药物分析第(7)章

1、1第七章第七章苯乙胺类拟肾上腺素药物的分析苯乙胺类拟肾上腺素药物的分析2 基本结构基本结构 肾上腺素肾上腺素CHCHNHR2OHR3R1CHCHNHOHHOHCH3OH第一节第一节 结构与性质结构与性质3R R1 1R R2 2R R3 3HXHX名称名称-CH-CH3 3- -H H肾上腺素肾上腺素- -H H- -H H重酒石酸重酒石酸去甲肾上腺素去甲肾上腺素- -H H- -H HHClHCl盐酸去氧肾上腺素盐酸去氧肾上腺素-CH(CH-CH(CH3 3) )2 2- -H HHClHCl盐酸异丙肾上腺素盐酸异丙肾上腺素- -H H- -H HHClHCl盐酸多巴胺盐酸多巴胺HOHOHO

2、HOHOHOHOHOHOCH(OH)COOHCH(OH)COOH第一节第一节 结构与性质结构与性质4 性质性质 1. 1. 弱碱性：烃氨基侧链，仲胺氮。弱碱性：烃氨基侧链，仲胺氮。 2. 2. 酚羟基特性：邻苯二酚或酚羟基结构。酚羟基特性：邻苯二酚或酚羟基结构。 3. 3. 旋光性：手性碳原子。旋光性：手性碳原子。 4. 4. 紫外吸收特性：苯环，紫外吸收特性：苯环，254nm254nm为中心红移为中心红移或蓝移。或蓝移。第一节第一节 结构与性质结构与性质5一、一、 三氯化铁反应三氯化铁反应绿色，加入碱液显紫红色。绿色，加入碱液显紫红色。二、甲醛硫酸反应二、甲醛硫酸反应酚羟基的本类药物，与甲醛

3、在硫酸中反应，形酚羟基的本类药物，与甲醛在硫酸中反应，形 成具有醌式结构的有色物。成具有醌式结构的有色物。 肾上腺素肾上腺素 红色红色 盐酸异丙肾上腺素盐酸异丙肾上腺素 棕色至暗紫色棕色至暗紫色 重酒石酸去甲肾上腺素重酒石酸去甲肾上腺素 淡红色淡红色 盐酸去氧肾上腺素盐酸去氧肾上腺素 玫瑰红玫瑰红橙红橙红深棕红深棕红 第二节第二节 鉴别试验鉴别试验6 与三氯化铁反应、与甲醛硫酸反应与三氯化铁反应、与甲醛硫酸反应药物药物三氯化铁三氯化铁甲醛硫酸甲醛硫酸肾上腺素肾上腺素0.1mol/L盐酸液中显翠绿色，盐酸液中显翠绿色，加氨试液显紫色，紫红色加氨试液显紫色，紫红色红色红色重酒石酸去甲肾上腺素重酒石

4、酸去甲肾上腺素翠绿色，加碳酸氢钠试液显蓝翠绿色，加碳酸氢钠试液显蓝色，红色色，红色淡红色淡红色盐酸去氧肾上腺素盐酸去氧肾上腺素紫色紫色玫瑰红，橙红，深棕玫瑰红，橙红，深棕红红盐酸异丙肾上腺素盐酸异丙肾上腺素深绿色，滴加新制深绿色，滴加新制5%碳酸氢钠碳酸氢钠液，显蓝紫色，红色液，显蓝紫色，红色棕色，暗紫色棕色，暗紫色盐酸多巴胺盐酸多巴胺墨绿色，滴加墨绿色，滴加1%氨溶液，显紫氨溶液，显紫红色红色第二节第二节 鉴别试验鉴别试验7肾上腺素肾上腺素 【鉴别鉴别】(1)取本品约取本品约2mg，加盐酸溶，加盐酸溶液液(91000)23滴溶解后，加水滴溶解后，加水2ml与三与三氯化铁试液氯化铁试液1滴，即

5、显翠绿色；再加氨试液滴，即显翠绿色；再加氨试液1滴，即变紫色，最后变成紫红色。滴，即变紫色，最后变成紫红色。8盐酸异丙肾上腺素盐酸异丙肾上腺素 【鉴别鉴别】(1)取本品取本品20mg，加水，加水2ml溶解溶解后，加三氯化铁试液后，加三氯化铁试液2滴，即显深绿色；滴滴，即显深绿色；滴加新制的加新制的5碳酸氢钠溶液，即变蓝色，然碳酸氢钠溶液，即变蓝色，然后变成红色。后变成红色。9重酒石酸去甲肾上腺素重酒石酸去甲肾上腺素 【鉴别鉴别】(1)取本品约取本品约10mg，加水，加水1ml溶解后，加三氯化铁试液溶解后，加三氯化铁试液1滴，振摇，即显滴，振摇，即显翠绿色；再缓缓加碳酸氢钠试液，即显蓝色，翠绿色

6、；再缓缓加碳酸氢钠试液，即显蓝色，最后变成红色。最后变成红色。10盐酸去氧肾上腺素盐酸去氧肾上腺素 【鉴别鉴别】(2)取本品约取本品约10mg，加水，加水1ml溶解后，加三氯化铁试液溶解后，加三氯化铁试液1滴，即显紫滴，即显紫色。色。11盐酸多巴胺盐酸多巴胺 【鉴别鉴别】(1)取本品取本品10mg，加水，加水1ml溶解后，加三氯化铁试液溶解后，加三氯化铁试液1滴，溶液显滴，溶液显墨绿色；滴加墨绿色；滴加1氨溶液，即转变成紫红色。氨溶液，即转变成紫红色。12盐酸甲氧明盐酸甲氧明 【鉴别鉴别】(1)取本品约取本品约1mg，加甲醛硫，加甲醛硫酸试液酸试液3滴，即显紫色，渐变为棕色，最后滴，即显紫色，

7、渐变为棕色，最后成绿色。成绿色。13硫酸沙丁胺醇硫酸沙丁胺醇 【鉴别鉴别】(1)取本品约取本品约20mg，加水，加水2ml溶解后，加三氯化铁试液溶解后，加三氯化铁试液1滴，振摇，滴，振摇，溶液显紫色；加碳酸氢钠试液即生成橙黄溶液显紫色；加碳酸氢钠试液即生成橙黄色浑浊。色浑浊。14三、三、 氧化还原反应氧化还原反应I I肾上腺素红肾上腺素红异丙肾上腺素红异丙肾上腺素红肾上腺素肾上腺素盐酸异丙肾盐酸异丙肾重酒石酸去甲肾重酒石酸去甲肾放置放置棕色多聚体棕色多聚体硫代硫酸钠硫代硫酸钠淡红色淡红色几乎不被氧化几乎不被氧化pH6.5三者皆氧化为红色三者皆氧化为红色I IpH3.5第二节第二节 鉴别试验鉴别

8、试验15利用此反应区别：利用此反应区别：甲：甲：pH3.5pH3.5邻苯二甲酸氢钾缓冲液邻苯二甲酸氢钾缓冲液乙：乙：pH6.5pH6.5邻苯二甲酸氢钾缓冲液邻苯二甲酸氢钾缓冲液 肾上腺素：均为红色肾上腺素：均为红色 重酒石酸去甲肾上腺素：甲无色、乙红色重酒石酸去甲肾上腺素：甲无色、乙红色第二节第二节 鉴别试验鉴别试验16肾上腺素肾上腺素 【鉴别鉴别】 (2)取本品取本品10mg，加盐酸溶，加盐酸溶液液(91000)2ml溶解后，加过氧化氢试液溶解后，加过氧化氢试液10滴，煮沸，即显血红色。滴，煮沸，即显血红色。17盐酸异丙肾上腺素盐酸异丙肾上腺素 【鉴别鉴别】 (2)取本品取本品10mg，加水

9、，加水10ml溶溶解后，取溶液解后，取溶液2ml，加盐酸滴定液，加盐酸滴定液(0.1mol/L)0.1ml，再加，再加0.1mol/L碘溶液碘溶液1ml，放置放置5分钟，加分钟，加0.1mol/L硫代硫酸钠溶液硫代硫酸钠溶液4ml，即显淡红色。即显淡红色。18重酒石酸去甲肾上腺素重酒石酸去甲肾上腺素 【鉴别鉴别】(2)取本品约取本品约1mg，加酒石，加酒石酸氢钾的饱和溶液酸氢钾的饱和溶液10ml溶解，加碘试液溶解，加碘试液1ml，放置放置5分钟后，加硫代硫酸钠试液分钟后，加硫代硫酸钠试液2ml，溶，溶液为无色或仅显微红色或淡紫色液为无色或仅显微红色或淡紫色(与肾上腺与肾上腺素或异丙肾上腺素的区

10、别素或异丙肾上腺素的区别)。19四、四、 双缩脲反应双缩脲反应 是鉴别芳环氨基醇的特殊反应；可用于盐酸麻黄是鉴别芳环氨基醇的特殊反应；可用于盐酸麻黄碱、盐酸去氧肾上腺素鉴别：碱、盐酸去氧肾上腺素鉴别：D D CuSOCuSO4 4 + NaOH+ NaOH显显蓝紫色蓝紫色乙醚，醚层乙醚，醚层( (紫红色紫红色) )水层水层( (蓝色蓝色) ) 盐酸麻黄碱盐酸麻黄碱第二节第二节 鉴别试验鉴别试验乙醚，醚层乙醚，醚层( (不显色不显色) ) 盐酸去氧肾上腺素盐酸去氧肾上腺素20盐酸去氧肾上腺素盐酸去氧肾上腺素 【鉴别鉴别】(1)取本品约取本品约10mg，加水，加水1ml溶解后，加硫酸铜试液溶解后，

11、加硫酸铜试液1滴与氢氧化钠滴与氢氧化钠试液试液1ml，摇匀，即显紫色；加乙醚，摇匀，即显紫色；加乙醚1ml振振摇，乙醚层应不显色。摇，乙醚层应不显色。21盐酸麻黄碱盐酸麻黄碱 【鉴别鉴别】(1)取本品约取本品约10mg，加水，加水1ml溶解后，加硫酸铜试液溶解后，加硫酸铜试液2滴与滴与20氢氧化钠氢氧化钠溶液溶液1ml，即显蓝紫色；加乙醚，即显蓝紫色；加乙醚1ml，振摇，振摇后，放置，乙醚层即显紫红色，水层变成后，放置，乙醚层即显紫红色，水层变成蓝色。蓝色。22五、五、 Rimini试验试验 脂肪族伯胺的专属反应脂肪族伯胺的专属反应（间羟胺）（间羟胺） 供试品加水溶解，加亚硝基铁氰化钠试液、供

12、试品加水溶解，加亚硝基铁氰化钠试液、丙酮、碳酸氢钠，加热，显红紫色。丙酮、碳酸氢钠，加热，显红紫色。 丙酮必须不含甲醛成分丙酮必须不含甲醛成分第二节第二节 鉴别试验鉴别试验23重酒石酸间羟胺重酒石酸间羟胺 (2)取本品约取本品约5mg，加水，加水0.5ml使溶解，使溶解，加亚硝基铁氰化钠试液加亚硝基铁氰化钠试液2滴、丙酮滴、丙酮2滴与碳滴与碳酸氢钠酸氢钠0.2g，在，在60的水浴中加热的水浴中加热1分钟，分钟，即显红紫色。即显红紫色。24六、紫外光谱六、紫外光谱 七、红外光谱七、红外光谱第二节第二节 鉴别试验鉴别试验25盐酸异丙肾上腺素盐酸异丙肾上腺素 (3)取本品，加水制成每取本品，加水制成

13、每1ml中含中含50g的的溶液，照紫外溶液，照紫外-可见分光光度法可见分光光度法(附录附录A)测定，在测定，在280nm的波长处有最大吸收，吸的波长处有最大吸收，吸光度约为光度约为0.50。 (4)本品的红外光吸收图谱应与对照本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱的图谱(光谱集光谱集349图图)一致。一致。26盐酸多巴胺盐酸多巴胺 (2)取本品，加取本品，加0.5硫酸溶液制成每硫酸溶液制成每1ml中约含中约含30g的溶液，照紫外的溶液，照紫外-可见分光可见分光光度法光度法(附录附录A)测定，在测定，在280nm的波长的波长处有最大吸收。处有最大吸收。 (3)本品的红外光吸收图谱应与对照的图本品的红

14、外光吸收图谱应与对照的图谱谱(光谱集光谱集345图图)一致。一致。27硫酸特布他林硫酸特布他林 (2)取本品，用取本品，用0.1mol/L盐酸溶液制成盐酸溶液制成每每1ml中含中含0.1mg的溶液，照紫外的溶液，照紫外-可见分可见分光光度法光光度法(附录附录A)测定，在测定，在276nm的波的波长处有最大吸收。长处有最大吸收。 (3)本品的红外光吸收图谱应与对照本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱的图谱(光谱集光谱集668图图)一致，如不一致时，一致，如不一致时，再取本品适量，加无醛甲醇使溶解，置水再取本品适量，加无醛甲醇使溶解，置水浴蒸干后测定。浴蒸干后测定。28重酒石酸间羟胺重酒石酸间羟胺

15、(3)取本品，加水制成每取本品，加水制成每1ml中约含中约含0.1mg的溶液，照紫外的溶液，照紫外-可见分光光度法可见分光光度法(附附录录A)测定，在测定，在272nm的波长处有最大的波长处有最大吸收。吸收。 (4)本品的红外光吸收图谱应与对照本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱的图谱(光谱集光谱集294图图)一致。一致。29盐酸甲氧明盐酸甲氧明 吸收系数取本品，精密称定，加水吸收系数取本品，精密称定，加水溶解并定量稀释制成每溶解并定量稀释制成每1ml中约含中约含30g的的溶液，照紫外溶液，照紫外-可见分光光度法可见分光光度法(附录附录A)，在在290nm的波长处测定吸光度，吸收系数的波长处测定

16、吸光度，吸收系数(E11cm)为为133141。 (3)本品的红外光吸收图谱应与对照的图本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱谱(光谱集光谱集329图图)一致。一致。30盐酸克仑特罗盐酸克仑特罗 (2)取本品，加取本品，加0.1mol/L盐酸溶液制成盐酸溶液制成每每1ml中含中含30g的溶液，照紫外的溶液，照紫外-可见分光光可见分光光度法度法(附录附录A)测定，在测定，在243nm与与296nm的的波长处有最大吸收。波长处有最大吸收。 (3)本品的红外光吸收图谱应与对照的本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱图谱(光谱集光谱集351图图)一致。一致。31硫酸沙丁胺醇硫酸沙丁胺醇 (3)取本品，加水溶解

17、并稀释制成每取本品，加水溶解并稀释制成每1ml中约含中约含80g的溶液，照紫外的溶液，照紫外-可见分光可见分光光度法光度法(附录附录A)测定，在测定，在276nm的波长的波长处有最大吸收。处有最大吸收。 (4)本品的红外光吸收图谱应与对照本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱的图谱(光谱集光谱集486图图)一致。一致。32一、酮体杂质检查一、酮体杂质检查 氢化不完全，引入酮体氢化不完全，引入酮体 酮体：酮体：310nm310nm有最大吸收有最大吸收 药物：此波长下无吸收药物：此波长下无吸收 方法：方法：2.0mg/ml2.0mg/ml样品液样品液310nm310nm处测定处测定 规定规定A0.05

18、A0.05 （ =453=453，限量），限量）%1cm1E第三节第三节 特殊杂质与检查特殊杂质与检查33肾上腺素肾上腺素 【检查检查】酮体取本品，加盐酸溶液酮体取本品，加盐酸溶液(92000)制成每制成每1ml中含中含2.0mg的溶液，的溶液，照紫外照紫外-可见分光光度法可见分光光度法(附录附录A)，在，在310nm的波长处测定，吸光度不得过的波长处测定，吸光度不得过0.05。34重酒石酸去甲肾上腺素重酒石酸去甲肾上腺素 【检查检查】酮体取本品，加水溶解并酮体取本品，加水溶解并稀释制成每稀释制成每1ml中约含中约含2.0mg的溶液，照紫的溶液，照紫外外-可见分光光度法可见分光光度法(附录附录

19、A)，在，在310nm的波长处测定，吸光度不得过的波长处测定，吸光度不得过0.05。35盐酸去氧肾上腺素盐酸去氧肾上腺素 【检查检查】酮体取本品酮体取本品2.0g，置，置100ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，取取10ml，置，置50ml量瓶中，用量瓶中，用0.01mol/L盐盐酸溶液稀释至刻度，摇匀。照紫外酸溶液稀释至刻度，摇匀。照紫外-可见分可见分光光度法光光度法(附录附录A)，在，在310nm的波长处的波长处测定吸光度，不得大于测定吸光度，不得大于0.20。36盐酸甲氧明盐酸甲氧明 【检查检查】酮胺取本品，加水制成每酮胺取本品，加水制成每1ml中

20、含中含1.5mg的溶液，照紫外的溶液，照紫外-可见分光可见分光光度法光度法(附录附录A)，在，在347nm的波长处测的波长处测定，吸光度不得过定，吸光度不得过0.06。37二、光学纯度检查二、光学纯度检查 检查对映体控制药品质量检查对映体控制药品质量如肾上腺素在盐酸溶液中，样品浓度如肾上腺素在盐酸溶液中，样品浓度20mg/ml,20mg/ml,比旋度为比旋度为-50.0-50.0 - - 53.553.5对映体分离采用色谱法和电泳法。对映体分离采用色谱法和电泳法。第三节第三节 特殊杂质与检查特殊杂质与检查38重酒石酸去甲肾上腺素重酒石酸去甲肾上腺素 比旋度取本品，精密称定，加水溶解比旋度取本品

21、，精密称定，加水溶解并定量稀释制成每并定量稀释制成每1ml中约含中约含50mg的溶液，的溶液，依法测定依法测定(附录附录E)，比旋度为，比旋度为-10.0至至-12.0。39盐酸去氧肾上腺素盐酸去氧肾上腺素 比旋度取本品，精密称定，加水溶解比旋度取本品，精密称定，加水溶解并定量稀释制成每并定量稀释制成每1ml中约含中约含20mg的溶液，的溶液，依法测定依法测定(附录附录E)，比旋度为，比旋度为-42至至-47。40硫酸沙丁胺醇硫酸沙丁胺醇 旋光度取本品约旋光度取本品约0.25g，精密称定，置，精密称定，置25ml量瓶中，加水适量使溶解，用水稀释量瓶中，加水适量使溶解，用水稀释至刻度，摇匀，依法

22、测定至刻度，摇匀，依法测定(附录附录E)，旋，旋光度为光度为0.10至至0.10。41有关物质有关物质1. 1. 盐酸去氧肾上腺素盐酸去氧肾上腺素 供试液：供试液：20mg/ml20mg/ml甲醇液甲醇液 对照液：对照液：0.1mg/ml0.1mg/ml甲醇液甲醇液 层析板：硅胶层析板：硅胶G G板板 点样：各点点样：各点10l10l 展开剂：异丙醇展开剂：异丙醇- -氯仿氯仿- -浓氨（浓氨（8051580515） 显色剂：重氮苯磺酸试液显色剂：重氮苯磺酸试液 规定：杂斑颜色与对照主斑比较不得更深规定：杂斑颜色与对照主斑比较不得更深三、有关物质的检查三、有关物质的检查第三节第三节 特殊杂质与

23、检查特殊杂质与检查42盐酸去氧肾上腺素盐酸去氧肾上腺素 有关物质避光操作。取本品，加甲醇溶解有关物质避光操作。取本品，加甲醇溶解并定量稀释制成每并定量稀释制成每1ml中约含中约含20mg的溶液，的溶液，作为供试品溶液；精密量取适量，加甲醇稀作为供试品溶液；精密量取适量，加甲醇稀释成每释成每1ml中含约中含约0.10mg的溶液，作为对照的溶液，作为对照溶液。照薄层色谱法溶液。照薄层色谱法(附录附录B)试验，吸试验，吸取上述两种溶液各取上述两种溶液各10l，分别点于同一硅胶，分别点于同一硅胶G薄层板上，以异丙醇薄层板上，以异丙醇-三氯甲烷三氯甲烷-浓氨溶液浓氨溶液(80:5:15)为展开剂，展开，

24、晾干，喷以重氮为展开剂，展开，晾干，喷以重氮苯磺酸试液使显色。供试品溶液如显杂质斑苯磺酸试液使显色。供试品溶液如显杂质斑点，与对照溶液的主斑点比较，颜色不得更点，与对照溶液的主斑点比较，颜色不得更深深(0.5)。432. 2. 肾上腺素肾上腺素供试液：供试液：1mg/ml 1mg/ml 液液对照液：对照液：0.002ml/ml0.002ml/ml液液固定相：十八烷基硅烷键合硅胶固定相：十八烷基硅烷键合硅胶流动相：硫酸氢四甲基铵溶液流动相：硫酸氢四甲基铵溶液波长：波长：205nm205nm理论塔板数按去甲肾上腺素峰计算不低于理论塔板数按去甲肾上腺素峰计算不低于30003000第三节第三节 特殊杂

25、质与检查特殊杂质与检查44肾上腺素肾上腺素 有关物质照高效液相色谱法有关物质照高效液相色谱法(附录附录D)试验，用试验，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以硫酸氢四甲基十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以硫酸氢四甲基铵溶液铵溶液(取硫酸氢四甲基铵取硫酸氢四甲基铵4.0g，庚烷磺酸钠，庚烷磺酸钠1.1g，0.1mol/L乙二胺四醋酸二钠溶液乙二胺四醋酸二钠溶液2ml，用水溶解并，用水溶解并稀释至稀释至950ml)-甲醇甲醇(95:5)(用用1mol/L氢氧化钠溶液氢氧化钠溶液调节调节pH值至值至3.5)为流动相；流速为每分钟为流动相；流速为每分钟2ml，检，检测波长为测波长为205nm。供试品溶液色谱

26、图中如有杂质峰，。供试品溶液色谱图中如有杂质峰，单个杂质峰面积不得大于对照溶液的主峰面积单个杂质峰面积不得大于对照溶液的主峰面积(0.2)，各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积，各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积的的2.5倍倍(0.5)。45盐酸异丙肾上腺素盐酸异丙肾上腺素 有关物质照高效液相色谱法有关物质照高效液相色谱法(附录附录D)试验，试验，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以磷酸溶液用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以磷酸溶液(取磷酸取磷酸11.5g，用水溶解并稀释至，用水溶解并稀释至1000ml)-甲醇甲醇(95:5)为流动相；检测波长为为流动相；检测波长为280nm。取系统适

27、用。取系统适用性试验溶液性试验溶液20l，注入液相色谱仪，间羟异丙肾，注入液相色谱仪，间羟异丙肾上腺素峰与盐酸异丙肾上腺素峰之间的分离度应上腺素峰与盐酸异丙肾上腺素峰之间的分离度应大于大于3.0，盐酸异丙肾上腺素峰的信噪比应大于，盐酸异丙肾上腺素峰的信噪比应大于3。记录色谱图至主成分峰保留时间的记录色谱图至主成分峰保留时间的7倍。供试品溶倍。供试品溶液的色谱图中如有杂质峰，单个杂质峰面积不得液的色谱图中如有杂质峰，单个杂质峰面积不得大于对照溶液的主峰面积大于对照溶液的主峰面积(0.5)，各杂质峰面积，各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积的的和不得大于对照溶液主峰面积的2倍倍(1.0)。46

28、重酒石酸去甲肾上腺素重酒石酸去甲肾上腺素 有关物质照高效液相色谱法有关物质照高效液相色谱法(附录附录D)试验。用十八烷基试验。用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以硅烷键合硅胶为填充剂；以0.05庚烷磺酸钠溶液庚烷磺酸钠溶液(用磷酸调节用磷酸调节pH值至值至2.2)为流动相为流动相A；乙腈；乙腈-0.05庚烷磺酸钠溶液庚烷磺酸钠溶液(1:1)(用用磷酸调节磷酸调节pH值至值至2.4)为流动相为流动相B，照下表进行梯度洗脱；检测，照下表进行梯度洗脱；检测波长为波长为280nm；流速为每分钟；流速为每分钟1.5ml。主成分峰的保留时间约。主成分峰的保留时间约为为11分钟，主成分峰后应出现一个未知降解产

29、物峰与去甲肾上分钟，主成分峰后应出现一个未知降解产物峰与去甲肾上腺酮峰，去甲肾上腺酮峰的相对保留时间约为腺酮峰，去甲肾上腺酮峰的相对保留时间约为1.3，理论板数，理论板数按去甲肾上腺素峰计算不低于按去甲肾上腺素峰计算不低于5000，主成分峰与相邻杂质峰之，主成分峰与相邻杂质峰之间的分离度应符合要求。供试品溶液的色谱图中如有与去甲肾间的分离度应符合要求。供试品溶液的色谱图中如有与去甲肾上腺酮峰保留时间一致的色谱峰，其峰面积乘以上腺酮峰保留时间一致的色谱峰，其峰面积乘以0.3后不得大后不得大于对照溶液主峰面积的于对照溶液主峰面积的1/3(0.1)，其他单个杂质峰面积不得，其他单个杂质峰面积不得大于

30、对照溶液主峰面积的大于对照溶液主峰面积的1/3(0.1)；杂质总量不得过；杂质总量不得过0.3。供试品溶液色谱图中任何小于对照溶液主峰面积供试品溶液色谱图中任何小于对照溶液主峰面积1/6倍的峰可倍的峰可忽略不计。忽略不计。47盐酸多巴胺盐酸多巴胺 有关物质照高效液相色谱法有关物质照高效液相色谱法(附录附录D)试验，试验，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以0.005mol/L十二烷基硫酸钠十二烷基硫酸钠-乙腈乙腈-冰醋酸冰醋酸-0.1mol/L乙二胺四醋酸二钠乙二胺四醋酸二钠(700:300:10:2)为流为流动相；检测波长为动相；检测波长为280nm。取系统适

31、用性试验溶。取系统适用性试验溶液液20l，注入液相色谱仪，盐酸多巴胺峰和，注入液相色谱仪，盐酸多巴胺峰和4-乙乙基邻苯二酚峰的分离度应大于基邻苯二酚峰的分离度应大于3.0。记录色谱图至。记录色谱图至盐酸多巴胺峰保留时间的盐酸多巴胺峰保留时间的3倍。供试品溶液的色倍。供试品溶液的色谱图中如有杂质峰，单个杂质峰面积不得大于对谱图中如有杂质峰，单个杂质峰面积不得大于对照溶液主峰面积的照溶液主峰面积的0.5倍倍(0.5)，各杂质峰面积的，各杂质峰面积的和不得大于对照溶液的主峰面积和不得大于对照溶液的主峰面积(1.0)。48一、非水滴定法一、非水滴定法非水滴定法是在非水溶剂中进行滴定的方法，主非水滴定法

32、是在非水溶剂中进行滴定的方法，主要用来测定有机碱及其氢卤酸盐、磷酸盐、硫酸要用来测定有机碱及其氢卤酸盐、磷酸盐、硫酸盐或有机酸盐，以及有机酸的碱金属盐类药物的盐或有机酸盐，以及有机酸的碱金属盐类药物的含量，也可用测定某些有机弱酸的含量。含量，也可用测定某些有机弱酸的含量。酸性溶剂：有机弱碱在酸性溶剂中可显著地增强酸性溶剂：有机弱碱在酸性溶剂中可显著地增强 其相对碱度。常用其相对碱度。常用 冰醋酸冰醋酸碱性溶剂碱性溶剂 与酸性相反与酸性相反 二甲基甲酰胺二甲基甲酰胺两性溶剂：兼有酸、碱两种性能，甲醇两性溶剂：兼有酸、碱两种性能，甲醇惰性溶剂：没有酸、碱性，苯、氯仿惰性溶剂：没有酸、碱性，苯、氯仿

33、第四节第四节 含量测定含量测定49一、非水滴定法一、非水滴定法n在水中碱性较弱，不能顺利地进行中和滴在水中碱性较弱，不能顺利地进行中和滴定（滴定突跃不明显，难以判断滴定终点）。定（滴定突跃不明显，难以判断滴定终点）。n在酸性非水介质中（如冰在酸性非水介质中（如冰HAcHAc中），则能显中），则能显示出较强的碱性，滴定突跃增大，可以顺利示出较强的碱性，滴定突跃增大，可以顺利地进行中和滴定。地进行中和滴定。50（一）（一） 反应原理反应原理 B BHACBHHACBH+ +ACAC- - HClO HClO4 4+HACH+HACH2 2ACAC+ +ClOClO4 4- - H H2 2ACAC

34、+ +ACAC- -2HAC2HAC 总式：总式：B BHClOHClO4 4BHBH+ +ClOClO4 4- - BHBH+ +A A- -HClOHClO4 4BHBH+ +ClOClO4 4- -+HA+HA一、非水滴定法一、非水滴定法置换滴定：用强酸（置换滴定：用强酸（HClOHClO4 4）置换出与生物）置换出与生物碱结合的较弱的酸（碱结合的较弱的酸（HAHA）51（二）一般方法（二）一般方法供试品：消耗标准液供试品：消耗标准液8ml8ml计算计算溶剂：溶剂： gHAcgHAc，用量，用量101030ml30ml滴定剂：滴定剂： 0.1mol/L HClO0.1mol/L HClO

35、4 4/ /无水无水gHAc gHAc 溶液溶液指示液结晶紫指示液结晶紫1 12 2滴滴 终点颜色以电位滴定时的突跃点为准，同时做空白，终点颜色以电位滴定时的突跃点为准，同时做空白，加入加入醋酐醋酐应防止氨基被乙酰化。应防止氨基被乙酰化。 一、非水滴定法一、非水滴定法52（三）讨论（三）讨论1. 1. 适用范围适用范围 pKpKb b88的有机弱碱性药物及其盐类的有机弱碱性药物及其盐类 溶媒的选择溶媒的选择 pKpKb b8 81010：gHACgHAC pK pKb b10101212：gHAC+ACgHAC+AC2 2O O pK pKb b1212：ACAC2 2O O 一、非水滴定法一

36、、非水滴定法2(CH3CO)2O(CH3CO)3O+ + CH3COO-532. 2. 酸根的影响酸根的影响 HClOHClO4 4HBrHHBrH2 2SOSO4 4HClHNOHClHNO3 3 1） 氢卤酸盐氢卤酸盐 BHX + HClOBHX + HClO4 4 BHClO BHClO4 4 + HX + HX 释放出的释放出的HXHX影响滴定，加影响滴定，加HgACHgAC2 2排除排除 2BHX+HgAC2BHX+HgAC2 22BHAC+HgX2BHAC+HgX2 2 HgAC HgAC2 2量：过量量：过量1 13 3倍倍一、非水滴定法一、非水滴定法54一、非水滴定法一、非水滴

37、定法 2）硝酸盐）硝酸盐HNOHNO3 3在在gHAcgHAc中为弱酸，不影响滴定突跃中为弱酸，不影响滴定突跃HNOHNO3 3具有氧化性，可使指示剂变色，应采用电位法具有氧化性，可使指示剂变色，应采用电位法指示终点或将指示终点或将HNOHNO3 3破坏分解后再进行测定。破坏分解后再进行测定。硝酸士的宁硝酸士的宁3 3）磷酸盐与有机酸盐）磷酸盐与有机酸盐 常规方法直接滴定常规方法直接滴定554）硫酸盐硫酸盐 在水中硫酸是二元酸，能解离出两个氢离子在水中硫酸是二元酸，能解离出两个氢离子 在冰醋酸中硫酸是一元酸，能够解离出一个在冰醋酸中硫酸是一元酸，能够解离出一个氢离子，即氢离子，即 注意注意N原

38、子碱性强弱，正确判断反应摩尔比原子碱性强弱，正确判断反应摩尔比42SOH4HSOH一、非水滴定法一、非水滴定法563. 3. 滴定剂的稳定性滴定剂的稳定性 水膨胀系数水膨胀系数0.210.211010-3-3/ / C C gHAc gHAc膨胀系数膨胀系数1.11.11010-3-3/ / C C，且具挥发性。，且具挥发性。 测定与标定时温度不同，对浓度校正。测定与标定时温度不同，对浓度校正。一、非水滴定法一、非水滴定法57一、非水滴定法一、非水滴定法校正公式：校正公式：)(0011. 010101ttNN其中：其中： 0.0011：gHAc膨胀系数膨胀系数 t0、t1：标定、测定时温度：标

39、定、测定时温度 N0、N1：t0、t1对应的滴定液的浓度对应的滴定液的浓度注意：注意： t1-t0 10 C或贮存或贮存30天天 重新标定重新标定584. 4. 终点指示方法终点指示方法 电位滴定和指示剂法电位滴定和指示剂法（1 1）结晶紫）结晶紫 Crystal VioletCrystal Violet（CVCV） 紫紫蓝紫蓝紫蓝绿蓝绿绿绿黄黄 碱性区碱性区 酸性区酸性区（2 2）孔雀绿：浅兰绿色）孔雀绿：浅兰绿色黄色黄色（3 3）-奈酚苯甲醇：黄奈酚苯甲醇：黄绿绿（4 4）喹哪啶红：红）喹哪啶红：红无色无色一、非水滴定法一、非水滴定法59一、非水滴定法一、非水滴定法5. 5. 其他干扰其他

40、干扰 有机碱性药物经碱化处理，有机溶剂提有机碱性药物经碱化处理，有机溶剂提取分离出游离碱再测定。取分离出游离碱再测定。 gHAcgHAc和和HClOHClO4 4含有一定量的水分含有一定量的水分 排除方法：排除方法： 费休氏（费休氏（FischerFischer）：准确测出水分）：准确测出水分 根据其含水量，加入计算量醋酐根据其含水量，加入计算量醋酐 同时：仪器干燥无水同时：仪器干燥无水60肾上腺素肾上腺素 【含量测定含量测定】取本品约取本品约0.15g，精密，精密称定，加冰醋酸称定，加冰醋酸10ml，振摇溶解后，加结，振摇溶解后，加结晶紫指示液晶紫指示液1滴，用高氯酸滴定液滴，用高氯酸滴定液

41、(0.1mol/L)滴定至溶液显蓝绿色，并将滴定滴定至溶液显蓝绿色，并将滴定的结果用空白试验校正。每的结果用空白试验校正。每1ml高氯酸滴定高氯酸滴定液液(0.1mol/L)相当于相当于18.32mg的的C9H13NO3。61盐酸异丙肾上腺素盐酸异丙肾上腺素 【含量测定含量测定】取本品约取本品约0.15g，精密，精密称定，加冰醋酸称定，加冰醋酸30ml，微温使溶解，放冷，微温使溶解，放冷，加醋酸汞试液加醋酸汞试液5ml与结晶紫指示液与结晶紫指示液1滴，用滴，用高氯酸滴定液高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定至溶液显蓝色，滴定至溶液显蓝色，并将滴定的结果用空白试验校正。每并将滴定的结果用空白试验

42、校正。每1ml高高氯酸滴定液氯酸滴定液(0.1mol/L)相当于相当于24.77mg的的C11H17NO3HCl。62重酒石酸去甲肾上腺素重酒石酸去甲肾上腺素 【含量测定含量测定】取本品取本品0.2g精密称精密称定，加冰醋酸定，加冰醋酸10ml，振摇，振摇(必要时微温必要时微温)溶溶解后，加结晶紫指示液解后，加结晶紫指示液1滴，用高氯酸滴定滴，用高氯酸滴定液液(0.1mol/L)滴定至溶液显蓝绿色，并将滴滴定至溶液显蓝绿色，并将滴定的结果用空白试验校正。每定的结果用空白试验校正。每1ml高氯酸滴高氯酸滴定液定液(0.1mol/L)相当于相当于31.93mg的的C8H11NO3C4H6O6。63

43、盐酸多巴胺盐酸多巴胺 【含量测定含量测定】取本品约取本品约0.15g，精密称定，精密称定，加冰醋酸加冰醋酸25ml，煮沸使溶解，冷却至约，煮沸使溶解，冷却至约40，加醋酸汞试液，加醋酸汞试液5ml，放冷，加结晶紫，放冷，加结晶紫指示液指示液1滴，用高氯酸滴定液滴，用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴滴定至溶液显蓝绿色，并将滴定的结果用空定至溶液显蓝绿色，并将滴定的结果用空白试验校正。每白试验校正。每1ml高氯酸滴定液高氯酸滴定液(0.1mol/L)相当于相当于18.96mg的的C8H11NO2HCl。64 原理：CHNHOHCH3OHCH2+ 3Br2CHNHOHCH3OHCH2BrBrBr+

44、3HBrB r2 + 2K I 2K B r + I2I2 +2Na2S2O3 2NaI + Na2S4O6二、溴量法二、溴量法 重酒石酸间羟胺、盐酸去氧肾上腺素重酒石酸间羟胺、盐酸去氧肾上腺素65溴量法溴量法 测定方法测定方法空白试验碘瓶中水20ml溶解溴滴定液50ml0.05mol/L盐酸5ml密塞放置15min振摇碘化钾试液10ml密塞，振摇硫代硫酸钠滴定液滴定0.1mol/L近终点时加淀粉指示液滴定至蓝色消失盐酸去氧肾上腺素（M=203.67）66讨讨 论：论： 1 1）0.05mol/LBr0.05mol/LBr2 2标准液标准液 3gKBrO3gKBrO3 3+15gKBr+H+1

45、5gKBr+H2 2O1000mlO1000ml KBrO KBrO3 3+5KBr+6HCl3Br+5KBr+6HCl3Br2 2+6KCl+3H+6KCl+3H2 2O O 2 2）溴、碘易挥发，防止逸失）溴、碘易挥发，防止逸失 3 3）溴代物水中不溶，需加）溴代物水中不溶，需加HACHAC、CHClCHCl3 3或或EtOH EtOH 4 4）溴过量）溴过量2 2为宜为宜 5 5）空白试验）空白试验 6 6）化学计量关系：化学计量关系：1 1：6 6 1 1药物药物=3Br=3Br2 2=3I=3I2 2=6Na=6Na2 2S S2 2O O3 3 溴量法溴量法67盐酸去氧肾上腺素盐酸

46、去氧肾上腺素 【含量测定含量测定】取本品约取本品约0.1g，精密称定，精密称定，置碘瓶中，加水置碘瓶中，加水20ml使溶解，精密加溴滴使溶解，精密加溴滴定液定液(0.05mol/L)50ml，再加盐酸，再加盐酸5ml，立，立即密塞，放置即密塞，放置15分钟并时时振摇，注意微分钟并时时振摇，注意微开瓶塞，加碘化钾试液开瓶塞，加碘化钾试液10ml，立即密塞，立即密塞，振摇后，用硫代硫酸钠滴定液振摇后，用硫代硫酸钠滴定液(0.1mol/L)滴滴定，至近终点时，加淀粉指示液，继续滴定，至近终点时，加淀粉指示液，继续滴定至蓝色消失，并将滴定的结果用空白试定至蓝色消失，并将滴定的结果用空白试验校正。每验校

47、正。每1ml溴滴定液溴滴定液(0.05mol/L)相当相当于于3.395mg的的C9H13NO2HCl。68重酒石酸间羟胺重酒石酸间羟胺 【含量测定含量测定】取本品约取本品约0.1g，精密，精密称定，置碘瓶中，用水称定，置碘瓶中，用水40ml使溶解，精密使溶解，精密加溴滴定液加溴滴定液(0.05mol/L)40ml，再加盐酸，再加盐酸8ml，立即密塞，放置，立即密塞，放置15分钟，注意微开瓶分钟，注意微开瓶塞，加碘化钾试液塞，加碘化钾试液8ml，立即密塞，振摇，立即密塞，振摇，用少量水冲洗碘瓶的瓶塞和瓶颈，加三氯用少量水冲洗碘瓶的瓶塞和瓶颈，加三氯甲烷甲烷1ml，振摇，用硫代硫酸钠滴定液，振摇

48、，用硫代硫酸钠滴定液(0.1mol/L)滴定，至近终点时，加淀粉指示滴定，至近终点时，加淀粉指示液，继续滴定至蓝色消失，并将滴定的结液，继续滴定至蓝色消失，并将滴定的结果用空白试验校正。每果用空白试验校正。每1ml溴滴定液溴滴定液(0.05mol/L)相当于相当于5.288mg的的C9H13NO2C4H6O6。69 利用药物分子结构中的利用药物分子结构中的Ar-OHAr-OH与与FeFe3 3络合显络合显色，进行比色测定；色，进行比色测定； 也可利用药物分子结构中的也可利用药物分子结构中的Ar-NHAr-NH2 2重氮化偶重氮化偶合显色，进行比色。合显色，进行比色。三、比色法三、比色法70例如

49、：盐酸克伦特罗栓的含量测定例如：盐酸克伦特罗栓的含量测定 上述偶合剂可与上述偶合剂可与HNOHNO2 2显色，干扰比色测定，可先加氨基显色，干扰比色测定，可先加氨基磺酸铵分解过量的磺酸铵分解过量的HNOHNO2 2。HNOHNO2 2 2H2H2 2NSONSO3 3NHNH4 42N2N2 2 + (NH + (NH4 4) )2 2SOSO4 4 + H + H2 2SOSO4 4 +H +H2 2O OClN2+Cl -CH(OH)CH2NHC(CH3)3ClClCH(OH)CH2NHC(CH3)3ClNHCH2CH2NH2+N=NNHCH2CH2NH2N-(1-萘基）乙二胺500nm比

50、色测定三、比色法三、比色法71盐酸克仑特罗栓盐酸克仑特罗栓 【含量测定含量测定】取本品取本品20粒，精密称定，切成小片，精密粒，精密称定，切成小片，精密称取适量称取适量(约相当于盐酸克仑特罗约相当于盐酸克仑特罗0.36mg)，置分液漏斗中，置分液漏斗中，加温热的三氯甲烷加温热的三氯甲烷20ml使溶解。用盐酸溶液使溶解。用盐酸溶液(9100)振摇振摇提取提取3次次(20ml、15ml、10m1)，分取酸提取液，置，分取酸提取液，置50ml量瓶中，用盐酸溶液量瓶中，用盐酸溶液(9100)稀释至刻度，摇匀，滤过，稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，作为供试品溶液；另取盐酸克仑特罗对照品适取续滤液，作为

51、供试品溶液；另取盐酸克仑特罗对照品适量，精密称定，加盐酸溶液量，精密称定，加盐酸溶液(9100)溶解并定量稀释制成溶解并定量稀释制成每每1ml中含中含7.2g的溶液，作为对照品溶液。精密量取对的溶液，作为对照品溶液。精密量取对照品溶液与供试品溶液各照品溶液与供试品溶液各15ml，分别置，分别置25ml量瓶中，各量瓶中，各加盐酸溶液加盐酸溶液(9100)5ml与与0.1亚硝酸钠溶液亚硝酸钠溶液1ml，摇匀，摇匀，放置放置3分钟，各加分钟，各加0.5氨基磺酸铵溶液氨基磺酸铵溶液1ml，摇匀，时时，摇匀，时时振摇振摇10分钟，再各加分钟，再各加0.1盐酸萘乙二胺溶液盐酸萘乙二胺溶液1ml，摇匀，摇匀

52、，放置放置10分钟，用盐酸溶液分钟，用盐酸溶液(9100)稀释至刻度，摇匀，照稀释至刻度，摇匀，照紫外紫外-可见分光光度法可见分光光度法(附录附录A)，在，在500nm的波长处分的波长处分别测定吸光度，计算，即得。别测定吸光度，计算，即得。72 盐酸克仑特罗：芳伯氨基盐酸克仑特罗：芳伯氨基 与亚硝酸钠定量发生重氮化反应与亚硝酸钠定量发生重氮化反应 永停滴定永停滴定四、亚硝酸钠法四、亚硝酸钠法73盐酸克仑特罗盐酸克仑特罗 【含量测定含量测定】取本品约取本品约0.25g，精密称定，精密称定，置置100ml烧杯中，加盐酸溶液烧杯中，加盐酸溶液(12)25ml使使溶解，再加水溶解，再加水25ml，照永

53、停滴定法，照永停滴定法(附录附录A)，用亚硝酸钠滴定液，用亚硝酸钠滴定液(0.05mol/L)滴定。滴定。每每1ml亚硝酸钠滴定液亚硝酸钠滴定液(0.05mol/L)相当于相当于15.68mg的的C12H18Cl2N2OHCl。74 取代苯环取代苯环特征吸收特征吸收 制剂含量测定制剂含量测定 盐酸甲氧明注射液、重酒石酸间羟胺注射盐酸甲氧明注射液、重酒石酸间羟胺注射液等。液等。五、紫外分光光度法五、紫外分光光度法75重酒石酸间羟胺注射液重酒石酸间羟胺注射液 【含量测定含量测定】精密量取本品精密量取本品5ml(约相约相当于间羟胺当于间羟胺50mg)，置，置50ml量瓶中，加水稀量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀；精密量取释至刻度，摇匀；精密量取5ml，置，置100ml量量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，照紫外瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，照紫外-可见可见分光光度法分光光度法(附录附录A)，在，在272nm的波长处的波长处测定吸光度，按测定吸光度，按C9