总砷含量测定的方法验证作业指导书

1、作业指导书文件编号： YZJC/ZCJS05-001版本修改：第I版第0次修订总种含量测定的方法验证页 数：共5页第1页颁布日期：2017-1-6编写许振国审核工艺霖批准钟炼一、方法验证依据参照GB 5009.112014食品安全国家标准 食品中总种及无机种的测定，制定总种含 量测定方法验证的作业指导书。二、方法验证条件2.1 仪器及配套设备1.1 PF6-3原子荧光光度计，配种（As）空心阴极灯。1.2 电子天平：感量为 0.1mg1.3 马弗炉1.4 标准溶液：种（As）标准溶液，浓度1.0mg/mL=2.2 试剂及配制硝酸：优级纯硼氢化钾：分析纯氢氧化钾：分析纯盐酸：优级纯硫酸：优级纯硝

2、酸镁：分析纯氧化镁：分析纯抗坏血酸硫月尿+抗坏血酸溶液：称取10.0g硫月尿，加约80ml水，加热溶解，待冷却后加入 10.0g 抗坏血酸，稀释至100mL现用现配。硝酸镁溶液（150g/L）:称取15.0g硝酸镁，溶于水并稀释至100mL盐酸溶液（1+1）：量取100ml盐酸，缓缓倒入100ml水中，混匀。硫酸溶液（1+9）:量取100ml硫酸，缓缓倒入900ml水中，混匀。硝酸溶液（5+95）:量取5ml,缓缓倒入95ml水中，混匀。硼氨化钾溶液（15g/L）:称取15.0g硼氢化钾，溶于5.0g/L的氢氧化钾溶液中，并稀释 至1000ml,混匀,现用现配。作业指导书文件编号：YZJC/Z

3、CJS-05-001版本修改：第I版第0次修订总种含量测定的方法验证页 数：共5页第2页颁布日期：2017-1-62.3 标准溶液配制准确吸取1.00mL种标准溶液(1.0mg/mL)于100mL容量瓶中，用硝酸溶液(2+98)稀释 定容至刻度，即为10mg/L标准使用液；按照稀释办法，依次获得 100(ig/L、10g/L的标准 使用液。2.环境条件(1)环境温度：(10-35 ) C。(2)相对湿度： 85%(3)电源：电压为(220± 22) V,频率(50± 1) Hz,并具有良好的接地。(4)仪器应置于水平无振动的工作台上，操作时不得有摇动现象。(5)场所应通风良

4、好，不得有强光直射，仪器周围无强磁场，电场或振动源干扰，无强气流干扰。三、方法验证项目检测要求，方法验证内容为：1.基线稳定性；2,测量重复性；3.加标回收率四、分析步骤4.1 试样的预处理4.1.1 在采样和制备过程中，应注意不使试样污染。4.1.2 粮食、豆类等样品去杂物后粉碎均匀，装入洁净聚乙烯瓶中，密封保存备用。4.1.3 蔬菜、水果、鱼类、肉类及蛋类等新鲜样品，洗净晾干，取可食用部分匀浆，装入洁净聚乙烯瓶中，密封，于 4c冰箱冷藏备用4.2 试样的消解4.2.1 干法灰化称取样品1.0g左右，置于50ml培竭中，同时做两份空白。加150g/L硝酸镁10mL混匀，低热蒸干，将1g氧化镁

5、覆盖在干渣上，于电炉上炭化至无黑烟，移入550c马弗炉灰化4h,作业指导书文件编号：YZJC/ZCJS05-001版本修改：第I版第0次修订总种含量测定的方法验证页 数：共5页第3页颁布日期：2017-1-6取出放冷，小心加入盐酸溶液（1+1） 10ml,以中和氧化镁并溶解灰分，转入 25ml容量瓶或比 色管中加入硫月尿+抗坏血酸溶液2ml,另用硫酸溶液（1+9）分次洗涤地竭合并洗涤液至 25ml, 刻度，混匀，放置30min,待测。同时做空白试验。4.3 仪器条件负高压：280v;神空心阴极灯电流：50mA载气流速：300mL/min；屏蔽气流速：300mL/min；测量方式：荧光强度；读数

6、方式：峰面积。4.4 标准曲线的制作使用原子荧光光度计自动配置标准曲线，标准系列使用液浓度，配置成浓度1.0囚/L、2.0 ©L、4.0皿L、8.0闺/L、10.0 aL ;测定好仪器的最佳条件，连续用2%勺硝酸溶液进样，待读数稳定以后，转入标准系列测量，绘制标准曲线。4.5 试样溶液的测定相同条件下，将样品溶液分别引入仪器进行测定。根据回归方程计算出样品中种元素的浓度。计算方法参照公式（1）4.6 加标回收率在试样中根据试样种含量的1-2倍加入神标样，进行试样处理，处理后的试样溶液按照上述最佳条件进行测量，测量结果计算加标样的回收率，计算方法参照公式（2）04.7 方法检出限将仪器

7、各参数调整至正常状态，分别对种标准溶液的每一个浓度点分别进行三次重复测定，取平均值后，按线性回归法求出工作曲线斜率（b）,即为仪器的灵敏度。在相同的条件下，对空白溶液（或浓度三倍于检出限的溶液）进行11次吸光度测量，并 求出其标准偏差（sA）。式中：？?- 单次测量值卷-测量平均值作业指导书文件编号：YZJC/ZCJS05-001版本修改：第I版第0次修订总种含量测定的方法验证页 数：共5页第4页颁布日期：2017-1-6n测量次数按下式计算仪器测种的方法检出限Q:QL（K=3） = 3S/S（ p g/ml）五、结果分析1 .试样中总种含量按下式计算:公式（1）(C-?0) XVX 1000

8、?= 0mx 1000 x 1000式中:X -试样中种的含量，单位为毫克每千克（mg/kg）;C -试样被测液中种的测定浓度，单位为纳克每毫升（ng/mL）C0 一试样空白消化液中的神的测定浓度，单位为纳克每毫升（ng/mL）V -试样消化液总体积，单位为毫升（mD ；M -试样质量，单位为克（g）或毫升（mD； 计算结果保留两位有效数字。2 .加标回收率按下式计算：”? X 0.025-? 1 X ? / ,? = 1 X100% 公式（2）1 ?0式中：Xi -加标样品的回收率，单位为（%。C -加标样品被测液中种的 测定浓度，单位为纳克每毫升（ng/mL.）X -试样中种的含量，单位为毫克每千克（mg/kg）;m -加标试验的称样质量，单位为克（g）m -加标量，单位为（n g）六、方法验证结果的判定1.1 基线稳定性基线的相关系数0.991.2 测定总种的重复性（RSD）测量重复性0 3%作业指导书文件编号：YZJC/ZCJS05-001版本修改：第I版第0次修订总种含量测定的方法验证页 数：共5页第5页颁布日期：2017-1-66.3 加标回收