苍术麸炒后增量成分探究

1、苍术鉄炒后增量成分探究摘要目的明确苍术鉄炒后的增量成分并建立该 成分的含量测定方法。方法采用高效液相色谱法对生苍术 和鉄炒苍术的色谱图进行比较，并与对照品进行比对，确定 魏炒后的增量成分；增量成分的含量测定釆用高效液相色谱 法，色谱条件为 tigerkin c18 (5 p m, 4. 6 mmx250 mm) 色谱柱；流动相为乙月青-水(5 : 95)；检测波长为284 nm； 柱温为25°c；流速为1. 0 ml/mino结果5-轻甲基糠醛是 苍术鉄炒后的主要增量成分；测定了 14个不同地区市售苍 术片及自制的鉄炒苍术片中5-释甲基糠醛的含量，发现鉄炒 苍术中该成分的量高于生苍术

2、片2倍以上。结论鉄炒导致 苍术中5-密甲基糠醛的含量增加。关键词苍术；鉄炒；5-務甲基糠醛；含量测定中图分类号r284. 1 文献标识码a 文章编号 1673-7210 (2014) 02 (b) -0105-04st udy on the incremental composition in atractylodis rhizoma after being stir-fried with wheat branliu jiaxinl, 2 li guyuel, 2 cai qian31. the first affiliated hospital of china medicalunivers

3、ity , liaoning province , shenyang 110000 ,china； 2. pharmacy college of china medical university, liaoning province , shenyang 110000 , china ；3.pharmacy college of liaoning university of traditional chinese medicine, liaoning province, dalian 116600, chinaabstract objective to clarify the incremen

4、tal composition in atractylodis rhizoma after being stir-fried with wheat-bran and establish the methods of determining the content of 5-hmf in crude and processed atractylodis rhizoma. methods by comparing the hplc chromatography of crude and processed atractylodis rhizoma, the incremental composit

5、ion was clear. the content determination was carried out using a tigerkin c18 column (5 p m, 4.6 mmx250 mm) with the mobile phase of acetonitrile-water (5 : 95) the detection wavelength was set at 284 run. colum n temperature was maintained at 25°c flow rate was 1. 0 ml/min. results 5-hmf was t

6、he incremental composition； the contents of 5-hmf in crude and processed atractylodis rhizoma collected from different regions were determined and the contents of 5-hmf in processed atractylodis rhizoma were higher over two times thancrude ones. conclusion processing atractylodis rhizoma with wheat

7、bran can increase the content of 5hmf.key words atractylodis rhizoma； process withwheat bran； 5-hmf； content determination苍术为菊科植物茅苍术atractylodes lancea (thunb.)dc.或北苍术 atractylodes chinensis (dc. ) koidz.的干燥根茎。性温，味辛、苦，归脾、肝经。具有燥湿健脾、祛风散寒之功效，用于月完腹胀满、泄泻、水肿、脚气、痿风 湿痹痛、风寒感冒、夜盲等症1。中国药典（2010年版） 收载有生苍术和鉄炒苍术。苍

8、术中含有5%9%的挥发油，由一系列的倍半菇、聚乙烯烘类及少量的酚类、有机酸类成分 组成；非挥发性成分主要有氨基酸多烘类化合物倍半菇糖昔 等水溶性成分以及少量糠醛2-4 o文献报道，由于麦鉄的吸附作用导致苍术获炒后挥发油的含量下降5,挥发油中 的聚乙烯烘类成分和倍半菇类成分的含量也有所下降6； 除挥发性成分外，有文献报道苍术中的多糖类成分在鉄炒后 含量也下降7。根据苍术鉄炒后健脾作用增强这一传统理 论8,笔者推测苍术获炒后某些成分的含量应该有所增加。 本文通过对比苍术鉄炒前后的高效液相图谱，明确了苍术获 炒后的增量成分为5-発甲基糠醛，并采用高效液相色谱法建 立了秋炒前后5-懸甲基糠醛的含量测定

9、方法，采用此方法测 定了 14个不同来源的生苍术和自行炮制的鉄炒苍术中5-軽甲基糠醛的含量，初步明确苍术鉄炒后增量成分的含量变化 情况。1仪器与试药1.1仪器agilent llooseries高效液相色谱仪（美国安捷伦科技 有限公司）；tigerkin c18 （5 um, 4. 6 mmx250 mm）色谱 柱（大连思普精工有限公司）；kh-300b型超声清洗器（昆山 禾创超声仪器有限公司）；sartoriuscp225d型电子天平（十 万分之一，德国sartorius公司）。1.2试药5-務甲基糠醛对照品，购自上海源叶生物科技有限公 司，经液相色谱用归一化法测定，纯度均大于98%o苍术药

10、 材或饮片购自全国14个地区，由辽宁中医药大学药用植物 教研室王冰教授鉴定为菊科植物茅苍术atractylodes lancea（thunb. ）dc.或北苍术 atractylodes chinensis（dc.） koidz. o鉄炒品按中国药典（2010年版）鉄炒方法自行 炮制。乙晴（色谱纯，天津市科密欧化学试剂有限公司）； 娃哈哈纯净水（杭州娃哈哈集团有限公司）。2方法与结果2. 1苍术鉄炒后增量成分研究的方法和结果2. 1. 1 色谱条件 tigerkin c18 （4. 6 mmx 250 mm, 5 u m） 色谱柱，流动相（乙月青-0.25%磷酸水）梯度洗脱，检测波长 为 25

11、7 nm,柱温 25°c,流速 1. 0 ml/min,进样量 10 nl, 按表1梯度进行洗脱。2. 1.2生苍术和鉄炒苍术供试品溶液的制备分别取生 苍术和鉄炒苍术饮片粉碎过筛（60目），各精密称取2.0 g, 置于250 ml圆底烧瓶中，加入80ml水，加热回流提取2h, 过滤，浓缩滤液，再用石油瞇（609（tc）连续萃取两次， 弃去石油瞇层，浓缩水层定容至5ml容量瓶中，过0.22 um 微孔水膜，备用。2. 1.3 5-軽甲基糠醛对照品溶液的制备 取5-轻甲基糠 醛对照品适量，加甲醇制成每1 ml含0. 01 mg的溶液，即 得。2. 1.4结果生苍术和秋炒苍术供试品溶液的高

12、效液相 色谱见图lo由生苍术和鉄炒苍术的高效液相色谱图对比结 果可知，鉄炒后保留时间约为21 min的色谱峰的峰面积明 显增加，推测其为苍术鉄炒后的增量成分。笔者进一步采用dad检测器测定保留时间为21 min色 谱峰的紫外图谱，见图2o从图2中可以看出该吸收峰的最 大吸收波长是284 nm,在230 nm也有吸收峰，根据该化合 物吸收峰所在的波长和两个吸收峰强度之间关系，推测此紫 外图谱所对应的化合物可能是5-務甲基糠醛。为证实21 min的吸收峰对应的化合物就是5-轻甲基糠 醛，按上述色谱条件，将苍术供试品溶液和5-務甲基糠醛对 照品溶液各进样10 ul,得液相色谱图。见图3、4o从图3和

13、图4可以看出，5-释甲基糠醛对照品的保留时间就是21 min,与苍术鉄炒后含量增加较大的色谱峰的保留时间一致, 因此确定5-龛甲基糠醛为苍术鉄炒后增量成分。2. 2 5-轻甲基糠醛含量测定的方法和结果2. 2. 1 色谱条件 tigerkin c18 （4. 6 mmx250 mm, 5 u m） 色谱柱；流动相为乙月青-水（5 : 95）；检测波长为284 nm； 柱温为25°c；流速为1. 0 ml/min；进样量为10 ulo2. 2.2对照品溶液的制备精密称取5-轻甲基糠醛对照 品适量，加甲醇制成每1 ml含0. 01 mg的溶液，即得。2. 2.3供试品溶液的制备 取本品粉

14、末（过60目筛）约 0.5 g,置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇溶液10 ml,称定质 量，超声处理（功率250 w,频率50 khz）,放冷，再称定 质量，用甲醇补足减失的质量，摇匀，滤过，定容至25 nil 棕色量瓶中，过0.45 um微孔滤膜即得。谱图见图5、6o2. 2.4线性关系考察精密吸取5-释甲基糠醛对照品溶 液（质量浓度为 0. 0091 mg/ml） 2. 0、4. 0、6. 0、8. 0、10. 0、 12.0 ul注入高效液相色谱仪中，测定峰面积，以进样量 （ug）为横坐标（x）,峰面积为纵坐标（y）,进行线性回 归，得回归方程为y = 5924. 8x+3. 7667, r

15、 = 0. 9991,提示5-軽甲基糠醛在0.0182-0. 1092 u g范内具有良好的线性关系。2. 2.5精密度试验取同一供试品溶液（产地：湖北衡 阳），连续进样6次，每次10 ul,测得5-懸甲基糠醛峰面 积的rsd为1.9%,表明该方法的精密度良好。2. 2.6稳定性试验 精密吸取同一供试品溶液（产地： 湖北衡阳），分别于0、2、4、8、12、48 h进样，测得5- 轻甲基糠醛色谱峰面积的rsd为2. 5%,表明该供试品溶液在 配制后48 h内测定，稳定性良好。2. 2.7重复性试验取本品（产地：湖北衡阳），精密称 定，共6份。按前述方法测定5-轻甲基糠醛的含量，结果平 均含有量为

16、0.011%, rsd为2. 9%,重复性良好。2. 2.8加样回收率试验 精密称取本品（产地：湖北衡 阳，5-務甲基糠醛含有量为0.011%） 0. 25 g,共6份，加入 质量浓度为0. 0091 mg/nil的5-発甲基糠醛对照品溶液3 ml, 按前述方法制备和测定。测定结果提示：本方法回收率在 9& 3%99. 8%之间，rsd为2. 1%,符合有关规定。2. 2.9样品测定结果 分别测定了 14个地区生苍术片及 自制的获炒苍术片中5-轻甲基糠醛的含量，结果见表2。表2生苍术和鉄炒苍术中5-餐甲基糠醛含量测定结果 （n 二 3）3讨论3.1苍术鉄炒前后5-释甲基糠醛的含量变化情

17、况本文在通过高效液相色谱法对比生苍术和鉄炒苍术的 色谱图，并与对照品进行比对，确定了苍术铁炒后5-発甲基糠醛的含量增加较大，是苍术隸炒的主要增量成分之一。在 此基础上，建立生苍术和铁炒苍术中5-餐甲基糠醛的含量测 定方法，通过测定不同地区收集的生苍术和自行炮制的获炒 苍术中5-轻甲基糠醛的含量可以看出，虽然不同地区的苍术 中5-轻甲基糠醛的含量有差异，但鉄炒后5-轻甲基糠醛的 含量均有所增加9-11 o3.2 5-務甲基糠醛含量增加的原因结合苍术秋炒前后多糖的含量下降的测定结果，分析5- 務甲基糠醛含量增加的原因可能是苍术在鉄炒加热过程中 所含有的糖类成分和氨基酸发生了 ma订lard反应12

18、-13, 导致该反应的产物之一 5-務甲基糠醛的含量增加。3. 3 5-務甲基糠醛的药理作用5-軽甲基糠醛是葡萄糖等单糖化合物在高温或弱酸等 条件下脱水产生的一个醛类化合物，一般经炮制或加热后含 量会升高。现阶段对于5-释甲基糠醛探讨存在着很大的争 论。有报道称该化合物对人体横纹肌和内脏有毒副作用等。 但近年来有研究发现，5-務甲基糠醛具有抗氧化、抗心肌缺 血、ca2+拮抗活性以及改善血液流变学等对人体有益的作用 14-15 o本文发现苍术鉄炒后5-轻甲基糠醛的含量增加， 但其是否是苍术鉄炒后健脾作用增强的原因还需进行进一 步的研究。3. 4检测波长和洗脱方式的确定本文在进行生苍术和秋炒苍术高

19、效液相色谱图比较时， 发现波长为257 nm时色谱峰较多，故采用此波长进行测定。 同时为使各色谱峰较好地分离，流动相采用梯度洗脱的方 式；而在进行5-務甲基糠醛的含量测定时，则采用该化合物 的最大吸收波长284 nm作为检测波长，同时为了操作简便, 在保证5-轻甲基糠醛良好分离度的前提下，流动相采用等度 洗脱的方式。参考文献1 国家药典委员会中国药典s. 部北京：中国医 药科技出版社,2010： 150-151.2 关颖丽.苍术化学成分的现代研究进展j.人参研 究，2007, (1)： 28-33.3 欧阳臻，江涛涛，缪亚东，等.苍术的化学成分、 道地性和药理活性研究进展j.时珍国医国药，2006, 10(17)： 1936-1938.4 李霞，王金辉，李铳，等.北苍术化学成分的研究 j.沈阳药科大学学报，2002, 9 (3)： 178.5 王爱武，田景奎，耿晖，等.苍术炒制前后挥发油 成分的研究j华西药学杂志,2004, 19 (6)： 417-418.6 刘玉强，才谦，贾天柱.鉄炒前后苍术中3种成分 的 hplc 测