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1、会计学1实验二细菌革兰氏染色实验二细菌革兰氏染色第1页/共17页(革兰)于1884年发明的一种鉴别不同类型细菌的染色方法。二、实验原理二、实验原理第2页/共17页 革兰氏染色革兰氏染色1、用碱性染料结晶紫对菌液涂片进行、用碱性染料结晶紫对菌液涂片进行初染初染2、用碘溶液进行、用碘溶液进行媒染媒染,其作用是提高染料和细,其作用是提高染料和细 胞间的相互作用从而使二者结合得更牢固。胞间的相互作用从而使二者结合得更牢固。3、用乙醇或丙酮冲洗进行、用乙醇或丙酮冲洗进行脱色脱色。在经历脱色后。在经历脱色后 仍将结晶紫保留在细胞内的为革兰氏阳性细仍将结晶紫保留在细胞内的为革兰氏阳性细 菌,而革兰氏阴性细菌

2、的结晶紫被洗掉,细菌,而革兰氏阴性细菌的结晶紫被洗掉,细 胞呈无色。胞呈无色。4、用一种与结晶紫具有不同颜色的碱性染料对、用一种与结晶紫具有不同颜色的碱性染料对 涂片进行涂片进行复染复染。例如沙黄,它使原来无色的。例如沙黄,它使原来无色的 革兰氏阴性细菌最后呈现桃红到红色,而革革兰氏阴性细菌最后呈现桃红到红色,而革 兰氏阳性细菌继续保持深紫色兰氏阳性细菌继续保持深紫色第3页/共17页第4页/共17页三、实验材料三、实验材料1、菌种:大肠杆菌()、枯草杆菌()、菌种:大肠杆菌()、枯草杆菌()2、染料:结晶紫、复红、碘液等、染料:结晶紫、复红、碘液等3、材料:、材料:95%酒精等酒精等4、标本片

3、:芽孢、荚膜、孢子丝、标本片:芽孢、荚膜、孢子丝第5页/共17页四、实验方法四、实验方法(一)革兰氏染色(一)革兰氏染色第6页/共17页Smear preparation 第7页/共17页 Heat fixing第8页/共17页crystal violet stain wash with water Staining第9页/共17页 Counterstain with Safranin 第10页/共17页第11页/共17页第12页/共17页1、荚膜、荚膜第13页/共17页2、芽孢、芽孢第14页/共17页3、孢子丝、孢子丝第15页/共17页五、思考题五、思考题1、讲述革兰氏染色的原理,并指出和分别属于革兰氏阳、讲述革兰氏染色的原理,并指出和分别属于革兰氏阳性或阴性?性或阴性?2、绘图表示三种细菌的特殊结构。、绘图表示三种细菌的特殊结构。3、做革兰氏染色涂片为什么不能过于浓厚?革兰氏染色、做革兰氏染色涂片为什么不能过于浓厚?革兰氏染色成败的关键一步是什么?成败的关键一步是什么?4、当对未知菌进行革兰氏染色时,怎样能证明你

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