生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定

1、生物组织中可溶性还原糖、脂肪.蛋白质的鉴定【实验原理】某些化学试剂能够使生物组织中的有关有机化合物，产生特定的颜色反应。1、可溶性还原糖（如葡萄糖、果糖、麦芽糖、乳糖、半乳糖）与斐林试剂（或班氏试剂）发 生作用，生成砖红色沉淀。2、脂肪可以被苏丹hi染液染成橘黄色；被苏丹iv染液染成红色。3、蛋白质与双缩腺试剂发生作用，可以产生紫色反应。【实验材料】1、可溶性还原糖的鉴定：还原糖的含量、生物组织中有无色素是影响实验结果及其观察的重 要因素。因此要选用可溶性还原糖含量高、白色或近于白色的生物组织，其中以苹果、梨最好。2、脂肪的鉴定：所用材料一要脂肪含量高，二要有一定大小才能做徒手切片，花生种子符

2、合 该实验的要求。将花生种子浸泡34小时，使其变软，有利于切成薄片；但浸泡时间不宜过长, 否则组织太软，切下的薄片不易成形。3、蛋白质的鉴定：一般选用浸泡12天的富含蛋白质的大豆种子或用鸡蛋蛋白。【方法步骤】1、可溶性还原糖的鉴定：（1）制备生物组织样液：%1 将苹果洗净去皮、切成小块；取5 g加少许石英砂研磨，再加5ml水，继续研磨；用垫有纱布的玻璃漏斗过滤苹果研磨液于试管中。（2）鉴定操作及观察：%1 取两支试管，编号甲、乙；%1 分别向甲、乙试管中加入苹果组织样液和蒸馅水各2ml；%1 分别向两只试管中注入刚配制的斐林试剂iml （或班氏试剂45滴）并振荡均匀；%1 将试管放在50-65

3、°c水浴中加热约2min,观察颜色变化.（3）现象：甲试管内的颜色变化：浅蓝色棕色砖红色。乙试管无颜色变化。2、脂肪的鉴定：方法一：（1）鉴定操作及观察：%1 取两支试管，编号甲、乙；%1 分别向甲、乙试管中加入食用油和蒸馅水各2ml；%1 分别向两只试管中滴入苏丹di染液（或苏丹iv染液）23滴，并振荡均匀，染色3min （或 lmin），观察颜色变化.（2）现象：甲试管内食用油被染成橘黄色（或红色）。乙试管无颜色变化。方法二：制作子叶临时切片，用显微镜观察子叶细胞的着色情况（以花生为例）。见课本3、蛋白质的鉴定：（1）鉴定操作及观察：取两支试管，编号甲、乙；分别向甲、乙试管中加入

4、蛋白质悬液和蒸馅水各2ml；%1 分别向两只试管中注入双缩服试剂a液lml,摇匀；%1 分别向两只试管中注入双缩腺试剂b液4滴,摇匀。观察颜色变化.（2）现象：可见甲试管内蛋白质悬液变成紫色。乙试管显蓝色。4、淀粉的检测和观察：见课本【注意事项】1、做显色反应时，一般要求材料本身没有颜色（否则容易干扰实验现象），比如做还原糖鉴 定，用白色的苹果或者梨，而不用西红柿（红色）2、鉴定还原糖，一般要用水浴加热，才能看到砖红色沉淀；脂肪则要借助显微镜观察3、斐林试剂与双缩腺试剂（1）溶液浓度不同：斐林试剂中氢氧化纳溶液称为斐林试剂甲，其浓度为0.1g/ml,硫酸 铜溶液称为斐林试剂乙，其浓度为0.05

5、g/ml；双缩麻试剂中氢氧化纳溶液（双缩麻试剂a） 的浓度为0.1g/ml,硫酸铜溶液（双缩豚试剂b）的浓度为0.01g/ml（2）使用方法不同：斐林试剂使用时，将甲液乙液等量混合均匀，而后立即使用； 双缩豚试剂使用时，先加入双缩腺试剂a （2ml）,振荡摇匀，造成碱性的反应环境，然后再加入34滴双缩腮试剂b,振荡摇匀后观察现象。4、在对蛋白质进行鉴定时，若使用蛋清，必须要求稀释，因为蛋白质与双缩豚试剂发生 反应后会粘固到试管的内壁上，使反应不容易彻底，并且试管也不容易刷洗干净；实验样液要留 出一份作为对照，便于最后进行比较。5、使用双缩服试剂时，应先加试剂a,造成碱性环境，再加试剂b。试剂b

6、不能多加，否则 cuso4的蓝色将掩盖颜色反应所产生的紫色。6、斐林试剂要现配现用，否则实验难以得到满意结果。练习：1. 在生物组织中可溶性还原糖、脂肪.蛋白质的鉴定实验中，对实验材料的选择叙述中，错误的是（）a. 甘蔗茎的薄壁组织、甜菜的块根等，都含有较多的糖且近于白色，因此可以用于进行可溶性 还原糖的鉴定b. 花生种子含脂肪多且子叶肥厚，是用于脂肪鉴定的理想材料c. 大豆种子蛋白质含量高，是进行蛋白质鉴定的理想植物组织材料d. 鸡蛋清含蛋白质多，是进行蛋白质的动物材料2. 下列关于实验一操作步骤的叙述中，正确的是（）a. 用于鉴定可溶性还原糖的裴林试剂甲液和乙液，可直接用于蛋白质的鉴定b. 脂肪的鉴定需要用