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文档简介
1、实验六影响酶促反应速度的因素【目的】观察温度、PH激活剂、抑制剂对酶促反应速度的影响。【原理】唾液淀粉酶催化淀粉水解,生成一系列水解产物,即糊精、麦芽糖和葡萄糖等。淀粉 及其水解产物遇碘会呈现不同的颜色。在不同温度,不同 PH值下,唾液淀粉酶活性不同,催化淀粉水解程度不一,生成的 产物也就不同。此外,激活剂、抑制剂也能影响淀粉酶活性,影响淀粉的水解。因此可根 据在不同反应条件下, 溶液加碘呈现的不同颜色来判断淀粉的水解程度,从而验证了温度、pH、激活剂、抑制剂对酶促反应速度的影响。淀粉呈蓝色I 2【器材】试管(10mnX 100mm、试管架、电热恒温水浴箱、沸水浴、冰浴、多孔白瓷板、滴管。【试
2、剂】1.1%淀粉溶液同实验五2.稀碘溶液称取碘2g,碘化钾4g,溶于1 000蒸馏水中,置棕色试剂瓶中。3.缓冲液(1) pH3.0缓冲液取 0.2mol/LNa 2HPQ溶液 205ml, 0.1mol/L 柠檬酸溶液 795ml,混合后即成。(2) pH6.8缓冲液同实验五(3) pH8.0缓冲液合后即成。取 0.2mol/LNa 2HPO溶液 972ml, 0.1mol/L 柠檬酸溶液 28ml,混4.1%NaCI 溶液称取氯化钠1g,加蒸馏水至100ml即成。5.1%CuSO 溶液称取结晶硫酸铜1g,加蒸馏水至100ml。6.1%Na2SQ 溶液称取硫酸钠1g,加蒸馏水至100ml即成
3、。7.稀释唾液 同实验五。【操作】1.温度对酶促反应速度的影响取3支试管,编号,按下表操作:表3-8 温度对酶促反应的影响力口入物(滴)123PH6.8缓冲液2020201%淀粉溶液101010置37C水浴5分钟置沸水浴5分钟置冰水浴5分钟稀释唾液555置37 C水浴10分钟置沸水浴10分钟置冰水浴10分钟取出,各管加入碘液 1滴,摇匀,观察并记录颜色变化。2.PH对酶促反应速度的影响取3支试管,编号,按下表操作:加入物(滴)123PH3.0缓冲液20一一PH6.8缓冲液一20一PH8.0缓冲液一一201%淀粉溶液101010稀释唾液555摇匀,置37 C水浴保温,每隔1分钟从2号管中吸取1滴
4、反应液于白瓷板上,加碘液1滴检查反应进行情况,直至反应液不与碘液反应时,向各管各加入1滴碘液,摇匀,观察并记录颜色变化。3 .激活剂与抑制剂对酶促反应速度的影响取4支试管,编号,按下表操作:表3-10 激活剂和抑制剂对酶活性的影响力口入物(滴)1234表3-9 pH对酶促反应的影响1%淀粉溶液10101010pH6.8缓冲液1% NaCI溶液1% CuSO溶液20202020101051%NaSQ蒸馏水10稀释唾液5混匀,置37 C水浴中保温10分钟取出,各管加入碘液各 1滴,观察并记录颜色变化。【结果及分析】观察各管颜色变化,说明温度、pH、激活剂、抑制剂对酶促反应的影响。【思考题】1. 何谓最适温度?温度对酶促反应有何影
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