，上述标准缓冲溶液必须使用pH基准试剂配制常用pH缓冲溶液的配制和pH值Preparation and pH Values of Common pH Buffer Solutions序号(No.)溶液名称(Solution name)配制方法(Preparation)pH值(pH value)1氯化钾-盐酸13.0 ml 0.2 mol/L HCl与25.0 ml 0.2mol/L KCl混合均匀后，加水稀释至100 ml1.72氨基乙酸-盐酸在500 ml水中溶解氨基乙酸150 g,加480 ml浓盐