共刺激分子PD-L1、PD-L2和B7-H4在宫颈癌中的表达及病理特征研究

1、    共刺激分子pdl1、pdl2和b7h4在宫颈癌中的表达及病理特征研究    黄庆文等xdoi：10.3969/j.issn.1007-614x.2017.30.77摘要 目的：探讨共刺激分子pd-l1、pd-l2和b7-h4在宫颈癌中的表达及病理特征。方法：收治宫颈癌患者35例作为试验组，另选择宫颈上皮组织正常患者34例作为对照组。结果：pd-l1、b7-h4在正常宫颈中几乎不表达，在上皮细胞瘤变组织中pd-l2和b7-h4值与对照组相比，差异均具有统计学意义（p10mm的组织中，pd-l1的表达情况明显高于浸润的深度，其高出的部分10mm（p&

2、lt;0.05）；发生淋巴转移患者组织中pd-l2的表达情况明显高于无淋巴转移者（p<0.05）；淋巴癌患者的宫颈癌组织中的b7-h4表达情况明显高于淋巴转移者（p<0.05）。结论：宫颈癌患者高表达与肿瘤的淋巴侵袭力以及转移有关，即pd-l1、pd-l2和bt-h4发生高表达现象。关键词 共刺激分子；pd-l1；pd-l2；b7-h4；宫颈癌宫颈癌是最常见的威胁女性健康的恶性肿瘤之一。大量的调查显示，近年来宫颈癌的发生率在逐年上升，并且年轻女性的患病率也在逐渐增加。因此，做好宫颈癌的防治工作，对我国的女性健康有着重要意义。据相关文献报告，在宫颈癌患者的局部微循环境中，往往会存在t

3、细胞免疫水平较为低下的情况。在抑制肿瘤生长、扩散、杀伤肿瘤细胞和识别肿瘤细胞方面，t细胞发挥着重要作用。2014年1月-2017年1月收治宫颈癌患者35例，探究共刺激分子pd-l1、pd-l2和b7-h4在宫颈癌中的表达及病理特征，现将探究结果进行如下报告。资料与方法2014年1月-2017年1月收治宫颈癌患者35例作为试验组，患者年龄3565岁，平均（43.15±2.15）岁；其中鳞状细胞癌29例，腺癌6例。另选择34例宫颈上皮组织正常者作为对照组。两组上述一般资料间差异无统计学意义（p>0.05），能进行比较。方法：仪器为digiretina 16；显微镜为光学显微镜；并选

4、择由基因公司生产的兔抗人pd-l1、兔抗人pd-l2以及兔抗人b7-h4，选用福州迈新公司生产的二抗的试剂盒。全部患者样本均选用石蜡切片，并采用常规的方式进行脱蜡脱水，使用浓度3%过氧化氢进行孵育，时间10 min，目的是消除内源性过氧化氢物酶的活性，并使用pbs清洗3次，先使用枸橼酸钠缓冲液进行pd-l1和pd-l2抗原修复，使用tris-edta对b7-h4的抗原进行修复。冷却后，使用pbs清洗3次，滴入pd-l1抗体、pd-l2抗体和b7-h4，4环境中静置1夜。使用pbs洗3次，并向其中加入酶标羊抗鼠，兔igg聚合物。在室温环境中30 min，用pbs同样清洗3次，并使用dab进行显示

5、。再使用苏木精进行复染，最后使用中性树脂对其进行封片。观察指标：观察pd-l1、pd-l2和b7-h4在胞膜胞质中的染色情况。疗效评价标准：pd-l1、pd-l2和b7-h4在胞膜胞质中的染色情况，棕黄色为阳性，无染色为阴性。统计学方法：以spss 18.0软件统计分析此次研究数据，计量资料以（x±s）表示，使用t检验；计数资料以率（%）表示，用x2检验，p<0.05表示差异有统计学意义。结果pd-l1、pd-l2和b7-h4在正常宫颈组织、宫颈上皮内瘤变以及宫颈癌组织中的表达结果：pd-l1、b7-h4在正常的宫颈中几乎不表达；在上皮细胞瘤变组织中，pd-l2和b7-h4值与

6、对照组相比，差异均有统计学意义（p<0.05）；在宫颈癌组织中，pd-l1、pd-l2和bt-h4与对照组相比均较高。宫颈癌临床病例特点与pd-l1、pd-l2和bt-h4表达的相关性：患者的肿瘤浸润度>10 mm的组织中，pd-l1表达为明显高浸润的深度，其高出的部分10mm，差异均具有统计学意义（p<0.05）；发生淋巴转移患者组织中pd-l2的表达情况要明显高于无淋巴转移的，差异有统计学意义（p<0.05）；发生淋巴癌患者的患者宫颈组癌组织中的b7-h4表达情况要明显高于淋巴转移者，差异均有统计学意义（p<0.05）。讨论共刺激分子在t细胞功能中能够发挥重要

7、作用，主要包括促进增殖化分的正调控因子以及激活t细胞等。在b7家族中，负性调控因子是一个重要的组成部分，bt-h4主要是从卵巢癌中克隆得到的，并且在除宫颈癌的乳腺癌以及肺癌等多种癌症组织中都有表达，其在表达方面都与肿瘤的病理特征存在一定联系。pd-l1和pd-l2也是b7家族成员的重要组成部分之一，也能够引起t细胞凋亡和失去功能，使腫瘤细胞能够继续增长。本次探究发现，pd-l1、pd-l2和b7-h4在正常的宫颈细胞中几乎不表达，pd-l1、pd-l2和bt-h4在上皮细胞瘤变中表达的情况明显好于正常宫颈组织，并且pd-l1、pd-l2和bt-h4在宫颈癌组织表达的情况明显好于上皮细胞瘤变。说明负性调节的共刺激分子在恶性肿瘤组织