松叶色素的超声提取及其粗提物抗氧化性研究毕业答辩-文档资料

1、1松叶色素的超声提取及其粗提物抗氧化松叶色素的超声提取及其粗提物抗氧化性研究性研究姓名：班级：应用化学09-1学号：200905030009指导老师：茹宗玲2目录目录l一.绪论l二.超声提取松针色素的工艺探究 l三.松针粗提物的抗氧化性研究 l四.结论l五.问题与展望l六.致谢3一一.绪论绪论45一一.绪论绪论l1.1研究背景 随着人类回归自然意识的日益增强以及对合成色素危害性认识的逐步加深，天然色素的优点越来越受到重视。据预测。在未来的几年天然色素每年将以510%的速度增加。天然色素的开发和利用已成为当今社会色素的发展趋势。 松叶是松树加工中的废弃物，随着松树加工业的发展废弃松针数量日益增加

2、，造成极大浪费。 因此，从松叶中提取色素不仅利于松树的综合利用，也是获取天然色素的重要途径。6一一.绪论绪论l1.2 本课题研究的目的和意义 本文旨在探索松针中色素的提取关键技术并探究松叶提取物抗氧化性。利用超声波辅助提取松针中的色素，研究提取过程中温度、提取剂浓度、料液比、时间对其提取效果的影响，设计正交实验对超声波辅助提取松针中的色素的工艺进行优化，寻找最佳提取工艺。进行清除超氧阴离子自由基能力和清除羟基自由基能力的测定，为实现松针的综合利用提供一定的理论基础。7二二.超声提取松针色素的工艺探究超声提取松针色素的工艺探究l2.1实验材料及仪器实验材料：采自安阳工学院的雪松松针 无水乙醇为分

3、析纯 实验用 水均为去离子水实验仪器：昆山市超声仪器有限公司的KQ5200DE数控超声波清洗 器、北京通用普析有限公司的T6新世纪紫外分光光度计、河南巩义市杜甫仪器厂的B型新型电热恒温干燥箱、郑州市杜甫仪器厂 的SHB-3循环水式多用真空泵、天津市泰斯特仪器有限公司的FW135中草药粉碎机、浙江上虞市星星仪器设备有限公司的20目标准筛 、上海奥豪斯仪器有限公司的CP214电子天平 8二二.超声提取松针色素的工艺探究超声提取松针色素的工艺探究l2.2实验方法l2.2.1提取工艺流程 将采集的雪松松针清洗后，于恒温干燥箱中50烘干后粉碎装入试剂瓶待用。用电子天平准确称1.0000g粉碎过的雪松松针

4、，放入50ml的小烧杯中。然后加入一定体积的乙醇溶液，在一定温度下超声提取一定时间。将松叶提取物在紫外可见光下进行色谱扫描，确定最大吸收波长。将得到的提取液进行真空旋蒸浓缩，然后放入燥箱干燥，得色素提取物。9松叶样品松叶样品松叶提取液松叶提取液10二二.超声提取松针色素的工艺探究超声提取松针色素的工艺探究l2.2.2 单因素实验 在其他条件一致的情况下，分别用不同的乙醇浓度不同的料液比、不同的时间、不同温度对雪松松针色素超声提取，提取液在最大吸收波长处测吸光度，计算相对含量。l2.2.3 正交试验l根据单因素实验设计正交试验表如下：水水平平A提取时间提取时间（min）B提取温提取温度（度（）C

5、乙醇浓乙醇浓 （%）D料液比料液比（g/ml）11020801:2522030901:3033040951:3511二二.超声提取松针色素的工艺探究超声提取松针色素的工艺探究l2.2.4 提取级数的确定及产率的确定 根据正交试验确定的最佳条件多次提取松叶色素直至提取物无色，分别收集提取液并在紫外光下测最大吸收峰处吸光度，并计算相对含量。 将收集的多级提取液混合并减压蒸馏得到膏状物，烘干后称重并计算产率。 12二二.超声提取松针色素的工艺探究超声提取松针色素的工艺探究l2.3实验结论l2.3.1最大波长的确定 右图表明提取液在660nm处有最大吸收峰。因吸光度与浓度成正比，故可由提提液的吸光度计

6、算相对含量。 松叶提取物紫外吸收光谱松叶提取物紫外吸收光谱13二二.超声提取松针色素的工艺探究超声提取松针色素的工艺探究l2.3.2 单因素实验乙醇浓度对提取效果的影响温度对提取效果的影响14二二.超声提取松针色素的工艺探究超声提取松针色素的工艺探究时间对提取效果的影响料液比对提取效果的影响15二二.超声提取松针色素的工艺探究超声提取松针色素的工艺探究l2.3.3正交试验 根据单因素试验设计出L9（34）正交试验，其结果如下表所示。提取效果影响因素的顺序为乙醇浓度温度时间料液比，方差分析表明浓度和温度对提取条件的影响具有显著性，是影响提取效果的主要因素，优化组合为：乙醇浓度95%，温度40，时

7、间20min，料液比1:30。16序号 A时间（min） B温度（）C浓度（%）D料液比（g/ml）相对含量11020801:2510.821030901:3020.431040951:3528.5642020901:3520.4452030951:2531.8562040801:3024.0373020951:3026.0483030801:3521.73593040901:2531.675K119.80019.09318.85524.775K225.44024.54224.05223.370K326.48328.08828.81723.578R6.6838.9959.9621.405正交试

8、验结果表正交试验结果表17因素偏差平方和自由度F比F临界值显著性时间77.56520.8794.460温度123.17321.3954.460浓度148.94521.6874.460料液比3.44920.0394.460方差分析表方差分析表18二二.超声提取松针色素的工艺探究超声提取松针色素的工艺探究l2.3.4提取级数的确定 取1.0000g松针样品，在乙醇浓度95%，温度40，时间20min，料液比1:30下超声提取松叶色素，在最大吸收波长660nm处测定吸光度，并计算相对含量，所得结果如右图所示，确定提取级数为三级提取级数对含量的影响19二二.超声提取松针色素的工艺探究超声提取松针色素的

9、工艺探究l2.3.5 产率的计算 减压蒸馏浓缩干燥，最终得到膏状产品0.2906g，产率为29.06% 。l2.4 本章结论 利用超声波提取松叶色素的最佳条件是：溶剂95%乙醇、温度40、料液比为1：30、提取时间为20min，提取级数为三级。 运用次方法提取松叶粗提物的产率是29.06%。 20三三.松叶粗提物抗氧化性研究松叶粗提物抗氧化性研究l3.1 实验材料及仪器l3.1.1 实验材料 无水乙醇、Tris试剂、抗坏血酸、邻苯三酚、浓盐酸、邻菲罗林、硫酸亚铁、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、30%H2O2均为国产分析纯，实验用水为去离子水。l3.1.2 实验仪器 河南巩义市杜甫仪器厂的B型玻璃仪器

10、气流烘干器 、北京通用普析有限责任公司的T6新世纪紫外分光光度计、金坛市杰瑞尔电器有限公司HH-6数显恒温水浴锅 21三三.松叶粗提物抗氧化性研究松叶粗提物抗氧化性研究l3.2 实验方法l3.2.1清除超氧阴离子自由基l原理l方法：加样方法如右表吸光度A加样量A04.5mL Tirs-HCl+4.2mL H2O+0.3mL邻苯三酚溶液AS14.5mL Tirs-HCl+3.2mL H2O+1.0mL20%色素溶液+0.3mL邻苯三酚溶液AS24.5mL Tirs-HCl+3.2mL H2O+1.0mL40%色素溶液+0.3mL邻苯三酚溶液AS34.5mL Tirs-HCl+3.2mL H2O+

11、1.0mL60%色素溶液+0.3mL邻苯三酚溶液As44.5mL Tirs-HCl+3.2mL H2O+1.0mL 20%Vc 溶液+0.3mL邻苯三酚溶液22三三.松叶粗提物抗氧化性研究松叶粗提物抗氧化性研究3.2.2 清除羟基自由基能力的测定 l原理l方法：加样方法如下表23吸光度吸光度加样量加样量A损伤损伤1.5mL邻二氮菲邻二氮菲7.5 mmol/L + 5.0mL PH=7.4磷酸盐缓冲溶液磷酸盐缓冲溶液+ 1.5ml FeSO4溶液溶液7.5 mmol/L+2.0mL 0.1% H2O2+2mL H2OA空白空白1.5mL邻二氮菲邻二氮菲7.5 mmol/L +5.0mLPH=7.

12、4磷酸盐缓冲溶液磷酸盐缓冲溶液+ 1.5ml FeSO4溶液溶液7.5 mmol/L +4.0 mL H2O A加样加样11.5mL邻二氮菲邻二氮菲7.5 mmol/L+5.0mLPH=7.4磷酸盐缓冲溶磷酸盐缓冲溶+1.5mLFeSO4溶液溶液7.5 mmol/L +2mL20%色素溶液色素溶液+2.0mL 0.1% H2O2A加样加样21.5mL邻二氮菲邻二氮菲7.5 mmol/L+5.0mLPH=7.4磷酸盐缓冲溶磷酸盐缓冲溶+1.5mLFeSO4溶液溶液7.5 mmol/L +2mL40%色素溶液色素溶液+2.0mL 0.1% H2O2A加样加样31.5mL邻二氮菲邻二氮菲7.5 mm

13、ol/L+5.0mLPH=7.4磷酸盐缓冲溶磷酸盐缓冲溶+1.5mLFeSO4溶液溶液7.5 mmol/L +2mL60%色素溶液色素溶液+2.0mL 0.1% H2O2 清除羟自由基加样表清除羟自由基加样表24三三.松叶粗提物抗氧化性研究松叶粗提物抗氧化性研究l3.3实验结论l3.3.1清除超氧自由基不同体系紫外吸收光谱25三三.松叶粗提物抗氧化性研究松叶粗提物抗氧化性研究不同浓度色素随时间变化的清除作用不同浓度色素随时间变化的清除率26三三.松叶粗提物抗氧化性研究松叶粗提物抗氧化性研究l3.3.2 清除羟基自由基样品样品吸光度吸光度清除率清除率损伤损伤0.8630.863空白空白1.206

14、1.20620%20%提取物提取物0.990.9937.02%37.02%40%40%提取物提取物1.0641.06458.6%58.6%60%60%提取物提取物1.1121.11272.59%72.59%清除羟自由基结果表清除羟自由基结果表27三三.松叶粗提物抗氧化性研究松叶粗提物抗氧化性研究3.4本章结论l松叶提取物有较强的清除羟基自由基，但清除作用较小于VC，清除作用在一定的范围内随着浓度的增加而增加，随着时间的增加清除率变小。l同时松叶提取物具有一定的清除超氧自由基作用，清除作用在一定的范围内随着浓度的增加而增加。28四、结论四、结论l1.通过单因素实验和正交试验得出松叶色素的最佳提取条件为：乙醇浓度95%、提取时间为20min、温度为40、料液比为1:30、提取级数为三级。l2.利用最佳提取条件下提取色素粗提物的产率29.06%。l3.松叶色素对超氧自由基有一定的清除作用，在一定的范围内，是随着色素浓度的增加而增加，随着时间的增加清除率下降。对羟基自由基也有一定的清除作用，且清除率随着粗提物浓度增加而增加。 29五五.问题与展望问题与展望l1.松叶色素的精制分离还待进一步探究。l2.松叶色素的稳定性需要探究。l3.松叶色素在食品中的应用还需进一步探究。30六六.致谢致谢l大学生活即将结束，在此，我要感谢所有曾经教导过大学生活即将结束，在此，我要感谢所有曾经教导过我的老