NO.7 —— 经典案例分析(试验中的各种技巧)

1、谢沐风谢沐风 上海市药品检验所上海市药品检验所各剂型关键技术评价指标各剂型关键技术评价指标l固体制剂固体制剂 溶出度溶出度l注射剂注射剂 有关物质、有关物质、pH值值l栓剂栓剂 融变时限、粒度融变时限、粒度l软膏剂软膏剂 粒度粒度l滴眼剂滴眼剂 渗透压、渗透压、pH值、有关物质值、有关物质l颗粒剂颗粒剂 溶化性、溶出度溶化性、溶出度l凝胶剂凝胶剂 粒度粒度l散剂散剂 缓冲盐的浓度缓冲盐的浓度l凝胶剂凝胶剂 【硼酸氯化钾缓冲液破坏卡波姆基质硼酸氯化钾缓冲液破坏卡波姆基质（取硼酸（取硼酸3.09g，加，加0.1mol/L氯化钾溶液氯化钾溶液500ml使溶解，再加使溶解，再加0.1mol/L氢氧化钠

2、溶液氢氧化钠溶液210ml，即得），即得） 】HPLC测定中的进样量的妙用测定中的进样量的妙用l溶出度测定小规格制剂时，加大进样量。溶出度测定小规格制剂时，加大进样量。l不要再采用荧光检测，一律采用不要再采用荧光检测，一律采用HPLC法法检测，加大进样量，提高精密度。检测，加大进样量，提高精密度。对照品的标化与对照品溶液的贮存对照品的标化与对照品溶液的贮存l 关键性指标要较原料药高。关键性指标要较原料药高。l 配制的母液在冰箱内存放一段时间仍可配制的母液在冰箱内存放一段时间仍可以使用、但必须经过验证。以使用、但必须经过验证。误差的传递与控制误差的传递与控制l 了解试验中每一步的误差，控制好其中

3、了解试验中每一步的误差，控制好其中误差最大的那一步。误差最大的那一步。l 从称量让大家体会到误差存在与传递。从称量让大家体会到误差存在与传递。l 掌握好误差、做到掌握好误差、做到“事半功倍事半功倍”！HPLC测定中的内标法测定中的内标法l产生的历史背景。产生的历史背景。l随着进样器精度的提高，已无任何意义！随着进样器精度的提高，已无任何意义！l相反还带来更大的误差！。相反还带来更大的误差！。紫外检测时测定小池的作用紫外检测时测定小池的作用l不要稀释，直接采用短池测定，提高工不要稀释，直接采用短池测定，提高工作效率。作效率。l吸收度太低时，应注意采用长池，提高吸收度太低时，应注意采用长池，提高灵

4、敏度，否则误差增大，无法作出正确灵敏度，否则误差增大，无法作出正确判断！判断！溶出度第三法的使用意义溶出度第三法的使用意义l当年产生的背景当年产生的背景l随着随着HPLC仪的普及，已无任何意义！仪的普及，已无任何意义！l检测技术也应体现检测技术也应体现”与时俱进与时俱进“的精神！的精神！二极管阵列检测器的剖析二极管阵列检测器的剖析l搞清楚原理，作用不是万能的！搞清楚原理，作用不是万能的！l适当地、合理地使用。适当地、合理地使用。试验中灵活技巧的应用举例试验中灵活技巧的应用举例l 含量均匀度的浸泡过程。含量均匀度的浸泡过程。l 含量测定浓度的设定越低越好，陈述含量测定浓度的设定越低越好，陈述各种

5、优点所在！各种优点所在！l 糖衣、薄膜衣、肠溶衣的去除与否！糖衣、薄膜衣、肠溶衣的去除与否！氢卤酸盐类药物容量分析方法氢卤酸盐类药物容量分析方法l高氯酸滴定法高氯酸滴定法 取一定量的样品，加冰醋酸取一定量的样品，加冰醋酸3050ml（如有结晶（如有结晶水，则需再加入醋酸酐水，则需再加入醋酸酐20 30ml）和醋酸汞试液）和醋酸汞试液5ml，用高氯酸滴定液（用高氯酸滴定液（0.1mol/L）滴定，使用指示剂指示）滴定，使用指示剂指示终点（或采用电位法指示终点），每终点（或采用电位法指示终点），每1ml高氯酸滴定高氯酸滴定液（液（0.1mol/L）相当于）相当于0.1毫摩尔物质量。毫摩尔物质量。l

6、氢氧化钠滴定法氢氧化钠滴定法 取一定量的样品，加取一定量的样品，加0.01mol/L盐酸溶液盐酸溶液5ml和乙和乙醇（或丙酮、异丙醇等能与水相溶的适宜溶剂）醇（或丙酮、异丙醇等能与水相溶的适宜溶剂）3050 ml，用氢氧化钠滴定液（，用氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）滴定，电）滴定，电位法指示终点，读取两滴定等当点之间的体积数，每位法指示终点，读取两滴定等当点之间的体积数，每1ml氢氧化钠滴定液（氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）相当于）相当于0.1毫摩尔的毫摩尔的物质量。物质量。分分 子子 结结 构构 式式NXHCl（或（或HBr）XH2O 滴滴 定定 曲曲 线线由检验方法不当所带来的由检

7、验方法不当所带来的“无奈无奈”！l列举酮康唑软膏含量测定的例子。列举酮康唑软膏含量测定的例子。l列举糖浆剂含量测定的例子。列举糖浆剂含量测定的例子。l检验方法的苯拙带来人力、物力和时检验方法的苯拙带来人力、物力和时 间上的浪费。！间上的浪费。！Excel 的的 使使 用用l常用函数：均值（常用函数：均值（AVERAGE）、标准差）、标准差（STDEV）、相对标准差、截距）、相对标准差、截距（INTERCEPT）、斜率（）、斜率（SLOPE）、相）、相关系数（关系数（CORREL）等。）等。l溶出度、含量均匀度、含量测定等计算。溶出度、含量均匀度、含量测定等计算。l稳定性考核的大批样品数据处理。

8、稳定性考核的大批样品数据处理。累积释放度公式如下累积释放度公式如下90010122CCC9010)(2133CCCC90010)(121 nnnCCCCC标标 准准 就就 是是 生生 产产 力力l溶液颜色。溶液颜色。lpH值范围。值范围。l原料药和制剂的有关物质限度。原料药和制剂的有关物质限度。l溶出度试验参数设定极为宽松。溶出度试验参数设定极为宽松。l含量均匀度、重量差异检测方法。含量均匀度、重量差异检测方法。含量测定浓度和色谱条件如何建立含量测定浓度和色谱条件如何建立l浓度不要与有关物质浓度一致；一般为浓度不要与有关物质浓度一致；一般为1/101/50、便、便于过滤、杂质干扰减少、积分更加

9、准确。于过滤、杂质干扰减少、积分更加准确。l色谱条件可与有关物质不一致，更加科学人性化。色谱条件可与有关物质不一致，更加科学人性化。l波长不是最大吸收波长亦可。波长不是最大吸收波长亦可。l要注意样品粉末占有一定的体积所引起的测定误差。要注意样品粉末占有一定的体积所引起的测定误差。对照品溶液与供试品溶液溶剂对照品溶液与供试品溶液溶剂尽可能一致的原则尽可能一致的原则l相差不超过相差不超过5。l溶出度测定时对照品溶液配制技巧。溶出度测定时对照品溶液配制技巧。l列举列举USP实例实例。气相色谱法测定时应注意的问题（气相色谱法测定时应注意的问题（1）l将对照品溶液的浓度配制为限度点。将对照品溶液的浓度配

10、制为限度点。l对于二氯甲烷、三氯甲烷采用对于二氯甲烷、三氯甲烷采用FID检测器检测器勉为其难、应采用勉为其难、应采用ECD检测器。如要强行检测器。如要强行检测，可采用的办法有检测，可采用的办法有l供试品溶液一定要全部溶解。供试品溶液一定要全部溶解。l对于一些高沸点和低沸点的残留溶剂，不对于一些高沸点和低沸点的残留溶剂，不推荐采用顶空法进样！推荐采用顶空法进样！气相色谱法测定时应注意的问题（气相色谱法测定时应注意的问题（2）l顶空瓶塞垫可否重复使用。顶空瓶塞垫可否重复使用。l直接进样法与顶空法的优缺点比较。直接进样法与顶空法的优缺点比较。l定性时、多根色谱柱使用的意义。定性时、多根色谱柱使用的意

11、义。l色谱柱选择的一定要遵循色谱柱选择的一定要遵循“极性相似极性相似”的原理。的原理。l直接法进样，样品溶液之后，进样针极其容易直接法进样，样品溶液之后，进样针极其容易堵塞。自动进样器时设定几针溶剂，冲洗时多堵塞。自动进样器时设定几针溶剂，冲洗时多洗几次。试验结束后用乙醇浸泡进样针。洗几次。试验结束后用乙醇浸泡进样针。新药申报资料整理的注意事项新药申报资料整理的注意事项(1) 首要时清晰。看得见！代表了一个企业的形象。首要时清晰。看得见！代表了一个企业的形象。(2) 为他人着想，是给评审老师看的，不是给自己看的。现为他人着想，是给评审老师看的，不是给自己看的。现在药检所和审评中心将有时间和精力

12、来看了。在药检所和审评中心将有时间和精力来看了。(3) 10号资料中关键图谱一定要附上。含量测定、有关物质、号资料中关键图谱一定要附上。含量测定、有关物质、溶出度紫外扫描图谱等、参考文献等。溶出度紫外扫描图谱等、参考文献等。(4) 11号资料中的参考文献，起草说明，一定要详细阐述。号资料中的参考文献，起草说明，一定要详细阐述。文字撰写一定要清楚，不要怕写得多，要清楚详细，让文字撰写一定要清楚，不要怕写得多，要清楚详细，让他人一幕了然、清晰明了。他人一幕了然、清晰明了。(5) 12号资料中的具体数值。号资料中的具体数值。(6) 14号资料中，需检测的项目不要遗漏调，不同的剂型一号资料中，需检测的项目不要遗漏调，不同的剂型一定要深入研究。定要深入研究。有关物质测定时有关物质测定时自身对照溶液配制问题自身对照溶液配制问题 用取样量最少的供试品溶液稀用取样量最少的供试品溶液稀释即可、决不要逐一稀释测定。释即可、决不要逐一稀释测定。 这是一个小学生数学问题！亦这是一个小学生数学问题！亦深刻反映出目前业内因循守旧的指深刻反映出目前业内因循守旧的指导思想！导思想！生产