土壤中分解尿素细菌的分离

1、1课题课题3 分解纤维素的微生物分解纤维素的微生物的分离的分离2课题背景课题背景 纤维素，地球上含量最丰富的多糖类物质，纤维素，地球上含量最丰富的多糖类物质，40%-70%能被产生纤维素酶的微生物分解利能被产生纤维素酶的微生物分解利用。认识此类微生物，对于人们充分利用秸秆用。认识此类微生物，对于人们充分利用秸秆等废弃物生产所需，在非常重要的意义。等废弃物生产所需，在非常重要的意义。3基础知识基础知识（一）纤维素与纤维素酶（一）纤维素与纤维素酶成熟的棉株成熟的棉株 纤维素是一种由葡萄糖首尾相纤维素是一种由葡萄糖首尾相连的高分子化合物。棉花是自然界连的高分子化合物。棉花是自然界中纤维素含量最高的天

2、然产物。中纤维素含量最高的天然产物。纤维素纤维素4纤维素酶（复合酶）纤维素酶（复合酶）纤维素酶水解滤纸实验C1酶CX酶酶葡萄糖苷酶纤维素纤维素纤维二糖纤维二糖葡萄糖葡萄糖实验：实验：操作操作现象现象解析解析5（二）纤维素分解菌的筛选（二）纤维素分解菌的筛选四种纤维素分解菌在刚果红培养基上形成的透明圈刚果红染色法刚果红染色法刚果红刚果红+纤维素纤维素 红色复合物红色复合物6实验设计实验设计7资料一资料一 土壤取样土壤取样 由于生物与环境的相互依存关系，在富含纤维素的环由于生物与环境的相互依存关系，在富含纤维素的环境中，纤维素分解菌的含量相对提高，因此从这种土样中境中，纤维素分解菌的含量相对提高，

3、因此从这种土样中获得目的微生物的几率要高于普通环境。获得目的微生物的几率要高于普通环境。 将滤纸埋在土壤中能使纤维素分解菌相对聚集，实将滤纸埋在土壤中能使纤维素分解菌相对聚集，实际上是人工设置纤维素分解菌生存的适宜环境。一般应际上是人工设置纤维素分解菌生存的适宜环境。一般应将纸埋于深约将纸埋于深约10 cm左右腐殖土壤中。左右腐殖土壤中。 8资料二资料二 选择培养选择培养培养基的配制原则培养基的配制原则目的明确目的明确营养协调营养协调PHPH适宜适宜根据微生物根据微生物种类种类、培养、培养目的目的选择培养基选择培养基细菌（细菌（6.5-7.56.5-7.5） 放线菌放线菌(7.5-8.5)(7

4、.5-8.5)酵母菌、霉菌（酵母菌、霉菌（45.845.8）培养基的种类培养基的种类固体：固体：微生物分离、记数微生物分离、记数半固体：半固体：观察运动、趋化性研究、菌种鉴定、观察运动、趋化性研究、菌种鉴定、 厌氧菌培养厌氧菌培养液体：液体：工业生产工业生产根据物理性质根据物理性质水水 碳源碳源 氮源氮源PP、SKSK、MgMg生长因子生长因子9根据用途根据用途选择培养基选择培养基选择培养基选择培养基：加入某种化学物：加入某种化学物质，抑制不需要的微生物，促质，抑制不需要的微生物，促进需要的微生物生长进需要的微生物生长加纤维素加纤维素-选择纤维素分解菌选择纤维素分解菌鉴别培养基鉴别培养基鉴别培

5、养基鉴别培养基：培养基中加入：培养基中加入某种指示剂或化学药品，鉴某种指示剂或化学药品，鉴别不同种类的微生物别不同种类的微生物刚果红刚果红-纤维素分解菌（纤维素分解菌（红色红色）10资料三资料三 刚果红染色法刚果红染色法方法一方法一方法二方法二11结果分析与评价结果分析与评价121.1.通过选择培养基可以从混杂的微生物群体中分离出所需的通过选择培养基可以从混杂的微生物群体中分离出所需的微生物。在缺乏氮源的培养基上大部分微生物无法生长；在培微生物。在缺乏氮源的培养基上大部分微生物无法生长；在培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌；在培养基加入养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌；在培养基加入10

6、10酚可以抑制细菌和霉菌。利用下述方法能从混杂的微生物群体酚可以抑制细菌和霉菌。利用下述方法能从混杂的微生物群体中分别分离出中分别分离出 ( )( ) A. A.大肠杆菌大肠杆菌 B.B.霉菌霉菌 C.C.放线菌放线菌 D.D.固氮细菌固氮细菌反馈练习反馈练习D132.2.培养蘑菇时常使用的原料为棉籽壳、花生粉饼。请简答下培养蘑菇时常使用的原料为棉籽壳、花生粉饼。请简答下列问题：列问题： 按照化学成分，该培养基为按照化学成分，该培养基为 培养基，按物理性培养基，按物理性质，该培养基为质，该培养基为 培养基。培养基。 培养过程中发现培养基上长出了其他杂菌，经鉴定为培养过程中发现培养基上长出了其他杂菌，经鉴定为细菌。细菌与蘑菇的关系为细菌。细菌与