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文档简介
1、目的与要求1学习直 接测定 家兔动 脉血压的急性实 验的方 法2观察神经,体液因素对心血管活动的影响基本原理在正常人体内,任何高等动物的动脉血压时相对稳定的.这种相对稳定是通过神 经和体液调节来实现的,其中以静动脉窦-主动脉弓压力感受性反射最为重要.此 反射即可使升高的血压下降,又可使降低血压升高,故有血压缓冲反射之称.家兔 的主动脉神经在解剖上独成一支,易于分离与观察起作用本实验是应用液导系统直接测定动脉血压,即由动脉插管与压力传感器连通,其 内充满抗凝液体,构成液导系统,将动脉插管插入动脉,动脉内的压力及其变化,可通过封闭的液导系统传导压力感受器,由计算机采集系统记录下来动物与器材家兔,手
2、术台,常用手术器械,止血钳,眼科剪,支架,双凹管,气管插管,动脉 插管,三道管,动脉夹,计算机采集系统,压力传感器,保护电极,照明灯,纱布,棉球,丝线,注射器(1ml,5ml,20ml),生理盐水,4%柠檬酸钠,20%-25%氨基甲酸已 酯,肝素(200U/ml),肾上腺素(1:5000),已酰胆碱(1:10000)【方法与步骤】1、实验仪器的准备打开计算机采集系统,接 通压力传感器。从 显示器的“实验项目”中 找出“循环 实验”的“家兔血压的调节”条,使显示器显示压力读数。2、连通液导系统并制压将压力传感器的下方支管, 通过输液管连接三通管, 再连接动脉插管。 上 侧管供 制压时排除管内空气
3、使用。 先用装有20ml4%柠檬酸钠的注射器,通过三通管向 连接动脉 插管的 输液管内 推注,使 之充满液体(不 要使动 脉插管高 过压力传感器 的上方支管)后,再 用止血钳夹住动脉插管端的输液管。然 后继续向三通管内推 注,直至充满压力传感器的上方支管,并 用塞子塞住( 注意:液导系统内不可有 气 泡 )。继 续 向 三 通 管 内 推 注 ,同 时 观 察 显 示 器上 压 力 变 化 。当 加 压 到120mmHg时既可关闭三通管。观察压力是否变化,如 果压力下降,则 需要检查液导系统的 漏液原因,并重新制压。调节血压显示器的灵敏度,使30130mmHg的变化都能 在显示器上明显的反映出
4、来。将动脉插管端的导管内充满肝素溶液。3、动物的准备(1) 按 照 实 验4-9方 法 , 麻 醉 家 兔 并 进 行 颈 部 手 术 , 插 入 气 管 插 管 、 分 离 主 动 脉神经。同 时分离迷走神经并穿线备用。再 将止血钳从颈总动脉下方穿过,轻 轻 张开止血钳,分离出23cm长的颈总动脉。分离出的颈总动脉外壁应该十分光洁, 外面并无结缔组织及脂肪等物。在 动脉上穿两条备用棉线,分 别打上活结。将两 线分别拉 至分离 出的动脉 两端备 用。同样方法分 离另一侧 血管与 神经(一 侧动脉 用于插管侧压,另侧动脉实验用)。由于家兔的品种不同,个体之间也有差异, 常发现3条神经的解剖位置有
5、些变异。主动脉神经的最后确认,蓄意对血压的影 响为准。(2)动 脉插管 首先用5ml注射器从耳缘静脉注入肝素(200U?kg体重)以 防 凝血。然后在一侧动脉行动脉插管术以记录血压。其方法如下:将动脉头端的备用线尽可能靠头端结扎( 务必扎紧,以 防渗血),然 后在另 一备用线的向心侧( 尽可能近心端),用 动脉夹夹闭。轻 轻提起动脉头端的结扎 线 ,用 锐 利 的 眼 科 剪 在 靠 近 扎 线 的 稍 后 方 ,沿 向 心方 向 斜 向 剪 开 动 脉 上 壁( 注 意 : 不可只剪开血管外膜,也 切勿剪断整个动脉,剪 口大小约为管径的一半) 。一 手 持弯头眼科 镊,将其一 个弯头从剪口
6、处插进 动脉少许,轻轻挑起 剪开的 动脉上 壁, 另一手将 准备好 的动脉插 管由开 口处插 入动脉 管内。如果 插入较 浅,可 用 一手轻 轻捏住进入插管的动脉管壁,另一手拿住动脉插管,顺势轻轻推进至68mm左右 (如果手感滞涩,说 明插管并未进入动脉,必 须退出插管,重 新剪口再插),用 备用线将动脉连同进入的 插管扎紧(插管不可因扎线松动 而滑出,亦不可漏液), 并将余线系在插管的固定侧支上,以免滑脱。注 意:插管 应与动脉血管的 方向一 致,以防插管尖端扎破动脉管壁。轻 轻取下向心端动脉夹,可 见动脉血与插管内 液 体 混 合 。再 取 下 通 向 压 力 传 感 器 的 止 血 钳
7、,此 时 显 示 器 上 出 现 血 压 的 波 动 曲线 。4、实验观察(1) 观 察 正 常 血 压 曲 线 调 节 扫 描 速 度 与 增 益 , 可 以 明 显 地 观 察 到 心 室 射 血 与 主动脉回缩形成的压力变化与收缩压、舒张压的 读数。有时可以观察到血压曲线 随呼吸变化,心 搏为一级波,呼 吸波为二级波。然 后将扫描速度调慢,观 察正常 血压曲线。(2) 轻 轻 提 起 对 侧 完 好 颈 总 动 脉 上 的 备 用 线 , 用 动 脉 夹 夹 闭30s( 于 夹 闭 前 记 录动脉通畅时的血压曲线),观察并记录血压变化。出现变化后即取下动脉夹, 记录血压的恢复过程。(3)
8、 记 录 对 照 血 压 曲 线 后 , 用 手 指 按 压 颈 动 脉 窦 ( 下 颌 下 方 内 侧 ) , 观 察 并 记 录血压变化 。当血压 明显下 降时,则 停止按 压,待血 压恢复(如 果血压 反而升 高, 说明按压的是血管,需重新寻找按压位置)。(4) 刺 激 主 动 脉 神 经 使 刺 激 输 出 端 连 接 保 护 电 极 , 轻 轻 提 起 主 动 脉 神 经 上 的 备 用线 ,小 心 地 将 神 经 置 于 保 护 电 极 之 上 。记 录 对 照 血 压 曲 线 后 ,再 用 中 等 强 度 的连续电 脉冲信 号,通过 保护电 极,刺 激神经1020s。血压 出现明
9、 显下降 后即 可停止刺激,并 待血压恢复。如 果血压并不下降,可 调整刺激强度或刺激频率再 行刺激。任 何刺激都无效时,则 表示此神经并非主动脉神经。需 要重新辨认神经 后再行实验。(5)分 别 刺 激 主 动 脉 神 经 中 枢 端 和 外 周 端 双 结 扎 主 动 脉 神 经 后( 务 必 结 扎 ), 从两扎线 结之间 剪断神经 。记录对 照血压后,同法 分别刺激神经 的中枢端 和外周 端,观察并记录血压变化。(6) 刺 激 迷 走 神 经 记 录 对 照 血 压 后 , 用 同 样 的 方 法 刺 激 迷 走 神 经 , 观 察 血 压 下降曲线 与(4)有何 不同(如果血 压下降
10、 很快、很低,应 立即停 止刺激 )。(7)结 扎 并 剪 断 迷 走 神 经 同 时 结 扎 双 侧 迷 走 神 经 后 剪 断 ,观 察 血 压 有 何 变 化 。(8) 刺 激 迷 走 神 经 外 周 端 分 别 刺 激 两 侧 迷 走 神 经 外 周 端 , 观 察 并 记 录 血 压 变 化有何不同。(9) 肾 上 腺 素 对 血 压 的 影 响 记 录 对 照 血 压 曲 线 后 , 用1ml注 射 器 , 从 耳 缘 静 脉 注 入0.10.3ml肾 上 腺 素 溶 液 , 观 察 并 记 录 血 压 变 化 及 恢 复 曲 线 。(10)乙 酰胆碱 对血压的 影响 同法注 入0
11、.10.2ml乙酰胆 碱溶液, 观察并 记 录注射前后血压变化。(11)失血对血压的影响 从另一侧动脉插管后慢慢放血,观察放血量对血压 的影响。5、整理实验结果,并将实验结果填入下表家兔血压实验记录表实验前血压对照实验时血压变化极值恢复稳定值夹闭另一侧颈总动脉按压颈动脉窦刺激主动脉神经刺激主动脉神经中枢端刺激主动脉神经外周端剪断双侧迷走神经刺激左侧迷走神经外周端刺激右侧迷走神经外周端注入肾上腺素溶液注入乙酰胆碱溶液失血1(ml)失血2(ml)失血3(ml)【思考题】1、讨论各项实验结果,说明血压正常及发生变化的机理。2、如何证明主动脉神经是传入神经?3、如何证明迷走神经外周端对心脏有调节作用?
12、4、试分析主动脉神经放电与血压变化的关系。5、根据实验结果,说明神经、药物对心率与呼吸的影响。三、参数设置:(一)RM6240系统:点击“实验”菜单,选择“循环”或“自定义实验项目”菜单中的“兔动脉血压调节”。系统进入该实验信号记录状态。仪器参数:4通道时间常数为直流,滤波频率100Hz,灵敏度12Kpa,采样频率800Hz,扫描速度500ms/div。连续单刺激方式,刺激强度510V,刺 激波宽2ms刺激频率30 Hz。(二)实验内容1.正常血压曲线。2.夹闭右侧颈总动脉。3.刺激减压神经:(1)刺激完整减压神经(2)刺激减压神经中枢端(3)刺激减压神经外周端。4.刺激迷走神经外周端。5.静
13、脉注射NE 0.5ml。(三)注意事项:1.分离减压神经注意:减压神经要从向心端开始往头端分离,避免损伤神经,分离时不使神经上带有结缔组织膜,分离后滴加生理盐水以防干燥,穿2根线备用。2.连接仪器:注意避免动脉插管滑出。3.夹闭颈总动脉时勿牵拉动脉(夹闭,血压增高;牵拉,血压下降)。4.刺激减压神经,如神经损伤,向头端移动(与减压神经放电移动方向相反)。5.刺激右侧迷走神经末梢端,血压.心率变化更为明显。三、实验报告要求:(10分)1.实验结果:各种影响因素引起动脉血压变化曲线图。(不要求观察定量变化)曲钱类型:血圧248.00252 00256 00260 DD2&4 00268 0
14、0130 rISfiSt中枢砂旺辑癡担668.00672 00676 M&50 00634 006B8 0D 692.004刺激夕卜周谎減压神经曲线类型:血压4T2.aO 4T6.00480.00484.00斗BS.OQ 492.00496 00t复刺漑:频率30HrSGT 00870. 00873 0076 00870.00&82 00885 00J辰申阿.吗护Jum2.实验讨论:(各1分)1)夹闭颈总动脉,血压升高:夹闭颈总动脉T颈动脉窦血压下降T颈动脉窦压力感受器受到刺激减弱T窦神经传入冲动/心迷走中枢(抑制)T迷走神经传出冲动减少T心跳加快.加强T心输出量增多 减少T心
15、交感中枢(兴奋)/小静脉收缩T回心血量增多T血压升高交感神经传出冲动增多交感缩血管中枢(兴奋)/小动脉收缩T外周阻力增大 /2)刺激完整减压神经及其中枢端均可引起血压下降,而刺激该神经外周端基本不变:兔减压神经是传入神经, 其作用是将主动脉弓感受器发出的冲动传入延髓心血 管中枢,反射性引起血压降低。 因此,刺激完整的减压神经或其中枢端, 使传入中枢的冲动增加, 致血压明显下降,而刺激其外周端虽又冲动传向外周,但不会引起血压变化3)刺激迷走神经末梢外周端,引起血压下降在实验中, 多用刺激右迷走神经外周端, 其中的副交感神经纤维兴奋, 释放乙 酰胆碱,乙酰胆碱与心肌细胞膜上的M受体结合,产生负性变
16、时,变力,变传导作用,出现心率减慢,心输出量下降,血压下降。4)静脉注射去甲肾上腺素后血压升高:实验结果各种影响因素引起动脉血压变化曲线图结果分析1.夹闭一侧颈总动脉15s后,观察到兔动脉血压升高的现象 :这是由于颈动脉窦管壁的外膜下分布有丰富的感觉神经末梢,是动脉张力感受器。这个感受器位于兔颈总动脉的远心端,颈内动脉与颈外动脉的分叉交界处。夹闭颈动脉后, 远心端的颈动脉窦张力感受器感受到血压下降, 传出神经冲动的频率减慢。 信息沿窦神经上 传至延髓孤束核心血管中枢。 使心迷走紧张减弱,心交感和心缩血管紧张加强, 作用于心脏, 使心率加快,心输出量增加,血管收缩,血管外周阻力增加。从而血压恢复
17、性升高。若血压 下降过大, 交感缩血管紧张还会扩展到静脉系统, 是静脉收缩,促进血液回心,使每博输出 量增加。2.刺激完整减压神经及其中枢端均可引起血压下降,而刺激该神经外周端基本不变: 兔减压神经是传入神经,其作用是将主动脉弓感受器发出的冲动传入延髓心血管中枢,反射性引起血压降低。因此,刺激完整的减压神经或其中枢端,使传入中枢的冲动增加,致血压明显下降,而刺激其外周端虽又冲动传向外周,但不会引起血压变化。3.刺激迷走神经后观察到,朿9激迷走神经和迷走神经外周端都能引起明显的减压反应, 而刺激迷走中枢端则没有减压反应,只是稍有轻微抬升变化 :迷走神经中含从延髓下行的传出纤维,通向心脏。节前纤维
18、末端释放Ach,节后纤维末端释放Ach,属于副交感神经纤维,能使CAMP浓度降低,心率减慢,心房收缩力减弱,传导性减弱。从而使心输出量变小,平均动脉压降低。此外,还有主动脉体化学感受器的上行 纤维在迷走神经中并行,化学感受器受刺激的效应是血压升高。所以,刺激迷走中枢不能引起减压反应,却可以使血压轻微抬高。此外,若切断两侧迷走神经,迷走紧张消失,迷走吸 气兴奋反射通路也断了,动物的吸气变深,周期变长,二级曲线周期性变得不明显。4.加入0.2ml0.01%去甲肾上腺素后,观察到平均动脉压抬高。这是由于去甲肾上腺素与血管平滑肌上的a和B2甲肾上腺素能受体结合,使血管收缩,管径变小,外周阻力增加,从而
19、使平均动脉压升高。此外,去甲肾上腺素还可以使心 率增加,心收缩力变大。只是缩血管效应更明显。5.加入0.2ml0.01%乙酰胆碱后,观察到一级曲线周期变慢,平均动脉压下降。Ach能使CAMP浓度降低,心率减慢,心房收缩力减弱,传导性减弱。心率变慢则流 向外周的血量变多,舒张压更低。心房收缩力减弱则收缩压也有下降。平均动脉压降低。但是因为血回心时间变长,因此,回心血量较多,脉压增加。而大多数血管没有Ach受体,Ach对外周阻力影响不大。兔动脉血压调节(ZT)2008-07-29 17:53:27兔动脉血压调节【实验目的】观察神经和体液因素对血压和心率的影响;学习哺乳动物动脉血压(blood pr
20、essure)的直接描记方法。【实验原理】心血管活动主要受神经、体液和自身调节。神经调节一般是通过反射(reflex)的形式实现的,包括压力感受性反射(baroreceptor reflex)、心肺容量感受性(cardiopulmo naryreceptor)反射、化学感受性(chemoreceptor)反射等,通过改变交感及副交感传出神经的紧张性活动,调节心血管机能;体液调节则涉及肾素-血管紧张素系统(RAS、肾上腺素和去甲肾上腺素、加压素、内皮缩血管因子(EDCF、内皮舒血管因子(EDRF、激肽、 前列腺素(PGs)等多个方面。本实验将通过观察血压和心率来反映心血管活动的变化。血 液充盈、
21、心脏射血和外周阻力是形成血压的基本因素,上述调节机制可通过作用于上述3个方面,调节动脉血压。【实验动物】家兔【实验器材和药品】BL-420E生物机能实验系统,血压换能器,兔手术台,哺乳动物手术器械1套,注射器数 支,小烧杯1个,丝线(黑色、白色粗线)若干。3戊巴比妥钠,生理盐水,0.3肝素,1:10,000去甲肾上腺素, 5:100,000肾上腺素,1:100,000乙酰胆碱。【实验方法和步骤】1.动物称重、耳缘静脉注射3%戊巴比妥钠1ml/kg麻醉,固定。2.手术:(1)分离右侧减压神经、迷走神经和颈总动脉作颈部正中切口67cm,分离皮下组织及肌肉,将颈部气管旁软组织外翻, 可见与气管平行的
22、一侧血管神经丛,即为颈总动脉鞘, 包括 了颈总动脉和伴行的三条神经最粗的迷走神经、最细的减压神经、 交感神经。 用玻璃分针分离出右侧减压神经、迷走神经和颈总动脉,各穿两根不同颜色的丝线备用。左侧颈总动脉分离、插管:在气管左侧用玻璃分针分离出一段至少长34cm的颈总动脉, 穿两根线备用。结扎远心端,在近心端夹上动脉夹(二者距23cm)。在近远心端稍下方用眼科剪剪一“V字形小口,插入预先灌满肝素的动脉插管,用丝线固定。3仪器连接:将连接动脉插管的血压换能器及刺激电极通过相应插孔连接在BL-420E系统的前面板上。打开BL-420E系统,选择项目“循环实验兔动脉血压调节,记录血压。4观察项目(1)正
23、常血压曲线描计: 常见的正常血压波型有:一级波,为心搏波,伴随心脏收缩、舒张 出现的血压波动,频率与心率一致;二级波,为呼吸波,伴随呼吸运动的血压波动,频率与 呼吸频率一致。另外,偶尔还可见到三级波,为一种低频、缓慢波动,可能与血管运动中枢 周期性的紧张性变化有关。(2)神经体液因素对血压、 心率的影响 牵拉颈总动脉: 手持左侧颈总动脉远心端结扎线,向心脏方向以25次/秒有节奏的往复牵拉,持续510秒,观察血压、心率变化。 夹闭颈总动脉: 用动脉夹夹闭右侧颈总动脉510秒,观察血压、心率变化。刺激减压神经:用双极保护电极刺激右侧减压神经, 观察血压、心率的变化。 再用双线结扎减压神经, 在结
24、扎线中间剪断神经,以相同刺激参数分别刺激其中枢端和外周端,观察血压、心率的变化。刺激迷走神经: 结扎并剪断右侧的迷走神经,分别刺激其外周端和中枢端,观察血压、心率变化。 去甲肾上腺素 由耳缘静脉注射1:10,000去甲肾上腺素0.20.3ml,观察血 压、心率变化。 肾上腺素 由耳缘静脉注射5:100,000肾上腺素0.20.4ml,观察血压、 心率变化。 乙酰胆碱 由耳缘静脉注射1:100,000去甲肾上腺素0.20.3ml,观察血压、 心率变化。【结果与分析】1.正常血压阻蚱总颈动脉翌胃压力感受m実神经传 动脉血流血压下降器冲动减少人冲动减少.心迷走中枢抑制迷走神疑便出冲功减少缩血管中枢炜
25、交感神觀復出冲勒增多2.夹闭颈总动脉血压升高心跳加快*加强心输出垢增多外周小静脉收缩小动脉收缩血压升高回心血豈增參3.刺激减压神经血压下降剌激诚压神经中枢端S3减压神经传人冲动増多心迷走中枢兴奋 心交感中枢抑制 缩血管中枢抑制4.刺激迷走神经血压下降OmmHg-90mrtiKg-刺激迷走神经外周谛LSOmmJKgmmHg迷走神经传出冲动増多心率减慢、心缩力减弱小静脉舒张回心血量减少水动脉舒张外周阻力降低SOmmUg轴礙富礦碎枢端心输出量减少血压降1氐静脉注射去甲沓上腺索刺激迷走神经的外周端,迷走神经的兴奋传导至心脏,抑制了心脏的搏动,心脏搏动减慢 血压下降。5.静脉注射O.1g/L去甲肾上腺素
26、0.3ml,血压升高心输岀量诚少ii压降低翻端心房肌收心迷走神经传出冲动増务迷走補经末梢释乙旣胆碱与 心粧 H 受怵结合房室传导遠度诚慢糧高细胞膜对IT的通透性隆低细炮膜对的通透性去甲肾上腺素与血管 平滑肌上口受怖结合去甲肾上腺素与匕肌 细胞上的E受体绪合心率减慢、心縮力减弱6.静脉注射10-2g/L乙酰胆碱(0.1ml/kg体重),血压下 降乙酰胆碱与M受体结合心率、心缩力J血管舒张血压下降减压神经为传人神经,冲动在神经纤维中单向传导,故只有 刺激减压神经,刺激减压神经中 枢端会影起血压下降.迷走神经为复合神经.故刺激迷走神经,迷走神经外周端”迷走神经中枢端都会影起血压下降.【实验结论】1.
27、支配心脏的传出神经为心交感神经和心迷走神经(1)心交感神经及其作用:心交感神经的节前神经元位于脊髓第1-5胸段的中间外侧柱, 其轴突末梢释放的递质为乙酰胆碱,后者能激活节后神经元膜上的N型胆碱能受体。心交感节后神经元末梢释放的递质为去甲肾上腺 素,与心肌细胞膜上的3型肾上腺素能受体结合, 可导致心率加快,房室交界的传导加快,外周阻T増加心输岀量增加注射去甲肾上腺寰血管强力收缩心房肌和心室肌的收缩能力加强。 这些效应分别称为正性变时作用、正性变传导作用和正性变力作用。(2)心迷走神经及其作用支配心脏的副交感神经节前纤维行走于脑神经干中。心迷走神经节后纤维末梢释放 的乙酰胆碱作用于心肌细胞膜的M型
28、胆碱能受体,可导致心率减慢,心房肌收缩能力减弱,心房肌不应期缩短,房室传导速度减慢,即具有负性变时、变力和变传导作用一般说来,心 迷走神经和心交感神经对心脏的作用是相佶抗的。但当两者同时对心脏发生作用时,在多数情况下,心迷走神经的作用比交感神经的作用占有较大的优势。在动物实验中如刺激心迷走-交感神经干,常出现心率减慢效应。其机制比较复杂。(3)动脉压力感受器:压力感受性反射的感受装置是位于颈动脉窦和主动脉弓血管外膜下 的感觉神经末梢,称为动脉压力感受器。 动脉压力感觉器并不是直接感觉血压的变化,而是感觉血管壁的机械牵张程度。当动脉血压升高时, 动脉管壁被牵张的的程度就升高,压力感觉器发放的神经
29、冲动也就增多。在一定范围内,压力感觉器的传入冲动频率与动脉管壁扩张 程度成正比。在一个心动周期内,随着动脉血压的波动,窦神经的传入冲动频率也发生相应 的变化。(4)传入神经和中枢联系:颈动脉窦压力感受器的传入神经纤维组成颈动脉窦神经。窦神经加入舌咽神经, 进入延髓,和孤束核的神经元发生突触联系。主动脉弓压力感受器的传入神经纤维行走于迷走神经干内,然后进入延髓,到达孤束核。兔的主动脉弓压力感受器传入纤维自成一束,与 迷走神经伴行,称为主动脉神经。压力感受器的传入神经冲动到达孤束核后,可通过延髓内的神经通路使延髓端腹外侧部的血管运动神经元抑制从而使交感神经紧张性活动减弱。(5)反射效应(作用机制如
30、下图):动脉血压升高时,压力感受器传入冲动增多,通过中 枢机制,使心迷走紧张加强,心交感紧张和交感缩血管紧张减弱,其效应为心率减慢, 心输出量减少,外周血管阻力降低,故动脉血压下降。反之,当动脉血压降低时,压力感受器传 入冲动减少,使迷走紧张减弱,交感紧张加强,于是心率加快,心输出量增加,外周血管阻 力增高,血压回升。交*小动麻一*外周用压力感受性反射在心输出量、外周血管阻力、血量等发生突然变化的情况下,对动脉血压进行快速调节的过程中起重要的作用,使动脉血压不致发生过分的波动,因此在生理学中将动脉压力感受器的传入神经称为缓冲神经。在切除两侧缓冲神经的狗,血压经常出现很大的波动,其变动范围可超过平均动脉压上下各6.7kPa(50mmH)。但是,在切除缓
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