变应性鼻炎患者转录因子T

1、变应性鼻炎患者转录因子 T-bet 的表达特征及其对尘螨变应原体内外刺激的反应背景CD4辅助性T细胞的分化与疾病的关系是近年来的研究热点。T细胞表现为功能上的异质性 , 在不同的细胞因子、抗原呈递细胞及抗原等因素的作用 下,ThO前体细胞选择性地向Th1或Th2细胞分化。Th1/Th2分化与多种疾病有关,如肿瘤患者出现典型的Th2漂移,哮喘等变态 反应性疾病表现Th2型,校正Th1/Th2细胞平衡,可为疾病的免疫治疗提供新的手 段。T-bet主要表达于CD4辅助性T淋巴细胞,是Th1特异性相关转录因子,因在 Th1/Th2分化中起着关键性的作用而越来越受到关注。在无致敏原刺激的情况下 ,T-b

2、et 单独缺陷就能使小鼠引起气道炎症反应。其一是因为Th2型细胞及细胞因子失去了 T-bet的抑制后过量表达；其二是 T-bet 的表达缺陷导致 Th1 分化减少和 Th1 相关细胞因子减少 , 这也就导致 Th2 型细胞及细胞因子相对增多。T-bet介导细胞因子和己极化的Th2细胞变化,可能为治疗过敏性疾病提供 了条件。Th特异性相关转录因子对细胞因子平衡有重要影响，但是对细胞因子以 后的一些事件的作用还不清楚。比如关于转录因子与CD23嗜酸细胞阳离子蛋白(eosinophile cationic protein ECP的关系还不清楚。变应原诱导刺激对变态反应性疾病患者转录因子 的作用研究还

3、很肤浅。变应性鼻炎(allergicrhinitisAR)患者扁桃体、腺样体和鼻黏膜中淋巴组织等鼻咽相关淋巴组织 (nasopharyngeal-associated lymphoid tissues NALT)的 T 细胞相关转录因子表达情况有待研究。 研究变应性鼻炎患者外周血和呼吸道 黏膜淋巴组织 T 细胞分化相关转录因子对从系统免疫和局部黏膜免疫方面探讨 其发生机制有着重要意义。本研究的着眼点是通过体内外变应原的刺激 , 了解变应性鼻炎患者外周血中Th1特异性相关转录因子T-bet、CD23 ECP的变化和它们之间的相互关系。用 免疫组化染色法了解AR患者NALT中的T-bet表达特征和

4、意义。目的探讨AR患者外周血单核细胞(peripheral blood monouclear cellsPBMC中转录因子T-bet表达及其与CD23 ECP以及过敏症状评分的关系；了解AR患者经体内外尘螨变应原刺激后 T-bet表达、CD23 ECP和过敏症状变化；同 时了解T-bet在有AR和没有AR的两组人群的NALT中的表达特征和意义。方法 采取15例健康人和60例确定为尘螨过敏的AR患者的外周血。36例患者PBM(经50卩g/ml尘螨变应原体外培养刺激，另24例AR患者接受 了 1 年的应用标准化尘螨变应原的体内特异性免疫治疗 (specific immunotherapy SIT)

5、 。用半定量的逆转录聚合酶链反应 (reversetranscriptase-polymerase chain reaction RT-PCR)分析两组 PBM(中 的 T-betmRN表达情况。在培养和SIT前后分别用流式细胞术(flow cytometry FCM)和Unicap系统检测患者CD19/CD23和 ECP水平。分别用免疫组化单染色法检测 AR患者和非AR 人群扁桃体腺样体和鼻粘膜中的 T-bet 表达, 用免疫组化双染色法检测CD4/T-bet 表达。SIT前后分别评估AR患者鼻部症状。结果尘螨变应原体外刺激36例AR患者PBM(前后,其T-bet与B -actin表达水平平

6、均比值分别为0.45 ± 0.13和0.4424例AR患者PBM(前后,其T-bet与B -actin表达水平平均比值分别为0.44±0.14 和0.49 ±0.09, 差异有统计学意义 (t =-2.324, P = 0.029) 。在对照组 , 该比值为 0.59±0.09, 显著高于上述两组 (P = 0.000) 。ECP (卩g/ml)和CD23(%水平在对照组和 ARffl分别是4.67 ± 1.34和25.58 ± 17.22、5.99 ± 2.44 和 13.53 ± 5.41, P 均小于 0.0

7、1。42 例单纯 AR患者和合 并有哮喘的18例AR患者的T-bet、ECP CD23和症状评分分别是0.49 ± 0.12 和 0.33±0.09、22.45±17.28 和32.89±15.11、12.32±5.71 和 16.34±3.32、 8.43±1.65 和 9.61±1.70, t 分别是 5.411、-2.224 、-3.407 和-2.526, 各自 P 值分别是 0.000、0.030、0.001 和 0.014。此外,上述4个指标没有性别之间的差异。T-bet mRNAfe达强度与过敏症状无

8、关(r =-0.214, P = 0.101)。然而,T-bet分别与ECF和CD23存在负相关关系(r =-0.292, P = 0.023, r=-0.260, P = 0.045)。过敏症状评分、ECF和CD23之间存在正相关,P值均小于 0.05 。经SIT后,ECP和CD23水平和症状评分均显著下降(t值分别为4.633 >6.036和 10.798, P 均小于 0.01)。经 SIT 后,T-bet mRNA 表达显著上调(t =-2.324, P= 0.029) 。在AR组扁桃体、腺样体和鼻黏膜组织中 T-bet表达阳性率高于非AR组，差 异有统计学意义 ,t 值分别是

9、4.038、 3.860 和 4.912, P 值分别是 0.044、 0.049 和0.027;AR组扁桃体T-bet表达不同年龄组之间存在差异(x 2=7.079,P=0.029), 其中主要是成年组T-bet表达低于儿童组和青少年组；在非AR组人群扁桃体组织CD4T-bet 表达没有年龄组之间的差异。两组中扁桃体、腺样体和鼻粘膜中均有 和T-bet表达,大多数T-bet阳性表达位于CD4+ T细胞中。结论1.AR患者CD23和ECP水平高于非AR人群，但是T-bet在AR患者的PBMC 和NALT中的表达均下调。2.AR患者经SIT后,可以看到T-bet表达的上调和CD23 以及ECP水平的下降。CD23和ECP的水平在一定程度上反应了 AR患者病情的严重程度。3.Th1相 关转录因子T-bet的下调表达与AR患者系统和局部粘膜免疫Th1反应低下有 关;T-bet对变应原体外反应低下,在尘螨特异性变应原体外刺激的变应性鼻炎 患者外周血单核细胞中,转录因子和细胞因子的Th2优势不是由T-bet下调表达 驱动的。4.变应原在体外诱导的Th2免疫反应,不是