设计性实验----机械损伤对马铃薯生理性质的影响

1、设计性实验机械损伤对马铃薯生理性质的影响成员：2009236105郭银炫2009236107苏彩婉2009236108钟丽桃2009236116 钟玉娴 2009236117 陈毓文2009236123 t丹丽（一）刀器割伤对马铃薯多酚氧化酶（ppo）活性测定一、实验目的：掌握测定多酚氧化酶活性的方法；了解多酚氧化酶的特性二、实验原理：多酚氧化酶是一种含铜的氧化酶，能使一元酚和二元酚氧化生成醍。 醍有颜色，在525nm下有最大光吸收，通过分光光度法测定反应体 系颜色变化可测定酶活性。三、器材与试剂1、仪器：低温离心机、分光光度计2、试剂：0mol l儿茶酚、ph 7.2磷酸缓冲液3、材料：马铃

2、薯四、实验步骤：1 称取马铃薯0.5克，加入2.5ml ph 7.2磷酸缓冲液，少许pvp, 研磨匀浆，转移到离心管，再用2.5mlph7.2磷酸缓冲液冲洗研钵, 合并提取液。4°c 4000rpm离心15分钟，上清液即为粗酶液。2. 在试管中，加入25mlph72磷酸缓冲液,1.5ml儿茶酚（邻苯 二酚）以及lml粗酶液，空白调零以iml磷酸缓冲液代替粗酶液。3. a值测定：加入粗酶液后迅速混匀，立刻于525mn下测定反应体 系的a值，每隔10秒记录一次，共记录5次。4计算酶活力。按下式计算ppo 活性= u/min gfwa值增加0.001定义为一个酶活力单位。5刀割伤后每隔1个

3、小时，按上述步骤重复做三次刀割对ppo活力的影响时间/h系列1系列2五、实验报告:时间(h)0123完好马铃薯0.3120.4150.5230.326a值损伤马铃薯0.1330.1230.1200.127a值六.实验结果：马铃薯机械损伤后，多酚氧化酶活性降低随着时间的增长，多酚氧化酶的活性越来越低七.实验分析及讨论1 完好马铃薯在放置三个小时后的ppo活性显著变大答：,ppo活力可能与马铃薯的大小有关，马铃薯体积越大，酶量较多，酶活力越大2, 刀割放置四个小时后，马铃薯ppo活力微升答：取材部位较前三次深入表皮，而ppo活力与马铃薯的选材部位 有关，靠近表皮的ppo易被氧化，所以活力比中间部位

4、的马铃薯的 ppo的活力小3, 刀割后，促进马铃薯氧化褐变，所以酶活力越来越低（二）失重率与呼吸强度的测定一、机械损伤对马铃薯失重率的影响（1）各取一个完好和刮伤的马铃薯用电子天平称重，每隔6小时称 量一次，记录数据。（2）实验数据：表一:质,智(oh6h12h24h完好的马铃薯89.0288.968&7788.73损伤的马铃薯68.0367.6766.4464.22表二:失 1-隔 重时oh6h12h24h完好00.07%0.28%0.32%损伤00.53%2.33%5.6%t-完好 -损伤图一：机械损伤对马铃薯失重率的影响注：纵坐标是失重率（3）结论：机械损伤对增强马铃薯的蒸腾失水

5、，导致马铃薯的质量减 少，失重率比完好的大。二、机械损伤对马铃薯呼吸强度的影响（1）本实验以完好的马铃薯和刮伤的马铃薯做对比试验，采用静置 法测定它们呼吸强度的变化，每隔6小时测定一次，记下数据，分析 机械损伤对呼吸强度的影响。（2）实验材料与试剂0.4mol/l氢氧化钠、0.2mol/l草酸、饱和氯化顿溶液、1%酚駄指示剂、凡士林。干燥器（直径25cm）、滴定管架、25ml酸式滴定管、150ml三角瓶、e 10cm培养皿、10ml移液管、洗耳球、天平。（3）实验数据与结果：表三：记录数据体相积隔(时oh6h12h18h24h完好的马铃薯8.248.278.288.318.30刮伤的马铃薯8.

6、278.198.248.298.29空白试验8.39&408.398.418.40表四：马铃薯呼吸强度的变化呼吸相.度(时oh6h12h18h24h完好的马铃薯15.0512.8510.889.919.91刮伤的马铃薯15.0527.1619.5015.6114.31图二：完好和刮伤的马铃薯呼吸强度的变化注：(4)纵坐标是呼吸强度，单位是mg/(kg.h)结论:马铃薯是非跃变型果蔬，其呼吸强度在成熟期间随时间的增长而不断下降，而受到机械损伤的马铃薯刚开始呼吸强度不正常的增加， 到达一定的高峰之后，随着时间的增长，其呼吸强度也逐渐降低，到 达一定的程度后，变化幅度小，几乎不变。所以在果蔬

7、贮运期间要尽 量避免机械损伤，果蔬受到机械损伤，呼吸强度增强，体内有机物质 消耗快，降低果蔬的贮藏寿命。（三）马铃薯总可溶性固形物含量的测定（折光仪法）一，实验目的测定完好的马铃薯与损伤后的马铃薯固形物含量变化情况。二、药品与器材马铃薯（一个完好的，一个有机械损伤的，蒸憾水； 手持式折光仪、烧杯、滴管、擦镜纸（或棉花）。三、操作步骤1、仪器的校正 打开手持式折光仪盖板，用擦镜纸或棉花小心 擦干棱镜玻璃面。在棱镜玻璃面上滴2滴蒸憾水，盖上盖板。朝向光 源明亮处，于水平状态，从接眼部处观察，检查视野中明暗交界线是 否处在刻度的零线上。若与零线不重合，则旋动刻度调节螺旋，使分 界线面刚好落在零线上。2、打开盖板，将水擦干，在棱镜玻璃面上滴2滴马铃薯汁，朝 向光源明亮处观测，读取视野中明暗交界线上的刻度，即为果蔬汁中可溶性固形物含量（）。3、每个样品重复测定三次，取其平均值，以百分数计算。4、连续使用仪器测定不同试样时，在每次测完后，用清水冲洗 洁净.再用干燥的镜纸擦干净，才可继续进行测试。测试结束后，必 须擦净镜身各部分。四. 实验数据完好 损伤时间段种类0时6小时12小时24小时完好的马铃薯7.88.18.28.4损